د هغو ناروغانو لپاره چې د ارتوپیډیک امپلانټ جراحي څخه تیریږي، باکتریایي انتانات او د انفیکشن هڅول معافیت غبرګونونه تل د ژوند ګواښونکي خطرونه دي.دودیز بیولوژیکي مواد د بیولوژیکي ککړتیا لپاره حساس دي، کوم چې باکتریا د ټپي شوي ساحې برید کوي او د عملیاتو وروسته انفیکشن المل کیږي.له همدې امله، د اورتوپیډیک امپلانټونو لپاره د انفیکشن ضد او معافیت څخه د خلاصون کوټینګ رامینځته کولو ته بیړنۍ اړتیا شتون لري.دلته، موږ د ارتوپیډیک امپلانټونو لپاره د سطحي ترمیم پرمختللې ټیکنالوژي رامینځته کړې چې د لوبریکیټ آرتوپیډیک امپلانټ سرفیس (LOIS) په نوم یادیږي ، کوم چې د پیچر بوټو پیچرونو نرم سطح څخه الهام اخیستل کیږي.LOIS د مختلفو مایعاتو او بیولوژیکي موادو (په شمول د حجرو، پروټینونو، کلسیم او باکتریا په شمول) اوږدمهاله او قوي مایع مخنیوی لري.سربیره پردې ، موږ د ویټرو جراحۍ په جریان کې د لازمي زیان په سمولو سره د سکریچونو او فکس کولو ځواک پروړاندې میخانیکي پایښت تایید کړ.د خرگوش د بون میرو التهابي فیمورل فریکچر ماډل د LOIS د بیولوژیکي پیمانه کولو او د انفیکشن ضد وړتیا په بشپړه توګه مطالعه کولو لپاره کارول شوی و.موږ فکر کوو چې LOIS، چې د بایو فولینګ ضد ملکیتونه او میخانیکي پایښت لري، د انفیکشن څخه پاک ارتوپیډیک جراحي کې یو ګام مخکې دی.
نن ورځ، د ټول عمر له امله، د اورتوپیډیک ناروغیو (لکه د زړو ضایعاتو، د ګډو ګډو ناروغیو او اوستیوپوروسس) د ناروغانو شمیر خورا زیات شوی دی (1، 2).له همدې امله، طبي بنسټونه د ارتوپیدي جراحي ته ډیر اهمیت ورکوي، پشمول د پیچونو، تختو، نوکانو او مصنوعي تړلو آرتوپیډیک امپلانټونه (3، 4).په هرصورت، دودیز اورتوپیډیک امپلانټونه راپور شوي چې د باکتریایي چپکولو او بایوفیلم جوړولو لپاره حساس دي، کوم چې کولی شي د جراحۍ وروسته د جراحي سایټ انفیکشن (SSI) لامل شي (5, 6).یوځل چې بایوفیلم د اورتوپیډیک امپلانټ په سطحه رامینځته شي ، د بایوفیلم لرې کول خورا ستونزمن کیږي حتی د انټي بیوټیکونو لوی خوراکونو کارولو سره.له همدې امله، دا معمولا د شدید پوستکي انتاناتو لامل کیږي (7، 8).د پورتنیو ستونزو له امله، د اخته شوي امپلانټ درملنه باید د ټولو امپلانټونو او شاوخوا نسجونو لرې کولو په شمول بیا عملیات شامل وي؛له همدې امله، ناروغ به سخت درد او ځینې خطرونه ولري (9, 10).
د دې ځینو ستونزو د حل لپاره، د مخدره توکو الیټ کولو آرتوپیډیک امپلانټونه رامینځته شوي ترڅو د سطح سره تړل شوي باکتریا له مینځه وړلو سره د انفیکشن مخه ونیسي (11، 12).په هرصورت، ستراتیژي لاهم یو شمیر محدودیتونه ښیي.دا راپور ورکړل شوی چې د مخدره توکو اوږدمهاله امپلانټونو شاوخوا شاوخوا نسجونو ته زیان رسولی او د پړسوب لامل کیږي ، کوم چې ممکن د نیکروسس لامل شي (13, 14).برسېره پردې، هغه عضوي محلولونه چې کیدای شي د مخدره توکو د ارتوپیډیک امپلانټونو د تولید پروسې وروسته شتون ولري، کوم چې د متحده ایاالتو د خوړو او درملو ادارې لخوا په کلکه منع شوي، د دې معیارونو پوره کولو لپاره اضافي پاکولو ګامونو ته اړتیا لري (15).د مخدره توکو له مینځه وړلو امپلانټونه د مخدره توکو کنټرول شوي خوشې کولو لپاره ننګونې دي، او د دوی د محدودو درملو بار کولو له امله، د مخدره توکو اوږدمهاله غوښتنلیک ممکن نه دی (16).
بله عامه ستراتیژي دا ده چې امپلانټ د انټي فولینګ پولیمر سره پوښ ​​​​کړي ترڅو د بیولوژیکي مادې او باکتریا مخه ونیسي چې سطح ته غاړه کیږدي (17).د مثال په توګه، zwitterionic پولیمر د پلازما پروټینونو، حجرو او باکتریا سره په تماس کې د دوی د غیر چپکونکي ملکیتونو له امله پاملرنه راجلب کړې.په هرصورت، دا د اوږدې مودې ثبات او میخانیکي پایښت پورې اړوند ځینې محدودیتونه لري، کوم چې د ارتوپیډیک امپلانټونو کې د عملي غوښتنلیک مخه نیسي، په ځانګړې توګه د جراحي پروسیجرونو په جریان کې د میخانیکي سکریپینګ له امله (18, 19).برسېره پردې، د دې د لوړ بایو مطابقت له امله، د لیرې کولو جراحۍ ته د اړتیا نشتوالی، او د زنګ له لارې د سطحې پاکولو ملکیتونه، د بایوډیګریډ وړ موادو څخه جوړ شوي آرتوپیډیک امپلانټونه کارول شوي (20، 21).د زنګ وهلو په جریان کې ، د پولیمر میټرکس ترمینځ کیمیاوي بانډونه مات شوي او له سطحې څخه جلا کیږي ، او پیروان سطح پاکوي.په هرصورت، د سطحې پاکولو په واسطه د بیولوژیکي ضد ضد ضد په لنډ وخت کې اغیزمن کیږي.برسېره پردې، ډیری د جذب وړ مواد په شمول د پولی (لیټیک اسید-ګلایکولیک اسید کاپولیمر) (PLGA)، پولیلیکیک اسید (PLA) او د مګنیزیم پر بنسټ الیاژ به په بدن کې غیر مساوي بایوډیګریشن او تخریب سره مخ شي، کوم چې به په میخانیکي ثبات باندې منفي اغیزه وکړي.(دوه ویشت).برسېره پردې، د بایوډیګریډ وړ پلیټ ټوټې د باکتریا لپاره د نښلولو لپاره ځای چمتو کوي، کوم چې په اوږد مهال کې د انفیکشن چانس زیاتوي.د میخانیکي تخریب او انفیکشن دا خطر د پلاستيکي جراحۍ عملي غوښتنلیک محدودوي (23).
سوپرهایډروفوبیک (SHP) سطحې چې د لوټس د پاڼو درجه بندي جوړښت تقلید کوي د فاولنګ ضد سطحونو لپاره احتمالي حل ګرځیدلی (24, 25).کله چې د SHP سطحه په مایع کې ډوب شي، د هوا بلبلونه به په لاره واچول شي، په دې توګه د هوا جیبونه جوړوي او د باکتریا د چپکولو مخه نیسي (26).په هرصورت، وروستیو څیړنو ښودلې چې د SHP سطح د میخانیکي پایښت او اوږدمهاله ثبات پورې اړوند زیانونه لري، کوم چې په طبي امپلانټونو کې د هغې غوښتنلیک خنډوي.برسېره پردې، د هوا جیبونه به منحل شي او خپل د فاول ضد ځانګړتیاوې له لاسه ورکړي، په دې توګه د SHP سطحې د لوی سطحې ساحې (27, 28) له امله د پراخ باکتریایي چپکونو په پایله کې.په دې وروستیو کې، ایزنبرګ او همکارانو د Nepenthes pitcher نبات (29, 30) څخه الهام اخیستونکي د نرم سطح په جوړولو سره د بایو فولینګ ضد سطحي پوښښ یو نوښت میتود معرفي کړ.نرمه سطحه د هیدرولیک شرایطو لاندې اوږدمهاله ثبات ښیي، د بیولوژیکي مایعاتو لپاره خورا مایع ضد دی، او د ځان ترمیم ځانګړتیاوې لري.په هرصورت، د پیچلي شکل طبي امپلانټ ته د پوښ کولو لپاره هیڅ طریقه شتون نلري، او نه هم دا ثابته شوې چې د امپلانټیشن وروسته د زیانمن شوي نسج د شفاهي پروسې مالتړ وکړي.
دلته، موږ د غوړ شوي آرتوپیډیک امپلانټ سطح (LOIS) معرفي کوو، یو مایکرو/نانو ساختماني ارتوپیډیک امپلانټ سطحه او د یو پتلي غوړ پرت سره په کلکه سره یوځای کیږي ترڅو د پلاستيکي جراحۍ سره د باکتریایي انتاناتو سره تړاو ولري، لکه د فریکچر فکسیشن.ځکه چې د فلورین فعالیت شوی مایکرو/نانو کچې جوړښت په جوړښت کې غوړ په کلکه تنظیموي ، نو پرمختللی LOIS کولی شي په بشپړ ډول د مختلف مایعاتو چپکولو مخه ونیسي او د اوږدې مودې لپاره د فولینګ ضد فعالیت وساتي.د LOIS کوټینګونه د مختلف شکلونو موادو باندې پلي کیدی شي چې د هډوکي ترکیب لپاره هدف وي.د بایوفیلم باکتریا [Pseudomonas aeruginosa او methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)] او بیولوژیکي موادو (حجرو، پروټینونو او کلسیم) په وړاندې د LOIS غوره بایوفیلینګ ځانګړتیاوې په ویټرو کې تایید شوي.سبسټریټ ته د پراخه چپکولو د چپکولو کچه له 1٪ څخه کمه ده.سربیره پردې ، حتی وروسته له دې چې میخانیکي فشار لکه د سطحې سکریچ کول پیښیږي ، د ننوتلو غوړ له امله رامینځته شوي ځان درملنه د دې د فاول کولو ضد ملکیتونو ساتلو کې مرسته کوي.د میخانیکي پایښت ازموینې پایلې ښیې چې حتی د جوړښت او کیمیاوي تعدیل وروسته ، ټول ځواک به د پام وړ کم نشي.برسېره پردې، د ویټرو تجربه چې په جراحي چاپیریال کې د میخانیکي فشار سره سمون لري ترسره شوې ترڅو ثابت کړي چې LOIS کولی شي د مختلف میخانیکي فشارونو سره مقاومت وکړي چې د پلاستيکي جراحۍ په جریان کې واقع کیږي.په نهایت کې ، موږ د ویوو فیمورل فریکچر ماډل کې د خرگوش پراساس وکاروو ، کوم چې دا ثابته کړه چې LOIS غوره انټي باکتریا ملکیتونه او بایو مطابقت لري.رادیولوژیکي او هسټولوژیکي پایلو تایید کړه چې د امپلانټیشن څخه وروسته د 4 اونیو په اوږدو کې مستحکم غوړ چلند او د بایو فولینګ ضد ملکیتونه کولی شي د هډوکي درملنې پروسې ځنډولو پرته د انفیکشن ضد مؤثره او د معافیت تېښتې فعالیت ترلاسه کړي.
