Барои бемороне, ки ҷарроҳии имплантатсияи ортопедиро мегузаронанд, сироятҳои бактериявӣ ва аксуламалҳои иммунии бо сироят ба вуҷуд омада ҳамеша хатари ҳаётӣ буданд.Маводи биологии анъанавӣ ба ифлосшавии биологӣ ҳассос аст, ки боиси он мегардад, ки бактерияҳо ба минтақаи осебдида ворид шуда, сирояти пас аз ҷарроҳиро ба вуҷуд оранд.Аз ин рӯ, эҳтиёҷоти фаврӣ таҳия кардани пӯшишҳои зидди сироятӣ ва фирорӣ барои имплантатҳои ортопедӣ вуҷуд дорад.Дар ин ҷо, мо технологияи пешрафтаи тағир додани сатҳи имплантатсияҳои ортопедиро бо номи Surface Orthopedic Implant Surface (LOIS) таҳия кардем, ки аз сатҳи ҳамвори кӯзаҳои растании кӯза илҳом гирифта шудааст.LOIS дорои моеъҳои дарозмуддат ва қавӣ ба моеъҳои гуногун ва моддаҳои биологӣ (аз ҷумла ҳуҷайраҳо, сафедаҳо, калсий ва бактерияҳо) мебошад.Илова бар ин, мо устувории механикиро бар зидди харошидан ва қувваи собит тавассути тақлид кардани зарари ногузир ҳангоми ҷарроҳии in vitro тасдиқ кардем.Модели шикастани илтиҳоби устухони устухони харгӯш барои омӯзиши ҳамаҷонибаи миқёси зиддибиологӣ ва қобилияти зидди сирояти LOIS истифода шудааст.Мо дар назар дорем, ки LOIS, ки дорои хосиятҳои зидди биологӣ ва устувории механикӣ мебошад, як қадами пеш дар ҷарроҳии ортопедии бе сироят мебошад.
Имрӯзҳо бинобар пиршавии умумӣ шумораи беморони гирифтори бемориҳои ортопедӣ (аз қабили шикастани пиронсолон, бемориҳои дегенеративии буғумҳо ва остеопороз) хеле зиёд шудааст (1, 2).Аз ин рў, муассисањои тиббї ба љарроњии ортопедї, аз љумла имплантатњои ортопедии бурв, пластинка, мех ва буѓумњои сунъї ањамияти калон медињанд (3, 4).Бо вуҷуди ин, гузориш дода шудааст, ки имплантатҳои анъанавии ортопедӣ ба адгезияи бактериявӣ ва ташаккули биофилм ҳассос мебошанд, ки метавонанд пас аз ҷарроҳӣ сирояти макони ҷарроҳиро (SSI) ба вуҷуд оранд (5, 6).Вақте ки бифилм дар рӯи импланти ортопедӣ ба вуҷуд меояд, хориҷ кардани биофилм ҳатто ҳангоми истифодаи миқдори зиёди антибиотикҳо ниҳоят мушкил мегардад.Аз ин рӯ, он одатан ба сироятҳои шадиди пас аз ҷарроҳӣ оварда мерасонад (7, 8).Аз сабаби мушкилоти дар боло зикршуда, табобати имплантатҳои сироятшуда бояд амалиёти такрорӣ, аз ҷумла хориҷ кардани ҳама имплантатсияҳо ва бофтаҳои атрофро дар бар гирад;аз ин рӯ, бемор дарди шадид ва баъзе хатарҳоро аз сар мегузаронад (9, 10).