شکل 1A د پرمختللې LOIS سکیماټیک ډیاګرام ښیي، کوم چې د خرگوش فیمورل فریکچر ماډل کې د مایکرو/نانو پیمانه جوړښتونو سره نصب شوی ترڅو د دې غوره انټي بیولوژیکي فاولنګ او د انفیکشن ضد ځانګړتیاوې تایید کړي.د بایومیمیټیک میتود د اوبو د کڅوړې نبات د سطحې انډول کولو لپاره ترسره کیږي، او د سطحې په مایکرو/نانو جوړښت کې د لبریکین پرت شاملولو سره د بایو فولینګ مخه نیسي.هغه سطحه چې د غوړ سره انجیک شوی وي کولی شي د بیولوژیکي موادو او سطحې تر مینځ اړیکه کمه کړي.له همدې امله، په سطحه د باثباته کیمیاوي بانډونو د جوړولو له امله، دا د غوره antifouling فعالیت او اوږد مهاله ثبات لري.د پایلې په توګه، د غوړولو سطحه د بایو فولینګ ضد ملکیتونه د بایو میډیکل څیړنې کې مختلف عملي غوښتنلیکونو ته اجازه ورکوي.په هرصورت، په دې اړه پراخه څیړنه چې دا ځانګړې سطحه څنګه په بدن کې تعامل کوي لا تر اوسه ندي بشپړ شوي.د البومین او بایوفیلم باکتریا په کارولو سره په ویټرو کې د LOIS د ننوتو فرعي موادو سره پرتله کولو سره، د LOIS غیر چپکوالی تایید کیدی شي (شکل 1B).برسېره پردې، د اوبو د څاڅکو په مینځلو سره په لیرې وړ وړ سبسټریټ او LOIS سبسټریټ (شکل S1 او Movie S1) کې د بیولوژیکي ککړتیا فعالیت ښودل کیدی شي.لکه څنګه چې د فلوروسینس مایکروسکوپ عکس کې ښودل شوي، د پروټین او باکتریا په تعلیق کې افشا شوي سبسټریټ په سطح کې د بیولوژیکي موادو لوی مقدار ښیي.په هرصورت، د دې د غوره بایو فولینګ ضد ځانګړتیاو له امله، LOIS په سختۍ سره هیڅ فلوروسینس نه ښیې.د دې د بایو فولینګ ضد او د انفیکشن ضد ملکیتونو تصدیق کولو لپاره ، LOIS د هډوکي ترکیب (پلیټونو او پیچونو) لپاره د ارتوپیډیک امپلانټونو په سطحه پلي شوی او د خرگوش فریکچر ماډل کې کیښودل شوی.د امپلانټیشن څخه دمخه، د ناپاک اورتوپیډیک امپلانټ او LOIS د 12 ساعتونو لپاره د باکتریا په تعلیق کې ځای پرځای شوي و.پری انکیوبیشن ډاډ ورکوي چې د پرتله کولو لپاره د افشا شوي امپلانټ په سطحه یو بایوفیلم رامینځته شوی.شکل 1C د امپلانټیشن څخه 4 اونۍ وروسته د فریکچر سایټ عکس ښیې.په کیڼ اړخ کې، یو خرگوش چې د ارتوپیډیک امپلانټ سره د امپلانټ په سطحه د بایوفیلم رامینځته کیدو له امله د سوزش سخته کچه ښودلې.برعکس پایله د LOIS سره نصب شوي خرگوش کې لیدل شوي، دا د LOIS شاوخوا نسجونو نه د انفیکشن نښې نښانې او نه د التهاب نښې ښودلې.برسېره پردې، په کیڼ اړخ کې نظری عکس د افشا شوي امپلانټ سره د خرگوش جراحي ساحه په ګوته کوي، دا په ګوته کوي چې د افشا شوي امپلانټ په سطحه د LOIS په سطحه کې هیڅ څو چپکونکي شتون نلري.دا ښیي چې LOIS اوږدمهاله ثبات لري او د دې وړتیا لري چې د بیولوژیکي فاولنګ ضد او د چپکولو ضد ملکیتونه وساتي.
(الف) د LOIS سکیماتیک ډیاګرام او د خرگوش فیمورل فریکچر ماډل کې د هغې امپلانټیشن.(ب) د پروتین او باکتریا بایوفیلم فلوروسینس مایکروسکوپي عکس په خالي سطح او LOIS سبسټریټ کې.د امپلانټیشن څخه 4 اونۍ وروسته، (C) د فریکچر سایټ عکس او (D) د ایکس رے عکس (د سور مستطیل لخوا روښانه شوی).د انځور له خوا: کیومین چای، یونسي پوهنتون.
تعقیم شوي، افشا شوي په منفي ډول لګول شوي خرگوش د هډوکي د درملنې نورمال پروسه ښودلې چې پرته له کومې سوزش یا انفیکشن نښې دي.له بلې خوا، د SHP امپلانټونه د باکتریا تعلیق کې مخکې له مخکې انکیوب شوي په شاوخوا نسجونو کې د انفیکشن پورې اړوند سوزش څرګندوي.دا کیدی شي د اوږدې مودې لپاره د باکتریایي چپکولو مخه ونیسي (شکل S2).د دې لپاره چې ثابت شي چې LOIS د شفاهي پروسې اغیزه نه کوي، مګر د امپلانټیشن پورې اړوند احتمالي انتاناتو مخه نیسي، د افشا شوي مثبت میټرکس ایکس رے انځورونه او د فریکچر سایټ کې LOIS پرتله شوي (شکل 1D).د برج مثبت امپلانټ د ایکس رے عکس دوامداره اوستیولوزیز لینونه ښیې ، دا په ګوته کوي چې هډوکي په بشپړ ډول روغ شوی نه و.دا وړاندیز کوي چې د هډوکي بیا رغونه پروسه ممکن د انفیکشن پورې اړوند سوزش له امله خورا وځنډول شي.برعکس، دا وښودله چې د LOIS سره ایښودل شوي خرگوش روغ شوي او د فریکچر کوم ښکاره ځای ندی ښودلی.
د اوږدمهاله ثبات او فعالیت سره د طبي امپلانټونو پراختیا لپاره (د بایو فولینګ مقاومت په شمول) ، ډیری هڅې شوي.په هرصورت، د بیالبیلو بیولوژیکي موادو شتون او د نسجونو د نښلولو متحرکات د دوی د کلینیکي پلوه معتبر میتودونو پراختیا محدودوي.د دې نیمګړتیاوو د لرې کولو لپاره، موږ د مایکرو/نانو پرت لرونکي جوړښت او په کیمیاوي ډول تعدیل شوی سطح رامینځته کړی، کوم چې د لوړ کیپیلري ځواک او کیمیاوي تړاو له امله غوره شوی ترڅو تر ډیره حده نرم غوړ وساتي.شکل 2A د LOIS ټولیز تولید پروسه ښیي.لومړی، د طبي درجې سټینلیس سټیل (SS) 304 سبسټریټ چمتو کړئ.دوهم، مایکرو/نانو جوړښت د SS سبسټریټ کې د هایدروفلوریک اسید (HF) محلول په کارولو سره د کیمیاوي نقاشۍ په واسطه رامینځته کیږي.د SS د زنګون مقاومت د بیرته راګرځولو لپاره، د نایټریک اسید (HNO3) محلول (31) کارول کیږي ترڅو د ایچ شوي سبسټریټ پروسس کړي.Passivation د SS سبسټریټ د زنګون مقاومت لوړوي او د پام وړ د زنګ وهلو پروسه ورو کوي چې ممکن د LOIS عمومي فعالیت کم کړي.بیا، د 1H، 1H، 2H، 2H-perfluorooctyltriethoxysilane (POTS) سره د ځان سره راټول شوي مونویلیر (SAM) په جوړولو سره، سطحه په کیمیاوي ډول تعدیل کیږي ترڅو د سطحې او د نرم غوړ سره تړاو ته وده ورکړي.د سطحې تعدیل د پام وړ د جوړ شوي مایکرو/نانو پیمانه جوړښت شوي سطحې انرژي د پام وړ کموي ، کوم چې د نرم غوړ د سطحې انرژي سره سمون لري.دا اجازه ورکوي چې غوړ په بشپړه توګه لندبل شي، په دې توګه په سطح کې یو مستحکم غوړ پرت جوړوي.بدل شوی سطح د هایدروفوبیکیت لوړوالی ښیې.پایلې ښیي چې ټوټه ټوټه غوړ د مایکرو/نانو جوړښت (32, 33) له امله د لوړ کیمیاوي تړاو او کیپیلري ځواک له امله په LOIS کې باثباته چلند څرګندوي.د SS په سطحه نظری بدلونونه د سطحی ترمیم او غوړ انجیکشن وروسته مطالعه شوی.په سطحه جوړ شوی مایکرو/نانو پرت جوړښت کولی شي د لید بدلون لامل شي او سطح تیاره کړي.دا پدیده په ناڅاپه سطحه د رڼا توزیع کولو اغیزې ته منسوب شوی، کوم چې د رڼا د مینځلو میکانیزم (34) له امله د خپریدو انعکاس زیاتوي.برسېره پردې، وروسته له دې چې غوړ انجیکشن کیږي، LOIS تیاره کیږي.د غوړولو طبقه د دې لامل کیږي چې لږ ر lightا د سبسټریټ څخه منعکس شي ، پدې توګه LOIS تیاره کوي.د مایکروسټرکچر/نانوسټرکچر اصلاح کولو لپاره د انټي بایو فولینګ فعالیت ترلاسه کولو لپاره ترټولو کوچنۍ سلیډینګ زاویه (SA) ښودلو لپاره ، سکین کولو الکترون مایکروسکوپي (SEM) او اټومي جوړه د مختلف HF ایچنګ وختونه ترسره کولو لپاره کارول شوي (0, 3).، 15 او 60 دقیقې) ځواک مایکروسکوپ (AFM) (شکل 2B).د SEM او AFM عکسونه ښیي چې د اینچ کولو لنډ وخت وروسته (د ایچ کولو 3 دقیقې) ، د ننه سبسټریټ غیر مساوي نانو پیمانه خړپړتیا رامینځته کړې.د سطحې خړپړتیا د نقاشۍ وخت سره بدلیږي (شکل S3).د وخت توپیر لرونکی وکر ښیي چې د سطحې خړپړتیا په دوامدار ډول وده کوي او په 15 دقیقو کې د اینچنګ په وخت کې خپل اوج ته رسیږي، او بیا د 30 دقیقو د اینچنګ په وخت کې د خړوبۍ ارزښت کې یو څه کمښت لیدل کیږي.په دې وخت کې، د نانو په سطحه خړپړتیا له مینځه وړل کیږي، پداسې حال کې چې د مایکرو سطحې خړپړتیا په چټکۍ سره وده کوي، د خړوبۍ بدلون نور ثبات رامنځته کوي.د 30 دقیقو څخه ډیر د اینچ کولو وروسته، په خړپړتیا کې نور زیاتوالی لیدل کیږي، کوم چې په تفصیل سره په لاندې ډول تشریح شوي: SS د فولادو څخه جوړ شوی، د اوسپنې، کرومیم، نکل، مولیبډینم او ډیری نورو عناصرو په شمول د عناصرو سره مصر شوی.د دې عناصرو په منځ کې، اوسپنه، کرومیم او مولیبډینم د HF ایچنګ په واسطه په SS باندې د مایکرون/نانو پیمانه د خرابوالي په جوړولو کې مهم رول لوبوي.د زنګ وهلو په لومړیو پړاوونو کې، اوسپنه او کرومیم په عمده توګه زنګ وهل کیږي ځکه چې مولیبډینم د مولبډینم په پرتله د زنګ مقاومت لوړ دی.لکه څنګه چې د اینچنګ پرمختګ کیږي، د اینچنګ محلول محلي اوور سیوریشن ته رسیږي، فلورایډونه او اکسایډونه جوړوي چې د ایچینګ له امله رامینځته کیږي.فلورایډ او اکسایډ باران کوي ​​او په نهایت کې په سطحه کې زیرمه کوي ، د مایکرون/نانو په حد کې د سطحې ناخوالې رامینځته کوي (31).دا د مایکرو/نانو په کچه د LOIS د ځان شفاهي ځانګړتیاوو کې مهم رول لوبوي.دوه اړخیزه سطحه یو همغږي اغیزه رامینځته کوي، د کیپیلري ځواک ډیروالی.دا پدیده غوړ ته اجازه ورکوي چې په ثابت ډول سطح ته ننوځي او د ځان درملنې ملکیتونو کې مرسته کوي (35).د خړپړتیا رامینځته کول د نقاشي وخت پورې اړه لري.د 10 دقیقو د نقاشۍ لاندې، سطح یوازې د نانو پیمانه خړپړتیا لري، کوم چې د بایو فولینګ مقاومت درلودو لپاره کافي غوړ ساتلو لپاره کافي ندي (36).له بلې خوا، که د نقاشۍ وخت له 30 دقیقو څخه زیات وي، د اوسپنې او کرومیم د بیا ځای پر ځای کیدو له امله رامینځته شوی نانو پیمانه خړپړتیا به ورک شي، او یوازې د مایکرو پیمانه خاموالی به د مولبډینم له امله پاتې شي.په زیاته پیمانه خړوب شوی سطح د نانو پیمانه خړپړتیا نلري او د دوه مرحلې خړپړتیا همغږي اغیزه له لاسه ورکوي، کوم چې د LOIS د ځان درملنې ځانګړتیاو باندې منفي اغیزه کوي.د SA اندازه کول په سبسټریټونو کې د مختلف اینچنګ وختونو سره ترسره شوي ترڅو د فولینګ ضد فعالیت ثابت کړي.د مایعاتو بیلابیل ډولونه د ویسکوسیت او سطحې انرژي پراساس غوره شوي ، پشمول د ډیونیز شوي (DI) اوبه ، وینه ، ایتیلین ګلایکول (EG) ، ایتانول (EtOH) او هیکساډیکین (HD) (شکل S4).د وخت په اوږدو کې د نقاشۍ بیلګه ښیي چې د مختلف مایعاتو لپاره چې مختلف سطحې انرژي او ویسکوسیټي لري، د LOIS SA د 15 دقیقو ایچ کولو وروسته ترټولو ټیټ دی.له همدې امله، LOIS د 15 دقیقو لپاره د مایکرون او نانو پیمانه خړپړتیا رامینځته کولو لپاره مطلوب دی ، کوم چې د غوړ د پایښت او غوره ضد ضد ملکیتونو په مؤثره توګه ساتلو لپاره مناسب دی.