Барои ҳалли баъзе аз ин мушкилот, имплантатҳои ортопедии доруворӣ барои пешгирии сироят тавассути нест кардани бактерияҳои ба рӯи замин пайвастшуда таҳия карда шуданд (11, 12).Бо вуҷуди ин, стратегия то ҳол якчанд маҳдудиятҳоро нишон медиҳад.Гузориш шудааст, ки имплантатсияҳои дарозмуддати доруворӣ ба бофтаҳои атроф осеб расонида, илтиҳобро ба вуҷуд овардааст, ки метавонад ба некроз оварда расонад (13, 14).Илова бар ин, ҳалкунандаҳои органикӣ, ки метавонанд пас аз истеҳсоли имплантатсияҳои ортопедии бо маводи мухаддир мавҷуд бошанд, ки аз ҷониби Идораи озуқаворӣ ва маводи мухаддири ИМА қатъиян манъ карда шудаанд, барои қонеъ кардани стандартҳои он қадамҳои иловагии тозакуниро талаб мекунанд (15).Имплантатҳои аз маводи мухаддир озодшуда барои баровардани назоратшавандаи доруҳо мушкил доранд ва аз сабаби маҳдуд будани боркунии маводи мухаддир, истифодаи дарозмуддати дору имконнопазир аст (16).
Стратегияи дигари маъмул ин пӯшонидани имплантатсия бо полимери зидди ифлоскунанда барои пешгирии часпидани моддаҳои биологӣ ва бактерияҳо ба рӯи он аст (17).Масалан, полимерҳои звитерионикӣ аз сабаби хосиятҳои илтиёмии худ ҳангоми тамос бо сафедаҳои плазма, ҳуҷайраҳо ва бактерияҳо диққати худро ҷалб карданд.Бо вуҷуди ин, он дорои баъзе маҳдудиятҳои вобаста ба устувории дарозмуддат ва устувории механикӣ мебошад, ки ба татбиқи амалии он дар имплантатсияҳои ортопедӣ, махсусан аз сабаби пошидани механикӣ ҳангоми ҷарроҳӣ халал мерасонад (18, 19).Илова бар ин, аз сабаби мутобиқати баланди биологӣ, набудани ниёз ба ҷарроҳии бартарафсозӣ ва хосиятҳои тозакунии рӯи замин тавассути зангзанӣ, имплантатсияҳои ортопедии аз маводи биологии вайроншаванда истифода шудаанд (20, 21).Ҳангоми зангзанӣ, пайвандҳои кимиёвии байни матритсаи полимерӣ шикаста ва аз сатҳ ҷудо мешаванд ва пайвастагиҳо сатҳи онро тоза мекунанд.Бо вуҷуди ин, ифлосшавии зидди биологӣ тавассути тоза кардани сатҳ дар як муддати кӯтоҳ самаранок аст.Илова бар ин, аксари маводҳои ҷаббида, аз ҷумла сополимери кислотаи лактикӣ-гликолитӣ) (PLGA), кислотаи полилактикӣ (PLA) ва хӯлаҳои магний дар бадан нобаробар деградатсия ва эрозия мешаванд, ки ба устувории механикӣ таъсири манфӣ мерасонанд.(бисту ду).Илова бар ин, порчаҳои табақи биологӣ барои пайваст кардани бактерияҳо ҷой фароҳам меоранд, ки эҳтимолияти сироятро дар дарозмуддат зиёд мекунад.Ин хатари таназзули механикӣ ва сироят татбиқи амалии ҷарроҳии пластикиро маҳдуд мекунад (23).
Сатҳи супергидрофобӣ (SHP), ки сохтори иерархивии баргҳои лотусро тақлид мекунанд, як ҳалли эҳтимолӣ барои сатҳи зидди ифлосшавӣ гардиданд (24, 25).Вақте ки сатҳи SHP ба моеъ ғарқ карда мешавад, футурҳои ҳаво баста мешаванд ва ба ин васила ҷайбҳои ҳаворо ташкил медиҳанд ва аз пайвастшавии бактерияҳо пешгирӣ мекунанд (26).Аммо, таҳқиқоти охирин нишон доданд, ки сатҳи SHP дорои нуқсонҳои марбут ба устувории механикӣ ва устувории дарозмуддат мебошад, ки ба татбиқи он дар имплантатсияҳои тиббӣ халал мерасонад.Ғайр аз он, кисаҳои ҳавоӣ маҳлул мешаванд ва хосиятҳои зидди ифлосшавии худро гум мекунанд, ки дар натиҷа аз ҳисоби майдони калони сатҳи SHP ба часпаки васеътари бактерияҳо оварда мерасонад (27, 28).Ба наздикӣ, Айзенберг ва ҳамкорон усули инноватсионии рӯйпӯши зидди биологиро тавассути таҳияи сатҳи ҳамвор, ки аз нерӯгоҳи кӯзаи Nepenthes илҳом гирифта шудааст, ҷорӣ карданд (29, 30).Сатҳи ҳамвор дар шароити гидравликӣ устувории дарозмуддат нишон медиҳад, ба моеъҳои биологӣ хеле моеъ тобовар аст ва хосиятҳои худтаъмиркунанда дорад.Бо вуҷуди ин, на усули татбиқ кардани пӯшиш ба имплантатҳои мураккаби тиббӣ вуҷуд дорад ва на барои дастгирии раванди муолиҷаи бофтаи осебдида пас аз имплантатсия исбот карда нашудааст.