(A) د LOIS د څلور مرحلې تولید پروسې سکیمیک ډیاګرام.انسیټ په سبسټریټ کې جوړ شوی SAM ښیې.(B) د SEM او AFM عکسونه، د مختلف اینچنګ وختونو لاندې د سبسټریټ مایکرو/نانو جوړښت غوره کولو لپاره کارول کیږي.د (C) Cr2p او (D) F1s د ایکس رې فوټو الیکټرون سپیکٹروسکوپي (XPS) د سطحې له پاسیدو او SAM کوټینګ وروسته.au، خپلمنځي واحد.(E) د اوبو د څاڅکو نمایندګي انځورونه په نخشه، نقاشي، SHP او LOIS سبسټریټ کې.(F) د تماس زاویه (CA) او SA اندازه کول د مایعاتو مختلف سطحي فشارونه په SHP او LOIS کې.معلومات د اوسط ± SD په توګه څرګند شوي.
بیا، د سطحې کیمیاوي ځانګړتیاو کې د بدلون تصدیق کولو لپاره، د ایکس رے فوټو الیکټرون سپیکٹروسکوپي (XPS) د هر سطحي پوښښ وروسته د سبسټریټ سطح کیمیاوي جوړښت کې د بدلون مطالعې لپاره کارول کیده.شکل 2C د HF ایچ شوي سطح او د HNO 3 درملنه شوي سطحه د XPS اندازه کولو پایلې ښیې.په 587.3 او 577.7 eV کې دوه اصلي څوکې د کرومیم آکسایډ پرت کې موجود Cr-O بانډ ته منسوب کیدی شي ، کوم چې د HF ایچ شوي سطح څخه اصلي توپیر دی.دا په عمده توګه د HNO3 لخوا په سطحه کې د اوسپنې او کرومیم فلورایډ مصرف له امله دی.د HNO3 پر بنسټ ایچنګ کرومیم ته اجازه ورکوي چې په سطحه د غیر فعال اکسایډ طبقه جوړه کړي، کوم چې د ایس ایس ایس ایس بیا د زنګ په وړاندې مقاومت کوي.په 2D شکل کې، د XPS سپیکٹرا ترلاسه شوي ترڅو تایید کړي چې د فلورو کاربن پر بنسټ سیلین د SAM کوټینګ وروسته په سطح کې رامینځته شوی، کوم چې حتی د EG، وینې او EtOH لپاره خورا لوړ مایع مخنیوی لري.د SAM کوټینګ د سیلین فعال ګروپونو سره د هایدروکسیل ګروپونو سره د پلازما درملنې لخوا رامینځته شوي عکس العمل سره بشپړ شوی.د پایلې په توګه، د CF2 او CF3 چوټیو کې د پام وړ زیاتوالی لیدل شوی.د 286 او 296 eV ترمنځ پابنده انرژي په ګوته کوي چې کیمیاوي تعدیل د SAM کوټینګ لخوا په بریالیتوب سره بشپړ شوی.SHP نسبتا لوی CF2 (290.1 ​​eV) او CF3 (293.3 eV) څوکې ښیي، کوم چې د فلورو کاربن پر بنسټ سیلین په سطح کې رامینځته شوي.شکل 2E د تماس زاویه (CA) اندازه کولو نمایشي نظری عکسونه ښیې چې د ډیونیز شوي اوبو مختلف ګروپونو لپاره چې د نرۍ ، خیټې ، SHP او LOIS سره په تماس کې دي.دا عکسونه ښیي چې د کیمیاوي نقاشي په واسطه د مایکرو/نانو جوړښت له امله د خاوري سطحه هایدروفیلیک کیږي ترڅو د ډیون شوي اوبه په جوړښت کې جذب شي.په هرصورت، کله چې سبسټریټ د SAM سره پوښل کیږي، سبسټریټ د اوبو قوي مخنیوی څرګندوي، نو د سطحې SHP رامینځته کیږي او د اوبو او سطحې ترمنځ د تماس ساحه کوچنۍ وي.په نهایت کې، په CA کې کمښت په LOIS کې لیدل شوی، کوم چې په مایکرو جوړښت کې د غوړ د ننوتلو سبب کیدی شي، په دې توګه د اړیکو ساحه زیاتوي.د دې لپاره چې ثابته کړي چې سطحه د مایع مخه نیولو عالي او غیر چپکونکي ملکیتونه لري، LOIS د مختلف مایعاتو (شکل 2F) په کارولو سره د CA او SA اندازه کولو سره د SHP سبسټریټ سره پرتله شوی.د مایع مختلف ډولونه د ویسکوسیت او سطحې انرژي پراساس غوره شوي ، پشمول د ډیونایډ شوي اوبه ، وینه ، EG ، EtOH او HD (شکل S4).د CA اندازه کولو پایلې ښیي چې کله CA HD ته متوجه کیږي، د CA کمښت ارزښت، چیرته چې CA د سطحې ټیټه انرژي لري.برسېره پردې، د ټولیز CA LOIS ټیټ دی.په هرصورت، د SA اندازه کول یو بشپړ مختلف پدیده ښیي.د ionized اوبو پرته، ټول مایعات د SHP سبسټریټ سره تړل کیږي پرته له دې چې ټوټه شي.له بلې خوا، LOIS یو ډیر ټیټ SA ښیي، چیرته چې ټول مایع د 10° څخه تر 15° پورې په زاویه کې خړوب شي، ټول مایع به ودریږي.دا په کلکه ښیي چې د LOIS غیر چپکوالی د SHP سطحې څخه غوره دی.برسېره پردې، د LOIS کوټینګونه په مختلفو ډولونو کې هم پلي کیږي، پشمول د ټایټانیوم (Ti)، پولیفینیل سلفون (PPSU)، پولی آکسیمیتیلین (POM)، پولیتر ایتر کیټون (PEEK) او د بایو جذب وړ پولیمر (PLGA) په شمول، دا د امپلانټ وړ اورتوپیډیک مواد دي (شکل) S5)).د LOIS لخوا درملنه شوي موادو باندې د څاڅکو ترتیب شوي عکسونه ښیې چې د LOIS د بایو فولینګ ضد ملکیتونه په ټولو فرعي برخو کې یو شان دي.سربیره پردې، د CA او SA اندازه کولو پایلې ښیې چې د LOIS غیر چپکونکي ملکیتونه په نورو موادو کې پلي کیدی شي.
د LOIS د فضول ضد ځانګړتیاوو د تایید لپاره، د فرعي ډولونو مختلف ډولونه (بشمول بېئر، ایچډ، SHP او LOIS) د Pseudomonas aeruginosa او MRSA سره مینځل شوي.دا دوه باکتریا د نمایندګي روغتون باکتریا په توګه غوره شوي، کوم چې کولی شي د بایوفیلمونو رامینځته کولو المل شي، د SSI (37) المل کیږي.شکل 3 (A او B) د فلوروسینس مایکروسکوپ عکسونه او د کالوني جوړونې واحد (CFU) اندازه کولو پایلې ښیې چې په ترتیب سره د لنډ مهاله (12 ساعتونو) او اوږدې مودې (72 ساعتونو) لپاره د بکتیریا تعلیق کې مینځل شوي سبسټریټونه.په لنډ وخت کې، باکتریا به کلسترونه جوړ کړي او په اندازې کې وده وکړي، ځان د بلغم په څیر موادو سره پوښي او د دوی د لیرې کولو مخه نیسي.په هرصورت، د 72-ساعت انکیوبیشن په جریان کې، باکتریا به پاخه شي او د نورو کالونیو یا کلسترونو د جوړولو لپاره د خپریدو لپاره اسانه شي.نو ځکه، دا په پام کې نیول کیدی شي چې 72-ساعت انکیوبیشن اوږدمهاله وي او په سطح کې د قوي بایوفیلم جوړولو لپاره مناسب انکیوبیشن وخت دی (38).په لنډه موده کې، د خښتې سطحه او د SHP سطحه د باکتریایي چپکولو ښکارندوی کوي، کوم چې د 25٪ څخه تر 50٪ پورې کم شوی د وړو سبسټریټ په پرتله.په هرصورت، د دې د بایو فولینګ ضد غوره فعالیت او ثبات له امله، LOIS په لنډ او اوږدې مودې کې د باکتریایي بایوفیلم اډیشن نه ښودلی.د سکیماټیک ډیاګرام (شکل 3C) د اینچنګ محلول ، SHP او LOIS د بیولوژیکي فاولنګ ضد میکانیزم توضیحات بیانوي.انګیرنه دا ده چې د هایدروفیلیک ملکیتونو سره ایچ شوی سبسټریټ به د خلاص سبسټریټ په پرتله لوی سطحي ساحه ولري.له همدې امله، د باکتریایي چپکولو به د خاشې سبسټریټ کې واقع شي.په هرصورت، د وړو سبسټریټ په پرتله، د ایچ شوي سبسټریټ په سطح کې د پام وړ کم بایوفیلم جوړ شوی.دا ځکه چې د اوبو مالیکولونه په کلکه د هایدروفیلیک سطح سره تړلي دي او د اوبو لپاره د غوړ په توګه عمل کوي، په دې توګه په لنډه موده کې د باکتریا په چپکولو کې مداخله کوي (39).په هرصورت، د اوبو د مالیکولونو طبقه د باکتریا په تعلیق کې خورا پتلی او محلول کیږي.له همدې امله، د اوبو مالیکولر پرت د اوږدې مودې لپاره ورک کیږي، چې د پراخ باکتریایي چپکولو او خپریدو لامل کیږي.د SHP لپاره، د دې د لنډ مهاله غیر لندبل ملکیتونو له امله، د باکتریایي چپکولو مخنیوی کیږي.د باکتریا کمیدل د هوا جیبونو ته منسوب کیدی شي چې په پرت شوي جوړښت کې بند شوي او د سطحې ټیټ انرژي ، پدې توګه د باکتریا تعلیق او سطح ترمینځ اړیکه کموي.په هرصورت، په SHP کې د باکتریا پراخه چپه کول لیدل شوي ځکه چې دا د اوږدې مودې لپاره د فاول ضد ځانګړتیاوې له لاسه ورکړې.دا په عمده توګه د هایدروستیټیک فشار او په اوبو کې د هوا تحلیل له امله د هوا جیبونو د ورکیدو له امله دی.دا په عمده توګه د تحلیل له امله د هوا جیبونو د ورکیدو او د سطحي جوړښت له امله دی چې د چپکولو لپاره د سطحې پراخه ساحه چمتو کوي (27, 40).د دې دوه فرعي موادو برخلاف چې په اوږدمهاله ثبات کې مهم اغیزه لري، په LOIS کې موجود غوړ لرونکی غوړ په مایکرو/نانو جوړښت کې داخلیږي او حتی په اوږدې مودې کې به ورک نشي.د مایکرو/نانو جوړښتونو څخه ډک شوي غوړ خورا مستحکم دي او د لوړ کیمیاوي تړاو له امله سطح ته په کلکه جذب کیږي، په دې توګه د اوږدې مودې لپاره د باکتریایي چپکولو مخه نیسي.شکل S6 د فاسفیت بفر شوي مالګین (PBS) کې ډوب شوي غوړ انفیوز شوي سبسټریټ د انعکاس کنفوکال مایکروسکوپ عکس ښیې.پرله پسې انځورونه ښیې چې حتی د 120 ساعتونو لږ ټکان (120 rpm) وروسته، په LOIS کې د غوړ پرت بدله پاتې کیږي، چې د جریان شرایطو لاندې اوږدمهاله ثبات په ګوته کوي.دا د فلورین پر بنسټ د SAM کوټینګ او پرفلووروکاربن پر بنسټ غوړ تر مینځ د لوړ کیمیاوي تړاو له امله دی، ترڅو یو مستحکم غوړ پرت جوړ شي.له همدې امله، د فاول ضد فعالیت ساتل کیږي.برسېره پردې، سبسټریټ د نمایندګیو پروټینونو (البومین او فایبرینوجن) په وړاندې ازمول شوی، کوم چې په پلازما کې دي، حجرې د معافیت فعالیت سره نږدې تړاو لري (میکروفیجز او فایبروبلاستونه)، او هغه چې د هډوکي جوړښت سره تړاو لري.د کلسیم مواد خورا لوړ دي.(شکل 3D، 1 او 2، او شکل S7) (41، 42).برسېره پردې، د فایبرینوجن، البومین او کلسیم لپاره د اډیشن ازموینې د فلوروسینس مایکروسکوپ عکسونو د هر سبسټریټ ګروپ مختلف چپکونکي ځانګړتیاوې ښودلې (شکل S8).د هډوکو د جوړیدو په جریان کې، نوي جوړ شوي هډوکي او د کلسیم پرتونه کیدای شي د اورتوپیډیک امپلانټ شاوخوا محاصره کړي، کوم چې نه یوازې د لیرې کول ستونزمن کوي، بلکې د لرې کولو پروسې په جریان کې ناروغ ته ناڅاپي زیان هم رسولی شي.له همدې امله، د هډوکي په تختو او پیچونو کې د کلسیم زیرمې ټیټه کچه د ارتوپیډیک جراحي لپاره ګټور دي چې د امپلانټ لرې کولو ته اړتیا لري.د فلوروسینس شدت او د حجرو شمیرې پراساس د ضمیمې ساحې مقدار کولو پراساس، موږ تایید کړه چې LOIS د نورو فرعي موادو په پرتله د ټولو بیولوژیکي موادو لپاره د بایو فولینګ ضد غوره ځانګړتیاوې ښیې.د ویټرو تجربو د پایلو له مخې، د انټي بیولوژیکي فولینګ LOIS د اورتوپیډیک امپلانټونو لپاره کارول کیدی شي، کوم چې نه یوازې د بایوفیلم باکتریا لخوا رامینځته شوي انتاناتو مخه نیسي، بلکې د بدن د فعال معافیت سیسټم لخوا رامینځته شوي سوزش هم کموي.
(الف) د فلوروسینس مایکروسکوپ عکسونه د هرې ډلې (ننګري، نقاشي، SHP او LOIS) په Pseudomonas aeruginosa او MRSA تعلیق کې د 12 او 72 ساعتونو لپاره انکیوب شوي.(B) د هر ګروپ په سطحه د Pseudomonas aeruginosa او MRSA د پیرودونکو CFU شمیر.(C) د لنډ مهاله او اوږدمهاله نقاشۍ، SHP او LOIS د ضد بیولوژیکي فاولنګ میکانیزم سکیمیک ډیاګرام.(D) (1) د فیبروبلاسټونو شمیر چې د هر فرعي سبسټریټ او فلوروسینس مایکروسکوپ عکسونو سره تړل شوي حجرې د بار او LOIS سره تړلي دي.(2) د معافیت پورې اړوند پروټینونو، البومین او کلسیم د اډیشن ټیسټ چې د هډوکي د شفاهي پروسې کې ښکیل دي (* P <0.05، ** P <0.01، *** P <0.001 او **** P <0.0001).ns، مهمه نه ده.
د نه منلو وړ متمرکز فشارونو په صورت کې، میخانیکي پایښت تل د انټي فولینګ کوټینګ پلي کولو لپاره اصلي ننګونه وه.د فاضله موادو ضد جیل دودیز میتودونه د پولیمرونو پراساس دي چې د اوبو کم محلول او نازکتیا لري.له همدې امله، دوی معمولا د بایو میډیکل غوښتنلیکونو کې میخانیکي فشار ته حساس دي.له همدې امله، د میخانیکي پلوه دوامدار انټي فولینګ کوټینګ د غوښتنلیکونو لکه آرتوپیډیک امپلانټونو لپاره ننګونه پاتې ده (43, 44).شکل 4A(1) د فشار دوه اصلي ډولونه ښیې چې په ارتوپیډیک امپلانټونو باندې پلي کیږي ، پشمول د سکریچ کولو (شیر فشار) او فشار سره د خراب شوي امپلانټ نظری عکس سره چې د قوتونو لخوا تولید شوي.د مثال په توګه، کله چې سکرو د سکرو ډرایور سره ټینګ شي، یا کله چې جراح د هډوکي پلیټ په ټیزر سره ټینګ ونیسي او فشاري ځواک پلي کړي، د پلاستيک هډوکي پلیټ به په میکرو او مایکرو/نانو ترازو کې زیانمن شي او سکریچ شي (شکل 4A، 2).د دې لپاره چې دا ازموینه وکړي چې ایا تولید شوي LOIS کولی شي د پلاستيکي جراحۍ په جریان کې د دې زیانونو سره مقاومت وکړي، نانو انډینټینشن ترسره شوی ترڅو د کوچني سبسټریټ سختۍ او LOIS په مایکرو/نانو پیمانه پرتله کړي ترڅو د مایکرو/نانو جوړښت میخانیکي ځانګړتیاوې مطالعه کړي (انځور) 4B).د سکیماټیک ډیاګرام د مایکرو/نانو جوړښتونو شتون له امله د LOIS مختلف اختراع چلند ښیې.د نانو انډینټینشن پایلو (شکل 4C) پراساس د ځواک بې ځایه کیدو وکر جوړ شو.نیلي انځور د پټو سبسټریټ نمایندګي کوي، کوم چې یوازې یو څه نیمګړتیا ښیي، لکه څنګه چې د 0.26-μm اعظمي ژوروالی لخوا لیدل کیږي.له بلې خوا، په LOIS (سرخ وکر) کې د نانو انډینټیشن ځواک تدریجي زیاتوالی او بې ځایه کیدل ممکن د کم میخانیکي ملکیتونو نښې وښیې چې په پایله کې د 1.61μm د نانو انډینټیشن ژوروالی رامینځته کیږي.دا ځکه چې په LOIS کې موجود مایکرو/نانو جوړښت د نانو انډینټر د غاړې لپاره د ژور پرمختګ ځای چمتو کوي، نو د دې خرابوالی د وړو سبسټریټ څخه ډیر دی.Konsta-Gdoutos et al.(45) په دې باور دي چې د نانو جوړښتونو شتون له امله، نانو انډینټینشن او مایکرو/نانو خرابوالی د غیر منظم نانو انډینټیشن منحني لامل کیږي.سیوري شوي ساحه د ناقانونه کثافاتو منحني سره مطابقت لري چې نانوسټرکچر ته منسوب کیږي پداسې حال کې چې غیر سیوري ساحه مایکرو جوړښت ته منسوب کیږي.دا تخریب ممکن د لرونکی غوړ مایکرو جوړښت / نانو جوړښت ته زیان ورسوي او په منفي ډول یې د فولینګ ضد فعالیت اغیزه وکړي.په LOIS باندې د زیان اغیزې مطالعې لپاره، مایکرو / نانو جوړښتونو ته ناگزیر زیان د پلاستيکي جراحۍ په جریان کې په بدن کې تکرار شوی.د وینې او پروټین د چپکولو ازموینو په کارولو سره، د ویټرو وروسته د LOIS د بایو فولینګ ضد ملکیتونو ثبات ټاکل کیدی شي (شکل 4D).د نظری عکسونو لړۍ هغه زیان ښیې چې د هر سبسټریټ سوري ته نږدې پیښ شوي.د وینې د چپکولو ازموینه ترسره شوه ترڅو د بایو فولینګ ضد کوټینګ باندې د میخانیکي زیان اغیزې وښیې (شکل 4E).د SHP په څیر، د فاولنګ ضد ځانګړتیاوې د زیانونو له امله له لاسه ورکوي، او LOIS د وینې په بیرته راګرځولو سره د فاولنګ ضد غوره ځانګړتیاوې څرګندوي.دا ځکه چې د سطحې انرژي د کیپیلري عمل لخوا پرمخ وړل کیږي چې زیانمن شوې ساحه پوښي، د مایکروسټرکچر غوړ لبریکینټ کې جریان د فاول ضد ملکیتونه بحالوي (35).ورته رجحان د البومین په کارولو سره د پروټین اډیشن ټیسټ کې لیدل شوی.په تخریب شوي ساحه کې، د SHP په سطحه د پروټین چپه کول په پراخه کچه لیدل کیږي، او د ساحې پوښښ په اندازه کولو سره، دا د خالي سبسټریټ د چپکولو کچې نیمایي په توګه اندازه کیدی شي.له بلې خوا، LOIS خپل د بایو فولینګ ضد ملکیتونه پرته له دې چې د چپکولو لامل شي ساتلی (شکل 4، F او G).برسېره پردې، د سکرو سطح اکثرا د قوي میخانیکي فشار سره مخ کیږي، لکه برمه کول، نو موږ د LOIS کوټینګ وړتیا مطالعه کړه ترڅو په ویټرو کې سکرو کې پاتې شي.شکل 4H د مختلف پیچونو نظری عکسونه ښیې، پشمول د بر، SHP او LOIS.سور مستطیل د هدف ساحه څرګندوي چیرې چې قوي میخانیکي فشار د هډوکي امپلانټیشن پرمهال پیښیږي.د پلیټ د پروټین چپکولو ازموینې ته ورته، د فلوروسینس مایکروسکوپ د پروټین اډیشن انځور کولو او د پوښښ ساحه اندازه کولو لپاره کارول کیږي ترڅو د LOIS کوټینګ بشپړتیا ثابت کړي، حتی د قوي میخانیکي فشار لاندې (شکل 4، I او J).د LOIS درملنه شوي پیچونه د فاولنګ ضد عالي فعالیت ښیې، او تقریبا هیڅ پروټین سطح ته غاړه نه ږدي.له بلې خوا، د پروټین چپه کول په وړو پیچونو او SHP پیچونو کې لیدل شوي، چیرته چې د SHP پیچونو ساحه پوښښ د وړو پیچونو دریمه برخه وه.برسېره پردې، د ارتوپیډیک امپلانټ د فکسیشن لپاره کارول کیږي باید په میخانیکي توګه قوي وي ترڅو د فریکچر سایټ باندې پلي شوي فشار سره مقاومت وکړي، لکه څنګه چې په 4K شکل کې ښودل شوي.له همدې امله ، په میخانیکي ملکیتونو کې د کیمیاوي تعدیل اغیزې ټاکلو لپاره د ځړولو ازموینه ترسره شوه.سربیره پردې، دا د امپلانټ څخه ثابت فشار ساتلو لپاره ترسره کیږي.عمودی میخانیکي ځواک تطبیق کړئ تر هغه چې امپلانټ په بشپړ ډول پوښ شوی نه وي او د فشار فشار وکر ترلاسه شوی وي (شکل 4L، 1).دوه ملکیتونه پشمول د ځوان ماډلس او انعطاف وړ ځواک د میخانیکي ځواک د شاخصونو په توګه د خلاص او LOIS سبسټریټونو ترمینځ پرتله شوي (شکل 4L, 2 او 3).د ځوان ماډل د میخانیکي بدلونونو سره د مقاومت لپاره د موادو وړتیا په ګوته کوي.د هر سبسټریټ ځوان ماډل په ترتیب سره 41.48±1.01 او 40.06±0.96 GPa دی؛لیدل شوي توپیر شاوخوا 3.4٪ دی.برسېره پردې، راپور ورکړل شوی چې د خړوبولو ځواک، کوم چې د موادو سختۍ ټاکي، د 102.34 ± 1.51 GPa د خالي سبسټریټ لپاره او 96.99 ± 0.86 GPa د SHP لپاره.د پټو سبسټریټ تقریبا 5.3٪ لوړ دی.په میخانیکي ملکیتونو کې لږ کمښت ممکن د نوچ اغیزې له امله رامینځته شي.د نوچ په اثر کې، مایکرو/نانو خاموالی ممکن د نوچونو سیټ په توګه عمل وکړي، چې د محلي فشار غلظت لامل کیږي او د امپلانټ میخانیکي ملکیتونه اغیزمن کوي ​​(46).په هرصورت، د دې حقیقت پراساس چې د انسان د کورټیکل هډوکي سختوالی د 7.4 او 31.6 GPa ترمنځ راپور شوی، او د اندازه شوي LOIS ماډل د انسان کورټیکل هډوکي (47) څخه ډیر دی، LOIS د فریکچر او د هغې ټولیز مالتړ لپاره کافي دی. میخانیکي ملکیتونه لږترلږه د سطحې ترمیم لخوا اغیزمن کیږي.