Дар ин ҷо мо сатҳи имплантатҳои ортопедии молиданро (LOIS), сатҳи имплантатҳои ортопедии микро/наноструктураи ортопедиро муаррифӣ мекунем ва бо қабати тунуки молиданӣ зич муттаҳид карда шудааст, то аз алоқамандии он бо ҷарроҳии пластикӣ пешгирӣ карда шавад.Азбаски сохтори сатҳи микро/нано-функсионалӣ молиданро ба сохтор устувор мегузорад, LOIS-и таҳияшуда метавонад пайвастагии моеъҳои гуногунро пурра дафъ кунад ва барои муддати тӯлонӣ фаъолияти зидди ифлосшавӣ нигоҳ дорад.Кабатҳои LOIS метавонанд ба маводҳои шаклҳои гуногун, ки барои синтези устухон пешбинӣ шудаанд, татбиқ карда шаванд.Хусусиятҳои аълои зидди биологии LOIS бар зидди бактерияҳои биофилм [Pseudomonas aeruginosa ва Staphylococcus aureus (MRSA) тобовар ба метициллин] ва моддаҳои биологӣ (ҳуҷайраҳо, сафедаҳо ва калсий) in vitro тасдиқ карда шудаанд.Сатҳи пайвастшавии васеъ ба субстрат камтар аз 1% аст.Илова бар ин, ҳатто пас аз рух додани фишори механикӣ, ба монанди харошидан, худидоракунӣ, ки тавассути молидани воридшаванда ба вуҷуд омадааст, ба нигоҳ доштани хосиятҳои зидди ифлосшавии он мусоидат мекунад.Натиҷаҳои санҷиши устувории механикӣ нишон медиҳанд, ки ҳатто пас аз тағири сохторӣ ва кимиёвӣ, қувваи умумӣ ба таври назаррас коҳиш нахоҳад ёфт.Илова бар ин, як таҷрибаи in vitro, ки фишори механикиро дар муҳити ҷарроҳӣ тақлид мекунад, барои исбот кардани он, ки LOIS метавонад ба фишорҳои гуногуни механикӣ, ки ҳангоми ҷарроҳии пластикӣ рух медиҳанд, тоб овардааст.Ниҳоят, мо модели шикастани устухони устухони харгӯшро дар vivo истифода бурдем, ки собит кард, ки LOIS дорои хосиятҳои олии антибактериалӣ ва мутобиқати биологӣ мебошад.Натиҷаҳои радиологӣ ва гистологӣ тасдиқ карданд, ки рафтори устувори равғани молиданӣ ва хосиятҳои зидди биологӣ дар давоми 4 ҳафтаи пас аз имплантатсия метавонад ба самаранокии зидди сироят ва фирор аз иммунӣ бидуни таъхири раванди муолиҷаи устухон ноил шавад.