(A) د (1) د میخانیکي فشار سکیمیک ډیاګرام چې د عملیاتو په جریان کې د ارتوپیډیک امپلانټ باندې پلي شوی ، او (2) د خراب شوي اورتوپیډیک امپلانټ نظری عکس.(ب) د نانو میخانیکي ملکیتونو سکیمیک ډیاګرام د نانو انډینټیشن او LOIS لخوا په خالي سطحه اندازه کیږي.(C) د نانو انډینټیشن ځواک - د بې ځایه کیدو منحنی منحنی سطح او LOIS.(D) د ویټرو تجربو وروسته، د مختلف ډوله آرتوپیډیک پلیټونو نظری عکسونه سمول کړئ (ویجاړ شوې ساحه د سور مستطیل سره روښانه شوې) ترڅو د عملیاتو پرمهال رامینځته شوي میخانیکي فشار انډول کړي.(E) د وينې د چپکولو ټیسټ او (F) د خراب شوي اورتوپیډیک پلیټ ګروپ پروټین اډیشن ټیسټ.(G) د پروټین د ساحې پوښښ اندازه کړئ چې د پلیټ سره تړل کیږي.(H) د ویټرو تجربې وروسته د مختلف ډوله ارتوپیډیک پیچونو نظری عکسونه.(I) د مختلف کوټینګونو بشپړتیا مطالعه کولو لپاره د پروټین چپکولو ازموینه.(J) د پروتین د ساحې پوښښ اندازه کړئ چې سکرو ته تړل کیږي.(K) د خرگوش حرکت د دې لپاره دی چې په مات شوي هډوکي کې یو ثابت فشار رامینځته کړي.(L) (1) د کنډک ازموینې پایلې او آپټیکل عکسونه مخکې او وروسته له کندې.توپیر په (2) د ځوان موډولس او (3) د بېئر امپلانټ او SHP تر مینځ د ځړولو ځواک.ډاټا د ± SD (*P <0.05، **P <0.01، ***P <0.001 او ****P <0.0001) په توګه ښودل شوي.د انځور له خوا: کیومین چای، یونسي پوهنتون.
په کلینیکي حالتونو کې، د بیولوژیکي موادو او زخم ځایونو سره ډیری باکتریا اړیکه د بالغ، بالغ بایوفیلمونو څخه راځي (48).له همدې امله، د ناروغیو کنټرول او مخنیوي لپاره د متحده ایالاتو مرکزونه اټکل کوي چې د ټولو انساني انتاناتو 65٪ د بایوفیلم پورې اړه لري (49).په دې حالت کې، دا اړینه ده چې د ویوو تجربوي ډیزاین چمتو کړئ چې د امپلانټ په سطحه د بایوفیلم جوړښت برابروي.له همدې امله، موږ د خرگوش د فیمورل فریکچر ماډل رامینځته کړ چې په کې د اورتوپیډیک امپلانټونه د باکتریایی تعلیق کې مخکې له مینځه وړل شوي او بیا د خرگوش په فیمرونو کې نصب شوي ترڅو په vivo کې د LOIS ضد ضد ملکیتونه مطالعه کړي.د لاندې دریو مهمو حقایقو له امله، باکتریایي انتانات د باکتریایي تعلیقونو مستقیم انجکشن پرځای د پخوانۍ کلتور لخوا هڅول کیږي: (i) د خرگوش معافیت سیسټم په طبیعي توګه د انسانانو په پرتله پیاوړی دی؛له همدې امله، د باکتریایي تعلیق او پلانکټونیک باکتریا انجیکشن ممکن د بایوفیلمونو په جوړولو هیڅ اغیزه ونلري.(Ii) پلانکټونیک باکتریا د انټي بیوټیکونو لپاره ډیر حساس دي، او انټي بیوټیکونه معمولا د جراحي وروسته کارول کیږي.په نهایت کې، (iii) د پلانکټونیک باکتریا تعلیق ممکن د څارویو د بدن د مایعاتو پواسطه ضعیف شي (50).د امپلانټ څخه دمخه په باکتریایی تعلیق کې د امپلانټ دمخه کلتور کولو سره ، موږ کولی شو د هډوکي درملنې پروسې باندې د باکتریایی انفیکشن او د بهرني بدن عکس العمل (FBR) زیان رسونکي اغیزې په بشپړ ډول مطالعه کړو.خرگوش د امپلانټیشن څخه 4 اونۍ وروسته قرباني شوي، ځکه چې د هډوکي د شفاهي پروسې لپاره اړین osseointegration به په 4 اونیو کې بشپړ شي.بیا، امپلانټونه د لاندې مطالعاتو لپاره د خرگوش څخه لیرې شوي.شکل 5A د باکتریا د خپریدو میکانیزم ښیې.اخته شوي ارتوپيډیک امپلانټ بدن ته معرفي کیږي.د باکتریایی تعلیق کې د پری انکیوبیشن په پایله کې، له شپږو خرگوشونو څخه شپږ یې د ناپاکو امپلانټونو سره ایښودل شوي په ناروغۍ اخته شوي، پداسې حال کې چې د LOIS درملنه شوي امپلانټونو سره نصب شوي خرگوشونو څخه هیڅ یو په ناروغۍ اخته نه و.باکتریایي انتانات په دریو مرحلو کې پرمخ ځي، پشمول وده، پختتیا او خپریدل (51).لومړی، تړل شوي باکتریا په سطحه بیا تولیدوي او وده کوي، او بیا باکتریا بایوفیلم جوړوي کله چې دوی د خارجي سیلولر پولیمر (EPS)، امیلایډ او د خارجي حجرو DNA خارجوي.بایوفیلم نه یوازې د انټي بیوټیکونو ننوتلو کې مداخله کوي ، بلکه د انټي بیوټیک تخریب کونکي انزایمونو راټولولو ته هم وده ورکوي (لکه β-lactamase) (52).په نهایت کې ، بایوفیلم بالغ باکتریا شاوخوا نسجونو ته خپروي.له همدې امله، انفیکشن واقع کیږي.سربیره پردې، کله چې یو بهرنی بدن بدن ته ننوځي، یو انفیکشن چې د قوي معافیت غبرګون رامینځته کولی شي د شدید سوزش، درد، او د معافیت کمښت لامل شي.شکل 5B د FBR یوه عمومي کتنه وړاندې کوي چې د ارتوپیډیک امپلانټ داخلولو له امله رامینځته کیږي ، نه د باکتریا انفیکشن له امله رامینځته شوي معافیت غبرګون.د معافیت سیسټم داخل شوی امپلانټ د بهرني بدن په توګه پیژني، او بیا د حجرو او نسجونو المل ګرځي ترڅو د بهرني بدن د پوښښ لپاره غبرګون وښيي (53).د FBR په لومړیو ورځو کې، د اورتوپیډیک امپلانټونو په سطحه د اکمالاتو میټرکس جوړ شوی و، چې د فایبرینوجن جذب پایله وه.جذب شوي فایبرینوجن بیا د فایبرین خورا پراخه شبکه جوړوي، کوم چې د لیوکوسایټونو ضمیمه هڅوي (54).کله چې د فایبرین شبکه جوړه شي، حاد التهاب به د نیوټروفیلونو د نفوذ له امله واقع شي.په دې مرحله کې، یو ډول سایټوکینونه لکه د تومور نیکروسس فکتور-α (TNF-α)، انټرلیوکین-4 (IL-4) او IL-β خوشې کیږي، او مونوسایټ د امپلانټیشن سایټ ته ننوتل پیل کوي او په لویو حجرو کې توپیر کوي.پښه (۴۱، ۵۵، ۵۶).د FBR کمول تل یوه ننګونه وه ځکه چې ډیر FBR کولی شي د حاد او مزمنې سوزش لامل شي ، کوم چې د وژونکي پیچلتیا لامل کیدی شي.د بیئر امپلانټ او LOIS شاوخوا نسجونو کې د باکتریایي انتاناتو اغیزې ارزولو لپاره، هیماتوکسیلین او ایوسین (H&E) او میسن ټریکروم (MT) داغونه کارول شوي.د هغو خرگوشونو لپاره چې د وړو فرعي موادو سره ایښودل شوي، شدید باکتریایي انتانات پرمختګ کړی، او د H&E نسج سلایډونه په ښکاره ډول د التهاب له امله رامینځته شوي التهابونه او نیکروسس ښیې.له بلې خوا، د بایو فولینګ ضد خورا پیاوړې سطحه LOIS د باکتریا د چپکولو مخه نیسي، نو دا د انفیکشن نښې نه ښیې او سوزش کموي (شکل 5C).د MT سټینګ پایلې ورته رجحان ښودلی.په هرصورت، د MT داغونه د LOIS سره ایښودل شوي خرگوش کې اذیما هم ښودلې، دا په ګوته کوي چې بیا رغونه په نږدې کې ده (5D شکل).د معافیت غبرګون د درجې مطالعې لپاره، د معافیت غبرګون پورې اړوند د سایټوکین TNF-α او IL-6 په کارولو سره د امیونوهیسټو کیمیکل (IHC) داغونه ترسره شوي.یو بربنډ منفي امپلانټ چې د باکتریا سره مخ نه و د LOIS سره پرتله شوی و چې د باکتریا سره مخ شوی و مګر د باکتریا انفیکشن په نشتوالي کې د شفاهي پروسې مطالعې لپاره اخته شوی و.شکل 5E د IHC سلایډ یو نظری عکس ښیې چې TNF-α څرګندوي.نسواري ساحه د معافیت غبرګون څرګندوي، دا په ګوته کوي چې په LOIS کې د معافیت غبرګون یو څه کم شوی.برسېره پر دې، په LOIS کې د IL-6 څرګندونه د sterile naked (شکل 5F) د منفي بیان په پرتله د پام وړ کمه وه.د سایټوکین څرګندونه د انټي باډي داغونو ساحې اندازه کولو سره اندازه شوې چې د سایټوکین (شکل 5G) سره مطابقت لري.د هغو خرگوشونو په پرتله چې د منفي امپلانټونو سره مخ شوي، د LOIS سره ایښودل شوي خرگوش د بیان کچه ټیټه وه، یو معنی توپیر ښیې.د سایټوکین کمښت په ګوته کوي چې د LOIS اوږدمهاله، مستحکم ضد ضد ځانګړتیاوې نه یوازې د باکتریایي انتاناتو مخنیوی پورې تړاو لري، بلکې د FBR کمښت سره هم تړاو لري، کوم چې د سبسټریټ سره د میکروفیجونو لخوا هڅول کیږي (53, ۵۷، ۵۸).نو ځکه، د LOIS د معافیت د تخریب ملکیتونو له امله د معافیت کم شوی غبرګون ممکن د امپلانټیشن وروسته ضمني اغیزې حل کړي، لکه د پلاستيکي جراحۍ وروسته د معافیت ډیر غبرګون.
(A) د بایوفیلم جوړیدو میکانیزم سکیمیک ډیاګرام او د اخته شوي ارتوپیډیک امپلانټ په سطحه خپریږي.eDNA، د بهر حجرو DNA.(ب) د ارتوپیډیک امپلانټ داخلولو وروسته د معافیت غبرګون سکیماتیک ډیاګرام.(C) د H&E داغونه او (D) د ارتوپیډیک امپلانټونو شاوخوا نسجونو MT داغونه د مثبت او LOIS سره.د معافیت پورې اړوند سایټوکینونو IHC (E) TNF-α او (F) IL-6 د ناپاکو - منفي او LOIS - امپلان شوي خرگوش داغ شوي عکسونه دي.(G) د ساحې پوښښ اندازه کولو په واسطه د سایټوکین بیان اندازه کول (** P <0.01).
د LOIS بایو مطابقت او د هډوکو د شفا ورکولو پروسې باندې د هغې اغیز په ویوو کې د تشخیصي امیجنګ [x-ray او مایکرو کمپیوټري توموګرافي (CT)] او osteoclast IHC په کارولو سره معاینه شو.شکل 6A د هډوکو د درملنې پروسه ښیي چې درې مختلف پړاوونه پکې شامل دي: سوزش، ترمیم، او بیا جوړونه.کله چې تخریب رامنځ ته شي، التهابي حجرې او فایبروبلاستونه به مات شوي هډوکي ته ننوځي او د عصبي نسج وده پیل کړي.د ترمیم مرحلې په جریان کې، د ویسکولر نسج وده د فریکچر سایټ ته نږدې خپریږي.عصبي نسج د نوي هډوکي د جوړولو لپاره غذايي مواد چمتو کوي، چې د کالوس په نوم یادېږي.د هډوکو د شفاهي پروسې وروستنۍ مرحله د بیا جوړونې مرحله ده، په کوم کې چې د کالس اندازه د عادي هډوکي اندازې ته راټیټه کیږي د فعال اوستیوکلاسټ (59) د کچې د زیاتوالي په مرسته.د فریکچر سایټ درې اړخیزه (3D) بیا رغونه د مایکرو CT سکینونو په کارولو سره ترسره شوې ترڅو په هر ګروپ کې د کالس جوړښت په کچه کې توپیرونه وګوري.د فیمر کراس برخه وګورئ ترڅو د مات شوي هډوکي شاوخوا د کالس ضخامت مشاهده کړي (شکل 6, B او C).د ایکس رې په هره اونۍ کې د ټولو ګروپونو د فریکچر سایټونو معاینه کولو لپاره هم کارول کیده ترڅو په هر ګروپ کې د هډوکي بیا جوړونې مختلف پروسې مشاهده کړي (شکل S9).Callus او بالغ هډوکي په ترتیب سره په نیلي / شنه او د عاج په رنګ کې ښودل شوي.ډیری نرم نسجونه د مخکې ټاکل شوي حد سره فلټر شوي.نیوډ مثبت او SHP د فریکچر سایټ په شاوخوا کې د لږ مقدار کالس رامینځته کیدل تایید کړل.له بلې خوا، د LOIS افشا شوي منفي او د فریکچر سایټ د موټ کالس لخوا محاصره شوي.د مایکرو CT عکسونو ښودلې چې د کالس رامینځته کول د باکتریا انفیکشن او انفیکشن پورې اړوند سوزش له امله خنډ شوی.دا ځکه چې د معافیت سیسټم د سیپټیک ټپونو درملنې ته لومړیتوب ورکوي چې د هډوکي رغیدو پرځای د انفیکشن پورې اړوند سوزش له امله رامینځته کیږي (60).IHC او Tartrate-resistant Acid Phosphatase (TRAP) داغونه د اوستیوکلاسټ فعالیت او د هډوکو بیا جذبولو لپاره ترسره شوي (شکل 6D) (61).یوازې یو څو فعال اوستیوکلاسټونه چې داغ شوي ارغواني رنګ لري په عصبي مثبتو او SHP کې وموندل شول.له بلې خوا، ډیری فعال اوستیوکلاسټونه د LOIS د لوڅو مثبتو او بالغو هډوکو سره نږدې لیدل شوي.دا پدیده ښیي چې د اوستیوکلاسټ په شتون کې، د فریکچر سایټ شاوخوا کالس د بیا جوړونې له تاوتریخوالي څخه تیریږي (62).د هډوکي حجم او د کالوس د اوستیوکلاسټ څرګندولو ساحه په ټولو ګروپونو کې د فریکچر سایټ په شاوخوا کې د کالس جوړښت کچه ​​پرتله کولو لپاره اندازه شوې، ترڅو د مایکرو CT سکین او IHC پایلې اندازه کړي (شکل 6E، 1 او 2).لکه څنګه چې تمه کیده، په LOIS کې ناپاک منفي او د کالس جوړښت د نورو ګروپونو په پرتله د پام وړ لوړ و، دا په ګوته کوي چې د هډوکي بیا جوړونه مثبته واقع شوې (63).شکل S10 د جراحی سایټ نظری عکس ښیې، د سکرو سره نږدې راټول شوي نسجونو د MT داغونو پایله، او د TRAP سټینینګ پایله د سکرو هډوکي انٹرفیس روښانه کوي.په خالي سبسټریټ کې، قوي کالوس او فایبروسس رامینځته کیدل لیدل شوي، پداسې حال کې چې د LOIS درملنه شوي امپلانټ نسبتا ناڅاپه سطحه ښودلې.په ورته ډول، د ناپاک منفي په پرتله، ټیټ فایبرروسس په LOIS سره نصب شوي خرگوش کې لیدل شوي، لکه څنګه چې د سپینو تیرونو لخوا اشاره شوې.برسېره پر دې، د قوي اذیما (نیلي تیر) د LOIS د معافیت تخریب ملکیتونو ته منسوب کیدی شي، په دې توګه د شدید سوزش کمول.د امپلانټ شاوخوا نان اسټیک سطح او کم شوي فایبرروسس وړاندیز کوي چې د لرې کولو پروسه اسانه ده ، کوم چې معمولا د نورو تخریب یا سوزش لامل کیږي.د هډوکي د درملنې پروسه د سکرو لرې کولو وروسته د سکرو هډوکي انٹرفیس کې د اوستیوکلاسټ فعالیت لخوا ارزول شوې.د نري هډوکي او د LOIS امپلانټ انٹرفیس دواړه د هډوکي نور شفا ورکولو لپاره د osteoclasts ورته کچه جذبوي، دا په ګوته کوي چې د LOIS پوښښ د هډوکي په شفاهي یا معافیت غبرګون منفي اغیزه نلري.د دې لپاره چې تایید شي چې په LOIS کې ترسره شوي سطحي ترمیم د هډوکو د شفاهي پروسې سره مداخله نه کوي، د ایکس رے معاینه د افشا شوي منفي آئنونو او د LOIS امپلانټیشن 6 اونۍ (شکل 6F) سره د خرگوش د هډوکي درملنه پرتله کولو لپاره کارول شوې.پایلو وښودله چې د غیر انتفاعي عصبي مثبت ګروپ په پرتله، LOIS د هډوکي د درملنې ورته درجې ښودلې، او په دواړو ګروپونو کې د فریکچر (دوامداره osteolysis کرښه) هیڅ ښکاره نښې شتون نلري.
(الف) د هډوکي د شفاهي پروسې سکیماتیک ډیاګرام د ماتیدو وروسته.(B) د هرې سطحې ګروپ د کالس جوړیدو درجې کې توپیر او (C) د فریکچر سایټ کراس برخې عکس.(D) د TRAP داغونه د اوستیوکلاسټ فعالیت او د هډوکو بیا جذب کولو لپاره.د TRAP فعالیت پراساس، د کورټیکل هډوکي د خارجي کالس جوړښت د (E) (1) مایکرو CT او (2) اوستیوکلاسټ فعالیت لخوا په کمیتي ډول تحلیل شوی.(F) د امپلانټیشن څخه 6 اونۍ وروسته، د افشا شوي منفي د مات شوي هډوکي X-ray انځورونه (د سور ډش شوي مستطیل لخوا روښانه شوي) او LOIS (د نیلي ډش شوي مستطیل لخوا روښانه شوي).احصایوي تحلیل د توپیر د یو طرفه تحلیل (ANOVA) لخوا ترسره شوی.* پی <0.05.** پی <0.01.
په لنډه توګه، LOIS د ارتوپیډیک امپلانټونو لپاره د انټي باکتریایي انتاناتو نوې ستراتیژي او د معافیت څخه د تیښتې کوټ چمتو کوي.د SHP فعالیت سره دودیز اورتوپیډیک امپلانټونه لنډمهاله د بایو فولینګ ضد ملکیتونه ښیې ، مګر نشي کولی د اوږدې مودې لپاره خپل ملکیتونه وساتي.د سبسټریټ سوپر هایدروفوبیکیت د باکتریا او سبسټریټ ترمینځ هوایی بلبلونه ځړوي ، په دې توګه د هوا جیبونه رامینځته کوي او په دې توګه د باکتریا انفیکشن مخه نیسي.په هرصورت، د هوا د خپریدو له امله، دا هوا جیبونه په اسانۍ سره لرې کیږي.له بلې خوا، LOIS د بایوفیلم پورې اړوند انتاناتو مخنیوي لپاره خپله وړتیا په ښه توګه ثابته کړې.له همدې امله، د پرت لرونکي مایکرو/نانو جوړښت سطح کې د غوړ پرت د ردولو ضد ملکیتونو له امله، د انفیکشن پورې اړوند سوزش مخه نیول کیدی شي.د ځانګړتیاوو بیلابیل میتودونه په شمول د SEM، AFM، XPS او CA اندازه کول د LOIS تولید شرایطو ښه کولو لپاره کارول کیږي.برسېره پردې، LOIS په مختلفو بیولوژیکي موادو کې هم کارول کیدی شي چې معمولا د ارتوپیډیک فکسیشن تجهیزاتو کې کارول کیږي، لکه PLGA، Ti، PE، POM او PPSU.بیا، LOIS په ویټرو کې ازموینه وشوه ترڅو د باکتریا او بیولوژیکي موادو پروړاندې د معافیت غبرګون پورې اړوند د بایو فولینګ ضد ملکیت ثابت کړي.پایلې ښیې چې دا د بیئر امپلانټ په پرتله عالي انټي باکتریا او انټي بایو فولینګ اغیزې لري.برسېره پردې، LOIS حتی د میخانیکي فشار پلي کولو وروسته میخانیکي ځواک ښیي، کوم چې په پلاستيکي جراحۍ کې د مخنیوي وړ ندي.د مایکرو/نانو جوړښت په سطحه د غوړ د ځان شفاهي ملکیتونو له امله، LOIS په بریالیتوب سره خپل د بیولوژیکي ضد ضد ملکیت ساتل.په vivo کې د LOIS د بایو مطابقت او انټي باکتریایي ملکیتونو مطالعې لپاره، LOIS د 4 اونیو لپاره د خرگوش فیمر کې ځای پرځای شوی و.د LOIS سره ایښودل شوي خرگوش کې هیڅ باکتریا انفیکشن ندی لیدل شوی.برسېره پردې، د IHC کارول د محلي معافیت غبرګون کمه کچه ښودلې، دا په ګوته کوي چې LOIS د هډوکي د شفاهي پروسې مخه نه نیسي.LOIS د باکتریایي او معافیتي تیښتې عالي ملکیتونه ښیې، او دا ثابته شوې چې د ارتوپیډیک جراحي دمخه او په جریان کې د بایوفیلم رامینځته کیدو مخه نیسي ، په ځانګړي توګه د هډوکو ترکیب لپاره.د خرگوش د هډوکي میرو التهابي فیمورل فریکچر ماډل په کارولو سره، د هډوکي د شفاهي پروسې په اړه د بایوفیلم پورې اړوند انتاناتو اغیز چې د پری انکیوبیټ امپلانټونو لخوا هڅول شوی په ژوره توګه مطالعه شوی.د راتلونکي مطالعې په توګه ، د امپلانټیشن وروسته د احتمالي انتاناتو مطالعې لپاره د ویوو ماډل ته اړتیا ده ترڅو د بشپړ معالجې پروسې په جریان کې د بایوفیلم پورې اړوند انتاناتو په بشپړ ډول پوهه او مخنیوی وشي.برسېره پردې، osteoinduction لاهم د LOIS سره یوځای کولو کې یوه نه حل شوې ننګونه ده.نورې څیړنې ته اړتیا ده چې د ننګونې د بریالي کولو لپاره د LOIS سره د osteoinductive حجرو انتخابي چپک یا بیا تولیدونکي درمل یوځای کړي.په ټولیز ډول، LOIS د میخانیکي پیاوړتیا او غوره انټي بایو فولینګ ملکیتونو سره د امید لرونکی ارتوپیډیک امپلانټ پوښ استازیتوب کوي، کوم چې کولی شي د SSI او معافیت ضمني اغیزې کم کړي.
د 15mm x 15mm x 1mm 304 SS سبسټریټ (Dong Kang M-Tech Co., Korea) د 15 دقیقو لپاره په اسیټون، EtOH او DI اوبو کې د ککړتیاو لرې کولو لپاره ومینځئ.د دې لپاره چې په سطحه د مایکرو/نانو په کچه جوړښت جوړ شي، پاکه شوې سبسټریټ د 48% څخه تر 51% HF محلول (DUKSAN Corp., South Korea) کې په 50°C کې ډوبیږي.د نقاشۍ وخت له 0 څخه تر 60 دقیقو پورې توپیر لري.بیا، ایچ شوی سبسټریټ د ډیونیز شوي اوبو سره پاک شوی او د 65٪ HNO3 (Korea DUKSAN Corp.) محلول کې د 50 درجې سانتي ګراد د 30 دقیقو لپاره کیښودل شو ترڅو په سطح باندې د کرومیم اکساید پاسیویشن پرت جوړ کړي.د غیر فعال کیدو وروسته، سبسټریټ د ډیونیز شوي اوبو سره مینځل کیږي او وچ شوي ترڅو د پرت لرونکي جوړښت سره سبسټریټ ترلاسه کړي.بیا، سبسټریټ د اکسیجن پلازما سره مخ شو (100 W، 3 دقیقې)، او سمدلاسه د 8.88 mM POTS (Sigma-Aldrich, Germany) په محلول کې د خونې په حرارت درجه کې د 12 ساعتونو لپاره ډوب شو.بیا، د POTS سره لیپت شوی سبسټریټ د EtOH سره پاک شوی، او د 150 درجې سانتي ګراد په درجه کې د 2 ساعتونو لپاره انیل شوی ترڅو د POTS SAM د ترلاسه کولو لپاره.د SAM کوټینګ وروسته، د لبریکینټ پرت د پرفلووروپولیتر غوړ (کریټوکس 101؛ DuPont، USA) په کارولو سره د 20 μm/cm 2 د بارولو حجم سره په سبسټریټ کې رامینځته شو. د کارولو دمخه د 0.2 مایکرون فلټر له لارې غوړ فلټر کړئ.د 15 دقیقو لپاره په 45 درجې زاویه کې په خړوبولو سره اضافي غوړ لرې کړئ.د ورته تولید طرزالعمل د 304 SS څخه جوړ شوي آرتوپیډیک امپلانټونو لپاره کارول شوی و (د تالاشۍ پلیټ او کورټیکل تالاشۍ سکرو؛ دونګ کانګ M-Tech Co.، کوریا).ټول آرتوپیډیک امپلانټونه د خرگوش فیمر جیومیټری سره سم ډیزاین شوي.