Тасвири 1А диаграммаи схематикии LOIS-и таҳияшударо нишон медиҳад, ки бо сохторҳои микро/нано-миқёс дар модели шикастани устухони харгӯш барои тасдиқи хосиятҳои аълои зидди биологӣ ва зидди сирояти он имплантатсия карда шудааст.Усули биомиметикӣ барои тақлид кардани сатҳи як растании обӣ ва пешгирӣ кардани биологӣ тавассути ворид кардани қабати молиданӣ дар сохтори микро/нано сатҳи рӯи он гузаронида мешавад.Сатҳи сӯзандоруи молидан метавонад тамоси байни моддаҳои биологиро ва сатҳи онро кам кунад.Аз ин рӯ, аз сабаби ташаккули пайвандҳои кимиёвии устувор дар рӯи он, он дорои сифати аълои зиддифулятсия ва устувории дарозмуддат мебошад.Дар натиҷа, хосиятҳои зидди биофулингии сатҳи молидан имкон медиҳанд, ки дар тадқиқоти биотиббӣ татбиқи амалии гуногун дошта бошанд.Бо вуҷуди ин, таҳқиқоти васеъ дар бораи он, ки ин сатҳи махсус дар бадан чӣ гуна таъсир мерасонад, ба анҷом нарасидааст.Бо муқоисаи LOIS бо субстратҳои бараҳна дар in vitro бо истифода аз альбумин ва бактерияҳои биофилм, часпак набудани LOIS-ро метавон тасдиқ кард (Расми 1B).Илова бар ин, тавассути ғелонда кардани қатраҳои об дар субстрати бараҳна ва субстрати LOIS (Расми S1 ва Филми S1), иҷрои ифлосшавии биологиро метавон нишон дод.Тавре ки дар тасвири микроскопи флуоресцентӣ нишон дода шудааст, субстрати фошшуда дар суспензияи сафеда ва бактерияҳо дар инкубатсия миқдори зиёди маводи биологиро нишон дод, ки ба рӯи замин часпидааст.Бо вуҷуди ин, аз сабаби хосиятҳои аълои зидди биологии худ, LOIS ҳеҷ гуна флуоресцентро базӯр нишон намедиҳад.Барои тасдиқи хосиятҳои зиддибиологӣ ва зидди сироятии он, LOIS ба рӯи имплантҳои ортопедӣ барои синтези устухон (плитаҳо ва бурҳо) татбиқ карда шуд ва дар модели шикастани харгӯш ҷойгир карда шуд.Пеш аз имплантатсия, имплантатҳои ортопедии бараҳна ва LOIS дар суспензияи бактериявӣ барои 12 соат инкубатсия карда шуданд.Пеш аз инкубатсия кафолат медиҳад, ки дар сатҳи имплантат фошшуда барои муқоиса биофилм ба вуҷуд меояд.Дар расми 1С акси макони шикастани 4 ҳафта пас аз имплантатсия нишон дода шудааст.Дар тарафи чап, харгӯш бо импланти ортопедии урён сатҳи шадиди илтиҳобро аз сабаби ташаккули биофилм дар рӯи имплант нишон дод.Натиҷаи баръакс дар харгӯшҳое, ки бо LOIS имплантатсия карда шудаанд, мушоҳида шуд, яъне дар бофтаҳои атрофи LOIS на аломатҳои сироят ва на аломатҳои илтиҳоб ба назар мерасанд.Илова бар ин, тасвири оптикӣ дар тарафи чап макони ҷарроҳии харгӯшро бо импланти фошшуда нишон медиҳад, ки нишон медиҳад, ки дар сатҳи LOIS ягон илтиёмии сершумор дар рӯи имплантат ошкор карда нашудааст.Ин нишон медиҳад, ки LOIS устувории дарозмуддат дорад ва қобилияти нигоҳ доштани хосиятҳои зидди биологӣ ва зидди илтиҳоби худро дорад.
(A) Диаграммаи схематикии LOIS ва имплантатсияи он дар модели шикастани устухони харгӯш.(B) Тасвири микроскопияи флуоресцентии сафеда ва биофилми бактериявӣ дар сатҳи урён ва субстрати LOIS.4 ҳафтаи пас аз имплантатсия, (C) акси акси макони шикаста ва (D) тасвири рентгенӣ (бо росткунҷаи сурх таъкид карда мешавад).Аксҳо бо эҳтиром: Кёмин Чае, Донишгоҳи Йонсей.
Харгӯшҳои стерилизатсияшуда ва ба таври манфии имплантатсияшуда бе ягон аломати илтиҳоб ё сироят раванди муътадили муолиҷаи устухонро нишон доданд.Аз тарафи дигар, имплантатҳои SHP, ки дар суспензияи бактериявӣ пешакӣ инкубатсия карда шудаанд, дар бофтаҳои атроф илтиҳоби марбут ба сироятро нишон медиҳанд.Инро метавон ба он рабт дод, ки он барои муддати тӯлонӣ ҷилавгирӣ аз пайвастагии бактериявӣ (расми S2).Барои исбот кардани он, ки LOIS ба раванди табобат таъсир намерасонад, аммо сироятҳои эҳтимолии марбут ба имплантатсияро бозмедорад, тасвирҳои рентгении матритсаи мусбати фошшуда ва LOIS дар макони шикастан муқоиса карда шуданд (Расми 1D).Тасвири рентгении импланти мусбати бараҳна хатҳои доимии остеолизро нишон дод, ки устухон пурра шифо наёфтааст.Ин аз он шаҳодат медиҳад, ки раванди барқарорсозии устухон метавонад аз сабаби илтиҳоби сироятӣ ба таври назаррас ба таъхир афтад.Баръакс, ин нишон дод, ки харгӯшҳое, ки бо LOIS имплантатсия карда шудаанд, шифо ёфтаанд ва ягон ҷои шикастани ошкорро нишон надодаанд.
Бо мақсади таҳияи имплантатҳои тиббӣ бо устуворӣ ва функсияҳои дарозмуддат (аз ҷумла муқовимат ба биологӣ) кӯшишҳои зиёд ба харҷ дода шуданд.Аммо мавҷудияти моддаҳои гуногуни биологӣ ва динамикаи пайвастшавии бофтаҳо рушди усулҳои аз ҷиҳати клиникӣ боэътимоди онҳоро маҳдуд мекунад.Барои рафъи ин камбудиҳо, мо як сохтори қабати микро/нано ва сатҳи аз ҷиҳати кимиёвӣ тағирёфтаро таҳия кардем, ки аз ҳисоби қувваи баланди капиллярӣ ва наздикии кимиёвӣ оптимизатсия карда шудааст, то ҳамвортарин равғани молиданӣ то ҳадди аксар нигоҳ дошта шавад.Дар расми 2А раванди умумии истеҳсолии LOIS нишон дода шудааст.Аввалан, як субстрати тиббии аз пӯлоди зангногир (SS) 304 омода кунед.Сониян, сохтори микро/нано дар субстрати SS тавассути пошидани кимиёвӣ бо истифода аз маҳлули кислотаи гидрофторӣ (HF) ташаккул меёбад.Барои барқарор кардани муқовимат ба зангзании SS маҳлули кислотаи азотӣ (HNO3) (31) барои коркарди субстрати кандашуда истифода мешавад.Пассиватсия муқовимат ба зангзании субстрати SS-ро афзоиш медиҳад ва раванди зангзаниро ба таври назаррас суст мекунад, ки метавонад кори умумии LOIS-ро коҳиш диҳад.Сипас, тавассути ташаккули як қабати худсохташуда (SAM) бо 1H, 1H, 2H, 2H-perfluorooctyltriethoxysilane (POTS), сатҳи кимиёвӣ тағир дода мешавад, то таъсири кимиёвии байни сатҳ ва равғани молидании ҳамворро беҳтар кунад.Тағироти рӯизаминӣ энергияи сатҳи сатҳи сохтории микро/нано-миқёси сохташударо ба таври назаррас коҳиш медиҳад, ки ба энергияи рӯизаминии молидани ҳамвор мувофиқат мекунад.Ин имкон медиҳад, ки равғани молиданӣ пурра тар шавад ва бо ин дар рӯи замин қабати устувори молиданӣ ба вуҷуд ояд.Сатҳи таҳриршуда гидрофобигии беҳтаршударо нишон медиҳад.Натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки молидании лағжанда аз сабаби наздикии баланди кимиёвӣ ва қувваи капиллярӣ, ки аз сохтори микро/нано ба вуҷуд омадааст, рафтори устуворро дар LOIS нишон медиҳад (32, 33).Тағйироти оптикии сатҳи SS пас аз модификацияи сатҳ ва сӯзандоруи равғанҳои молиданӣ омӯхта шуд.Сохтори қабати микро/нано, ки дар рӯи замин ташаккул ёфтааст, метавонад тағироти визуалиро ба вуҷуд орад ва сатҳи онро тира кунад.Ин падида ба таъсири пурқуввати паҳншавии рӯшноӣ дар сатҳи ноҳамвор марбут аст, ки инъикоси диффузиеро, ки аз механизми нигоҳдории рӯшноӣ ба вуҷуд меояд, зиёд мекунад (34).Илова бар ин, пас аз ворид кардани равғани молиданӣ, LOIS ториктар мешавад.Қабати молиданӣ боиси кам шудани равшании субстрат мегардад ва ҳамин тариқ LOIS-ро тира мекунад.Бо мақсади оптимизатсияи микроструктура/наноструктура барои нишон додани кунҷи хурдтарини лағжиш (SA) барои ноил шудан ба самаранокии зидди биологӣ, микроскопияи электронии сканерӣ (SEM) ва ҷуфтҳои атомӣ барои иҷро кардани вақтҳои гуногуни HF истифода шуданд (0, 3)., 15 ва 60 дакика) Микроскопи кувва (ФМ) (расми 2В).Тасвирҳои SEM ва AFM нишон медиҳанд, ки пас аз як муддати кӯтоҳи etching (3 дақиқаи etching) субстрати луч ноҳамвории нобаробари нано-миқёсро ба вуҷуд овард.Ноҳамвории сатҳ бо вақти сӯзишворӣ тағйир меёбад (расми S3).Хатти каҷ дар вақти тағйирёбанда нишон медиҳад, ки ноҳамвории рӯи замин афзоиш ёфта, дар 15 дақиқаи кандашавӣ ба авҷи аъло мерасад ва пас аз он танҳо дар 30 дақиқаи кашиш каме паст шудани қимати ноҳамворӣ мушоҳида мешавад.Дар ин лаҳза, ноҳамворӣ дар сатҳи нано хориҷ карда мешавад, дар ҳоле ки ноҳамвории микро-сатҳи сахт инкишоф меёбад ва тағирёбии ноҳамворро устувортар мекунад.Баъди зиёда аз 30 дакика овор кардан, афзоиши минбаъдаи ноҳамворӣ мушоҳида мешавад, ки онро ба таври муфассал шарҳ медиҳад: SS аз пӯлод иборат аст, ки бо элементҳо, аз ҷумла оҳан, хром, никел, молибден ва бисёр элементҳои дигар омехта шудааст.Дар байни ин элементҳо оҳан, хром ва молибден дар ташаккули ноҳамвории микрон/миқёси нано-миқёс дар SS тавассути etching HF нақши муҳим доранд.Дар марҳилаҳои аввали зангзанӣ, оҳан ва хром асосан занг мезанад, зеро молибден нисбат ба молибден муқовимат ба зангзании баландтар дорад.Ҳангоми пешравии etching, маҳлули etching ба аз ҳад зиёд сер шудани маҳаллӣ мерасад ва фторидҳо ва оксидҳоро, ки дар натиҷаи etching ба вуҷуд омадаанд, ташкил медиҳанд.Фторид ва оксид боришот шуда, дар ниҳоят дар рӯи замин дубора рехта мешаванд ва дар диапазони микрон/нано ноҳамвории рӯизаминиро ба вуҷуд меоранд (31).Ин ноҳамворӣ дар сатҳи микро/нано дар хосиятҳои худтабобати LOIS нақши муҳим мебозад.Сатҳи миқёси дугона таъсири синергетикӣ эҷод мекунад ва қувваи капилляриро хеле зиёд мекунад.Ин падида имкон медиҳад, ки равғани молиданӣ ба сатҳи устувор ворид шавад ва ба хосиятҳои худтабобаткунӣ мусоидат кунад (35).