د سبسټریټ او ارتوپیډیک امپلانټونو سطحي مورفولوژي د ساحې اخراج SEM (Inspect F50, FEI, USA) او AFM (XE-100, Park Systems, South Korea) لخوا معاینه شوې.د سطحې خرابوالی (Ra, Rq) د 20 μm مساحت په 20 μm (n=4) ضربولو سره اندازه کیږي.یو XPS (PHI 5000 VersaProbe, ULVAC PHI, Japan) سیسټم چې د Al Kα X-ray سرچینې سره مجهز دی د 100μm2 ځای اندازه سره د سطحې کیمیاوي ترکیب تحلیل کولو لپاره کارول شوی و.د CA اندازه کولو سیسټم چې د متحرک عکس اخیستلو کیمرې سره مجهز دی (سمارټ ډراپ، FEMTOBIOMED، سویلي کوریا) د مایع CA او SA اندازه کولو لپاره کارول شوی و.د هرې اندازې لپاره، د 6 څخه تر 10 μl څاڅکي (ډیونیز شوي اوبه، د آس وینه، EG، 30٪ ایتانول، او HD) د CA اندازه کولو لپاره په سطحه کېښودل کیږي.کله چې د سبسټریټ د انډول زاویه د 2°/s (n = 4) په سرعت سره لوړیږي، SA اندازه کیږي کله چې څاڅکي راښکته کیږي.
Pseudomonas aeruginosa [American Type Culture Collection (ATCC) 27853] او MRSA (ATCC 25923) د ATCC (ماناساس، ویرجینیا، USA) څخه اخیستل شوي، او د ذخیره کولو کلتور په -80 ° C کې ساتل شوی.د کارونې دمخه، کنګل شوي کلتور د ټرپسین-تولید سویابین بوش (کومید، کوریا) کې د 18 ساعتونو لپاره په 37 درجې سانتي ګراد کې کیښودل شو او بیا یې د فعالولو لپاره دوه ځله لیږدول.د انکیوبیشن څخه وروسته، کلتور په 10,000 rpm کې د 10 دقیقو لپاره په 4 درجې سانتي ګراد کې سینټرفیوج شوی او دوه ځله د PBS (pH 7.3) محلول سره مینځل شوی.سنټرفیوژ شوی کلتور بیا د وینې اګر پلیټونو (BAP) کې فرعي کلتور کیږي.MRSA او Pseudomonas aeruginosa په شپه کې چمتو شوي او په لوریا-برتاني بروت کې کرل شوي.په انوکولم کې د Pseudomonas aeruginosa او MRSA غلظت په اګر کې د سیریل ډیلیوشن کې د تعلیق د CFU لخوا په کمیتي ډول ټاکل شوی و.بیا، د باکتریا غلظت د 0.5 McFarland معیار سره تنظیم کړئ، کوم چې د 108 CFU/ml سره برابر دی.بیا د کار باکتریا تعلیق 100 ځله 106 CFU/ml ته کم کړئ.د دې لپاره چې د انټي باکتریایي چپکولو ځانګړتیاو ازموینه وشي، سبسټریټ د کارولو دمخه د 15 دقیقو لپاره په 121 ° C کې تعقیم شوی و.بیا وروسته سبسټریټ 25 ملی لیتر باکتریایی تعلیق ته لیږدول شوی او د 12 او 72 ساعتونو لپاره په 37 درجې سانتي ګراد کې د قوي ټکان (200 rpm) سره مینځل کیږي.د انکیوبیشن څخه وروسته، هر سبسټریټ د انکیوبیټر څخه لیرې شوی او د PBS سره 3 ځله مینځل شوی ترڅو په سطحه هرډول باکتریا لرې کړي.په سبسټریټ کې د بایوفیلم لیدو لپاره ، بایوفیلم د میتانول سره تنظیم شوی او د 1 ملی لیتر کریمیډین نارنج سره د 2 دقیقو لپاره رنګ شوی.بیا د فلوروسینس مایکروسکوپ (BX51TR، اولمپس، جاپان) د داغ شوي بایوفیلم عکسونو اخیستلو لپاره وکارول شو.په سبسټریټ کې د بایوفیلم اندازه کولو لپاره، ضمیمه شوي حجرې د سبسټریټ څخه د bead vortex میتود په واسطه جلا شوي، کوم چې د تړل شوي بکتیریا د لرې کولو لپاره ترټولو مناسب میتود ګڼل کیږي (n = 4).د جراثیم ضد قوتونو په کارولو سره، د ودې منځنۍ برخې څخه سبسټریټ لرې کړئ او د اضافي مایع لرې کولو لپاره د څاه پلیټ ټایپ کړئ.په نرمۍ سره تړل شوي حجرې د جراثیمي PBS سره دوه ځله مینځل شوي.هر سبسټریټ بیا یو جراثیمي ټیسټ ټیوب ته لیږدول شوی و چې په کې 9 ملی لیتر 0.1٪ پروټین ept سالین (PSW) او 2 ګرامه د 20 څخه تر 25 جراثیمي شیشې موتی (د 0.4 څخه تر 0.5 ملي میتر قطر) پورې اړه لري.بیا دا د 3 دقیقو لپاره وورټکس شوی و ترڅو حجرې له نمونې څخه جلا کړي.د ورټیکس کولو وروسته، تعلیق په ترتیب سره د 0.1% PSW سره 10-فټه کم شوی، او بیا په BAP کې د هرډول 0.1 ملی لیتره انوکول شوی.په 37 درجو کې د 24 ساعتونو انکیوبیشن وروسته، CFU په لاسي توګه شمیرل کیده.
د حجرو لپاره، موږک فایبروبلاستونه NIH/3T3 (CRL-1658؛ امریکایی ATCC) او د موږک میکروفیج RAW 264.7 (TIB-71؛ امریکایی ATCC) کارول شوي.د Dulbecco تعدیل شوی عقاب میډیم (DMEM; LM001-05, Welgene, Korea) د موږک فایبروبلاسټ کلتور لپاره وکاروئ او د 10٪ خوسکي سیرم (S103-01, Welgene) او 1٪ پینسلین - سټریټټومیسین (PS ; LS20202 - Welgene) سره ضمیمه کړئ. ) DMEM د موږک میکروفیج د کلچر کولو لپاره وکاروئ، د 10٪ fetal bovine سیروم (S001-01، Welgene) او 1٪ PS سره ضمیمه کړئ په شپږ څاه سیل کلچر پلیټ کې، او حجرې په 105 حجرو / cm2 کې واچوئ. حجرې د شپې په 37°C او 5% CO2 کې د 20 دقیقو لپاره د 4% پارافارمالډیهایډ سره تنظیم شوي او د 5 دقیقو لپاره په 50nM tetraminethyl کې ډوب شوي د 30 دقیقو لپاره په 37°C کې د 4′,6-diamino-2-phenylindole (H-1200, Vector Laboratories, UK) سره د VECTASHIELD فکسیشن میډیم (n = 4 د پروټین لپاره). , fluorescein, fluorescein isothiocyanate-albumin (A9771, Sigma-Aldrich, Germany) او د انسان پلازما د Alexa Fluor 488-conjugated fibrinogen (F13191, Invitrogen, USA) په PBS کې منحل شوي (10 m.7. p.4).د البومین او فایبرینوجن غلظت په ترتیب سره 1 او 150 μg/ml وو.د سبسټریټ څخه وروسته د پروټین محلول کې ډوبیدو دمخه ، دوی د PBS سره مینځل ترڅو سطح بیا هایدریټ کړي.بیا ټول فرعي ټوټې په شپږ څاه کې ډوب کړئ چې د پروټین محلول پکې وي او د 30 او 90 دقیقو لپاره په 37 درجې سانتي ګراد کې سینګار کړئ.د انکیوبیشن وروسته، سبسټریټ بیا د پروټین محلول څخه لیرې شو، په نرمۍ سره د PBS سره 3 ځله ومینځل شو، او د 4٪ پارافارمالډیهایډ (n = 4 د هر پروټین لپاره) سره تنظیم شو.د کلسیم لپاره، سوډیم کلورایډ (0.21 M) او پوټاشیم فاسفیټ (3.77 mM) په ډیونیز شوي اوبو کې حل شوي.د محلول pH د هایدروکلورایډ محلول (1M) په اضافه کولو سره 2.0 ته تنظیم شوی.بیا کلسیم کلورایډ (5.62 mM) په محلول کې منحل شو.د 1M tris (hydroxymethyl) په اضافه کولو سره - امینو میتان د محلول pH 7.4 ته تنظیموي.ټول سبسټریټونه په شپږ څاه پلیټ کې ډوب کړئ چې د 1.5 × کلسیم فاسفیټ محلول څخه ډک شوي او د 30 دقیقو وروسته له محلول څخه لرې کړئ.د رنګ کولو لپاره، 2 ګرامه الیزارین ریډ ایس (CI 58005) د 100 ملی لیترو اوبو سره مخلوط کړئ.بیا، 10% امونیم هایدروکسایډ وکاروئ ترڅو pH 4 ته تنظیم کړئ. د الیزرین ریډ محلول سره د 5 دقیقو لپاره سبسټریټ رنګ کړئ او بیا اضافي رنګ او داغ لرې کړئ.د ټکولو پروسې وروسته، سبسټریټ لرې کړئ.مواد ډیهایډریټ کیږي ، بیا د 5 دقیقو لپاره په اسیټون کې ډوب کیږي ، بیا د 5 دقیقو لپاره په اسیټون - xylene (1:1) محلول کې ډوب کیږي او په پای کې د xylene (n = 4) سره مینځل کیږي.فلوروسینس مایکروسکوپ (Axio Imager) د ×10 او ×20 هدف لینزونو سره کارول کیږي..A2m، Zeiss، آلمان) ټول سبسټریټ انځورونه.ImageJ/FIJI (https://imagej.nih.gov/ij/) د څلورو مختلفو عکس العمل ساحو په هر ګروپ کې د بیولوژیکي موادو د جذب ډاټا اندازه کولو لپاره کارول کیده.ټول عکسونه د سبسټریټ پرتله کولو لپاره د ثابت حد سره بائنری عکسونو ته واړوئ.
A Zeiss LSM 700 confocal مایکروسکوپ د انعکاس حالت کې په PBS کې د لبریکین پرت ثبات څارلو لپاره کارول شوی و.د فلورین پر بنسټ د SAM لیپت شوي شیشې نمونه د انجیکشن شوي غوړ کولو پرت سره په PBS محلول کې ډوب شوې ، او د نرم ټکان شرایطو (120 rpm) لاندې د اوربیټل شیکر (SHO-1D؛ ډیهان ساینسي ، سویلي کوریا) په کارولو سره ازموینه شوې.بیا نمونه واخلئ او د انعکاس شوي ر lightا د ضایع کیدو په اندازه کولو سره د غوړ ضایع کیدو څارنه وکړئ.د انعکاس حالت کې د فلوروسینس عکسونو ترلاسه کولو لپاره ، نمونه د 633 nm لیزر سره مخ کیږي او بیا راټولیږي ، ځکه چې رڼا به د نمونې څخه بیرته منعکس شي.نمونې د 0، 30، 60، او 120 ساعتونو په وختونو کې اندازه شوي.
د اورتوپیډیک امپلانټونو په نانو میخانیکي ملکیتونو باندې د سطحې ترمیم پروسې اغیزې معلومولو لپاره ، یو نانو انډینټر (TI 950 TriboIndenter, Hysitron, USA) د درې اړخیز پیرامیډ په شکل د برکوویچ الماس ټیپ سره د نانو انډیډیون اندازه کولو لپاره کارول شوی و.لوړ بار 10 mN دی او ساحه یې 100μmx 100μm ده.د ټولو اندازه کولو لپاره، د بارولو او پورته کولو وخت 10 s دی، او د لوړ انډینټیشن بار لاندې د نیولو وخت 2 s دی.د پنځو مختلفو ځایونو څخه اندازه واخلئ او اوسط واخلئ.د بار لاندې د میخانیکي ځواک فعالیت ارزولو لپاره ، د نړیوال ټیسټ ماشین په کارولو سره د ټرانسورس درې ټکي موڑنے ازموینه ترسره شوه (Instron 5966, Instron, USA).سبسټریټ د 10 N/s په دوامداره نرخ کې د زیات شوي بار سره فشار شوی.د بلیو هیل یونیورسل سافټویر برنامه (n = 3) د انعطاف ماډل او اعظمي فشار فشار محاسبه کولو لپاره کارول شوی و.
د عملیاتو پروسې او د عملیاتو پرمهال رامینځته شوي اړوند میخانیکي زیانونو سمولو لپاره ، د عملیاتو پروسه په ویټرو کې ترسره شوې.فیمر د اعدام شوي نیوزیلینډ سپینې خرگوش څخه راټول شوي.فیمور د 1 اونۍ لپاره په 4٪ پارافارمالډیهایډ کې پاک شوی او ټاکل شوی.لکه څنګه چې د څارویو د تجربې میتود کې تشریح شوی، ثابت شوی فیمر په جراحي ډول عملیات شوی.د عملیاتو وروسته، د اورتوپیډیک امپلانټ د 10 ثانیو لپاره په وینه کې ډوب شوی و (د آس وینه، KISAN، کوریا) ترڅو دا تایید کړي چې ایا د میخانیکي ټپ پلي کیدو وروسته د وینې چپکیدل پیښ شوي (n = 3).