Ташаккули ноҳамвор аз вақти пошидан вобаста аст.Дар давоми 10 дақиқаи кандашавӣ, рӯи он танҳо ноҳамвории нано-миқёс дорад, ки барои нигоҳ доштани равғани молиданӣ барои муқовимат ба биологӣ кофӣ нест (36).Аз тарафи дигар, агар вақти сӯхтан аз 30 дақиқа зиёд бошад, ноҳамвории нано-миқёси дар натиҷаи дубора ҷойгиркунии оҳан ва хром аз байн меравад ва танҳо аз ҳисоби молибден ноҳамвории хурд боқӣ мемонад.Сатҳи аз ҳад зиёд кашидашуда ноҳамвории наномикёс надорад ва таъсири синергистии ноҳамвории думарҳиларо гум мекунад, ки ба хусусиятҳои худтабобати LOIS таъсири манфӣ мерасонад.Андозагирии SA дар субстратҳо бо вақтҳои гуногун барои исбот кардани фаъолияти зидди ифлосшавӣ анҷом дода шуданд.Навъҳои гуногуни моеъҳо дар асоси часпакӣ ва энергияи рӯизаминӣ, аз ҷумла оби деионизатсияшуда (DI), хун, этиленгликол (EG), этанол (EtOH) ва гексадекан (HD) интихоб карда шуданд (Расми S4).Намунаи пошидани бо вақт тағйирёбанда нишон медиҳад, ки барои моеъҳои гуногун бо энергия ва часпакҳои гуногуни рӯизаминӣ, SA-и LOIS пас аз 15 дақиқаи кандашавӣ пасттарин аст.Аз ин рӯ, LOIS барои эҷоди ноҳамвории микрон ва нано-миқёс, ки барои самаранок нигоҳ доштани устувории молидан ва хосиятҳои аълои зидди ифлосшавӣ мувофиқ аст, барои 15 дақиқа оптимизатсия карда шудааст.
(A) Диаграммаи схематикии раванди чорқадами истеҳсолии LOIS.Дар дохил SAM-и дар субстрат ташкилшуда нишон дода шудааст.(B) Тасвирҳои SEM ва AFM, ки барои оптимизатсияи сохтори микро/нано субстрат дар вақтҳои гуногун истифода мешаванд.спектроскопияи рентгении фотоэлектрони (XPS) спектрҳои (C) Cr2p ва (D) F1s пас аз пассиватсияи сатҳ ва рӯйпӯши SAM.au, воҳиди ихтиёрӣ.(E) Тасвири намояндагии қатраҳои об дар субстратҳои урён, кандашуда, SHP ва LOIS.(F) Андозаи кунҷи тамос (CA) ва SA-и моеъҳо бо шиддати сатҳи гуногун дар SHP ва LOIS.Маълумот ҳамчун миёна ± SD ифода карда мешаванд.
Баъд бо максади тасдик намудани тагйир ёфтани хосиятхои химиявии сатх аз усули спектроскопияи рентгении фотоэлектрони (XPS) барои омухтани тагйирёбии таркиби химиявии сатхи субстрат баъди хар як пушидани сатх истифода бурда шуд.Дар расми 2С натиҷаҳои ченкунии XPS-и сатҳи кандашудаи HF ва сатҳи коркардшудаи HNO 3 нишон дода шудааст.Ду қуллаи асосӣ дар 587,3 ва 577,7 eV-ро метавон ба пайванди Cr-O, ки дар қабати оксиди хром мавҷуд аст, рабт дод, ки фарқияти асосӣ аз сатҳи кандашудаи HF мебошад.Ин асосан аз ҳисоби истеъмоли оҳан ва фториди хром дар сатҳи HNO3 мебошад.Эзоҳ дар асоси HNO3 ба хром имкон медиҳад, ки дар рӯи замин як қабати оксиди пассивкунанда ташкил кунад, ки SS-ро дубора ба зангзанӣ тобовар месозад.Дар расми 2D, спектрҳои XPS ба даст оварда шуданд, то тасдиқ кунанд, ки силан дар асоси флюорокарбон дар сатҳи пас аз пӯшиши SAM ба вуҷуд омадааст, ки он ҳатто барои EG, хун ва EtOH қобилияти моеъи хеле баланд дорад.