په ټولیز ډول د نیوزیلینډ 24 نارینه سپین خرگوش (وزن له 3.0 څخه تر 3.5 کیلو ګرامه، اوسط عمر 6 میاشتې) په تصادفي ډول په څلورو ګروپونو ویشل شوي: بربنډ منفي، نیوډ مثبت، SHP او LOIS.ټول پروسیجرونه چې حیوانات پکې شامل دي د موسسې د څارویو پاملرنې او کارونې کمیټې (IACUC تصویب شوی، KOREA-2017-0159) د اخلاقي معیارونو سره سم ترسره شوي.د ارتوپیډیک امپلانټ د فریکچر فکسیشن لپاره پنځه سوري (لږوالی 41 ملي میتره، عرض 7 ملي میتره او ضخامت 2 ملي میتر) او د کورټیکل تالاشۍ پیچ (اوږدوالی 12 ملي میتر، قطر 2.7 ملي میتر) لري.د هغو پلیټونو او پیچونو پرته چې په منفي منفي ګروپ کې کارول شوي، ټول پلیټونه او پیچونه د MRSA تعلیق (106 CFU/ml) کې د 12 ساعتونو لپاره ساتل شوي.بربنډ-منفي ګروپ (n = 6) د ناپاکو سطحو امپلانټونو سره پرته له دې چې د باکتریایي تعلیق سره مخ شي، د انفیکشن لپاره د منفي کنټرول په توګه درملنه شوې.د بې کیفیته مثبت ګروپ (n = 6) د بې کیفیته سطحې امپلانټ سره درملنه شوې چې د باکتریا سره مخ شوي د انفیکشن لپاره د مثبت کنټرول په توګه.د SHP ګروپ (n = 6) د باکتریا سره د افشا شوي SHP امپلانټونو سره درملنه شوې.په نهایت کې، د LOIS ګروپ د باکتریا سره مخ شوي LOIS امپلانټونو سره درملنه وشوه (n = 6).ټول څاروي په پنجره کې ساتل کیږي، او ډیری خواړه او اوبه ورکول کیږي.د عملیاتو دمخه، خرگوش د 12 ساعتونو لپاره روژه نیول شوې وه.څاروي د داخلولو لپاره د xylazine (5mg/kg) د intramuscular انجیکشن او د paclitaxel (3mg/kg) په رګونو کې د انجیکشن په واسطه بې هوښه شوي.له هغې وروسته، 2٪ isoflurane او 50٪ څخه تر 70٪ طبي اکسیجن (د جریان کچه 2 L/min) د تنفسي سیسټم له لارې د انستیزیا ساتلو لپاره.دا د غاړې فیمر ته د مستقیم چلند له لارې لګول کیږي.د ویښتو لرې کولو او د پوټکي د پوویډون - آیوډین غیر منتن کولو وروسته، د 6 سانتي مترو په اوږدوالي د کیڼ منځني فیمر په بهر کې یو چیرا جوړ شو.د عضلاتو تر مینځ د خلا په خلاصولو سره د فیمر پوښل، فیمر په بشپړه توګه ښکاره کیږي.پلیټ د فیمورل شافټ مخې ته کیږدئ او د څلورو پیچونو سره یې تنظیم کړئ.د فکس کولو وروسته، د آری تیغ (1 ملی متره ضخامت) وکاروئ ترڅو په مصنوعي ډول د دوهم سوري او څلورم سوري تر مینځ ساحه کې فریکچر رامینځته کړئ.د عملیاتو په پای کې، زخم د مالګې سره مینځل شوی او د سیون سره تړل شوی.هر خرگوش ته د انروفلوکساسین (5 mg/kg) یو پر دریمه برخه په مالګین ډول سره په فرعي ډول داخل شوی.د هډوکي د osteotomy تصدیق کولو لپاره د فیمور پوسټ عملیاتي ایکس رې په ټولو حیواناتو (0، 7، 14، 21، 28، او 42 ورځو کې) اخیستل شوي.د ژور انستیزیا وروسته، ټول حیوانات په 28 او 42 ورځو کې د KCl (2 mmol/kg) په واسطه وژل شوي.د اعدام وروسته، فیمر د مایکرو CT لخوا سکین شوی ترڅو د هډوکي د شفاهي پروسې او د څلورو ګروپونو ترمنځ د هډوکي نوي جوړښت مشاهده او پرتله کړي.
د اعدام څخه وروسته، نرم نسجونه چې د اورتوپیډیک امپلانټونو سره مستقیم تماس کې وو راټول شوي.نسج د شپې په 10٪ غیر جانبدار بفر شوي فارملین کې تنظیم شوی او بیا په EtOH کې ډیهایډریټ شوی.د ډیهایډریټ نسج په پارافین کې ځای پرځای شوی و او د مایکروټوم (400CS؛ EXAKT، آلمان) په کارولو سره د 40 μm ضخامت کې برخې شوي.د انفیکشن لیدلو لپاره، د H&E داغونه او د MT داغونه ترسره شوي.د کوربه غبرګون د چک کولو لپاره، برخه شوي نسج د خرگوش ضد TNF-α لومړني انټي باډي (AB6671, Abcam, USA) او د خرگوش ضد IL-6 (AB6672; Abcam, USA) سره سینګار شوي او بیا د هارسرادش سره درملنه کیږي.اکسیډیز.د جوړونکي لارښوونو سره سم برخو ته د avidin-biotin کمپلیکس (ABC) داغونو سیسټم پلي کړئ.د نسواري عکس العمل محصول په توګه د څرګندیدو لپاره ، 3,3-diaminobenzidine په ټولو برخو کې کارول شوي.د ډیجیټل سلایډ سکینر (Pnoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Hungary) د ټولو سلائسونو لیدو لپاره کارول شوی و، او په هر ګروپ کې لږترلږه څلور سبسټریټونه د ImageJ سافټویر لخوا تحلیل شوي.
د ایکس رے عکسونه په ټولو څارویو کې د جراحي وروسته اخیستل شوي او هره اونۍ د فریکچر درملنې نظارت کولو لپاره (n = په هر ګروپ کې 6).د اعدام وروسته، د لوړ ریزولوشن مایکرو CT د درملنې وروسته د فیمر شاوخوا د کالس جوړښت محاسبه کولو لپاره کارول شوی و.ترلاسه شوی فیمور پاک شوی، په 4٪ پارافارمیلډیهایډ کې د 3 ورځو لپاره ټاکل شوی، او په 75٪ ایتانول کې ډیهایډریټ شوی.بیا د هډوکي ډیهایډریټ شوي هډوکي د مایکرو CT (SkyScan 1173, Brooke Micro-CT, Kandy, Belgium) په کارولو سره سکین شوي ترڅو د هډوکي نمونې 3D ووکسیل عکسونه (2240 ​​× 2240 پکسلز) تولید کړي.د سیګنال شور کمولو لپاره 1.0 mm Al فلټر وکاروئ او په ټولو سکینونو کې لوړ ریزولوشن پلي کړئ (E = 133 kVp، I = 60 μA، د ادغام وخت = 500 ms).د Nrecon سافټویر (نسخه 1.6.9.8، Bruker microCT، Kontich، Belgium) د ترلاسه شوي 2D پس منظر پروجیکشن څخه د سکین شوي نمونې د 3D حجم تولید لپاره کارول شوی و.د تحلیل لپاره، د 3D بیا جوړ شوی عکس د 10mm × 10mm × 10mm کیوبونو کې د فریکچر سایټ سره سم ویشل شوی.د کورټیکل هډوکي بهر کالس محاسبه کړئ.DataViewer (نسخه 1.5.1.2؛ Bruker microCT, Kontich, Belgium) سافټویر په ډیجیټل ډول د سکین شوي هډوکي حجم ریډائریټ کولو لپاره کارول شوی و، او CT-Analyser (نسخه 1.14.4.1؛ Bruker microCT، Kontich، Belgium) سافټویر د تحلیل لپاره کارول شوی و.په بالغ هډوکي او کالس کې د ایکس رې د جذب کوفېنټ د دوی د کثافت له مخې توپیر کیږي، او بیا د کالس حجم اندازه کیږي (n = 4).د دې لپاره چې تایید شي چې د LOIS بایو مطابقت د هډوکو د شفاهي پروسې ځنډ نه کوي، اضافي ایکس رې او مایکرو CT تحلیلونه په دوو خرگوشونو کې ترسره شوي: ناپاک - منفي او LOIS ګروپونه.دواړه ډلې په شپږمه اونۍ کې اعدام شوي.
د قربانی شوي څارویو څخه فیمورونه راټول شوي او د 4٪ پارافارمیلډایډ کې د 3 ورځو لپاره تنظیم شوي.بیا د ارتوپیډیک امپلانټ په احتیاط سره د فیمر څخه لیرې کیږي.فیمور د 0.5 M EDTA (EC-900, National Diagnostics Corporation) په کارولو سره د 21 ورځو لپاره له مینځه وړل شوی.بیا decalcified femur په EtOH کې ډوب شو ترڅو دا ډیهایډریټ کړي.ډیهایډریټ فیمور په xylene کې لرې شوی او په پارافین کې ځای پرځای شوی.بیا نمونه د اتوماتیک روټري مایکروټوم (Leica RM2255, Leica Biosystems, Germany) سره د 3 μm ضخامت سره ټوټه شوې.د TRAP داغونو لپاره (F6760, Sigma-Aldrich, Germany)، برخې شوي نمونې د یو ساعت لپاره د 37 درجې سانتي ګراد په TRAP ریجنټ کې له مینځه وړل شوي، بیا هایډریټ شوي او انکیوب شوي.عکسونه د سلایډ سکینر په کارولو سره ترلاسه شوي (Pnoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Hungary) او د داغ شوي ساحې ساحې پوښښ په اندازه کولو سره اندازه شوي.په هره تجربه کې، په هر ګروپ کې لږترلږه څلور فرعي برخې د ImageJ سافټویر لخوا تحلیل شوي.
د احصایې اهمیت تحلیل د GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., USA) په کارولو سره ترسره شو.بې جوړې ټ-ټیسټ او د توپیر یو طرفه تحلیل (ANOVA) د ارزونې ګروپونو ترمینځ د توپیرونو ازموینې لپاره کارول شوي.د اهمیت کچه ​​په لاندې شکل کې ښودل شوې ده: *P <0.05، **P <0.01، ***P <0.001 او ****P <0.0001؛NS، کوم مهم توپیر نشته.
د دې مقالې لپاره د اضافي موادو لپاره، مهرباني وکړئ وګورئ http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/44/eabb0025/DC1
دا د خلاص لاسرسي مقاله ده چې د کریټیو کامنز انتساب - غیر سوداګریز جواز شرایطو لاندې توزیع شوې ، کوم چې په هره وسیله کې کارول ، توزیع او بیا تولید ته اجازه ورکوي ، تر هغه چې کارول د سوداګریزې ګټې لپاره نه وي او اساس یې دا دی چې اصلي کار سم دی.حواله.
یادونه: موږ یوازې له تاسو څخه غوښتنه کوو چې د بریښنالیک پته چمتو کړئ ترڅو هغه څوک چې تاسو پاڼې ته وړاندیز کوئ پوه شي چې تاسو غواړئ دوی بریښنالیک وګورئ او دا بریښنالیک سپیم نه دی.موږ به هیڅ بریښنالیک پته ونه نیسو.
دا پوښتنه د دې ازموینې لپاره کارول کیږي چې ایا تاسو د انسان لیدونکي یاست او د اتوماتیک سپیم سپارلو مخه ونیسئ.
چو کیونګ من، اوه ینګ جانګ، پارک جون جون، لی جین هیوک، کیم هیون چیول، لی کیونګ مون، لی چانګ کیو، لی یون تایک، لی سن-اک، جیونگ موروی
د ارتوپیډیک امپلانټونو انټي باکتریا او معافیتي فرار کوټینګ کولی شي د انتاناتو له امله رامینځته شوي انتانات او معافیت غبرګونونه کم کړي.
چو کیونګ من، اوه ینګ جانګ، پارک جون جون، لی جین هیوک، کیم هیون چیول، لی کیونګ مون، لی چانګ کیو، لی یون تایک، لی سن-اک، جیونگ موروی
د ارتوپیډیک امپلانټونو انټي باکتریا او معافیتي فرار کوټینګ کولی شي د انتاناتو له امله رامینځته شوي انتانات او معافیت غبرګونونه کم کړي.
© 2021 د ساینس د پرمختګ لپاره امریکایی ټولنه.ټول حقونه خوندي دي.AAAS د HINARI، AGORA، OARE، CHORUS، CLOCKSS، CrossRef او COUNTER شریک دی.ساینس پرمختګ ISSN 2375-2548.