Пӯшидани SAM тавассути реаксия кардани гурӯҳҳои функсионалии силан бо гурӯҳҳои гидроксил, ки дар натиҷаи коркарди плазма ба вуҷуд омадаанд, анҷом дода мешавад.Дар натиҷа, афзоиши назарраси қуллаҳои CF2 ва CF3 мушоҳида карда шуд.Энергияи пайвастшавӣ байни 286 ва 296 эВ нишон медиҳад, ки тағироти кимиёвӣ бо пӯшиши SAM бомуваффақият анҷом дода шудааст.SHP қуллаҳои нисбатан калони CF2 (290,1 eV) ва CF3 (293,3 eV) -ро нишон медиҳад, ки аз силан дар асоси фторкарбон дар рӯи замин ба вуҷуд омадаанд.Дар расми 2E тасвирҳои оптикии ченкунии кунҷи тамос (CA) барои гурӯҳҳои гуногуни оби деионизатсияшуда дар тамос бо луч, кандашуда, SHP ва LOIS нишон дода шудаанд.Ин тасвирҳо нишон медиҳанд, ки сатҳи кандашуда аз ҳисоби сохтори микро/нано, ки дар натиҷаи etching химиявӣ ба вуҷуд омадааст, гидрофилӣ мешавад, то оби деионизатсияшуда ба сохтор ҷаббида шавад.Аммо, вақте ки субстрат бо SAM пӯшонида мешавад, субстрат тобовар будани обро нишон медиҳад, аз ин рӯ SHP рӯизаминӣ ба вуҷуд меояд ва майдони тамос байни об ва сатҳ хурд аст.Ниҳоят, дар LOIS коҳиши CA мушоҳида карда шуд, ки онро метавон ба ворид шудани равғани молидан ба микроструктурам рабт дод ва ба ин васила майдони тамосро зиёд кард.Барои исбот кардани он, ки сатҳ дорои хосиятҳои хуби моеъ ва хосиятҳои часпак нест, LOIS бо субстрати SHP бо роҳи чен кардани CA ва SA бо истифода аз моеъҳои гуногун муқоиса карда шуд (Расми 2F).Намудҳои гуногуни моеъҳо аз рӯи часпакӣ ва энергияи рӯизаминӣ интихоб карда шуданд, аз ҷумла оби деионизатсияшуда, хун, EG, EtOH ва HD (Расми S4).Натиҷаҳои андозагирии CA нишон медиҳанд, ки вақте ки CA ба HD майл дорад, арзиши камшавии CA, ки дар он CA энергияи сатҳи пасттарин дорад.Илова бар ин, LOIS-и умумии CA паст аст.Аммо, андозагирии SA як падидаи тамоман дигарро нишон медиҳад.Ба ғайр аз оби ионизатсияшуда, ҳама моеъҳо ба субстрати SHP бе лағжиш часпида мешаванд.Аз тарафи дигар, LOIS SA-и хеле пастро нишон медиҳад, ки дар он вақте ки тамоми моеъ дар кунҷи камтар аз 10 ° то 15 ° майл карда мешавад, ҳама моеъ меғелонад.Ин ба таври қатъӣ нишон медиҳад, ки часпак набудани LOIS нисбат ба сатҳи SHP беҳтар аст.Илова бар ин, рӯйпӯшҳои LOIS инчунин ба намудҳои гуногуни маводҳо, аз ҷумла титан (Ti), полифенилсульфон (PPSU), полиоксиметилен (POM), кетони полиэфири эфирӣ (PEEK) ва полимерҳои биоабсорбшаванда (PLGA) татбиқ карда мешаванд, Онҳо маводи ортопедии имплантатсионӣ мебошанд (Расми S5)).Тасвирҳои пайдарпайи қатраҳо дар маводе, ки аз ҷониби LOIS коркард шудааст, нишон медиҳанд, ки хосиятҳои зидди биологии LOIS дар ҳама субстратҳо яксонанд.Илова бар ин, натиҷаҳои андозагирии CA ва SA нишон медиҳанд, ки хосиятҳои илтиёмии LOIS метавонанд ба дигар маводҳо татбиқ карда шаванд.
Барои тасдиқи хосиятҳои зидди ифлосшавии LOIS, намудҳои гуногуни субстратҳо (аз ҷумла бараҳна, кандашуда, SHP ва LOIS) бо Pseudomonas aeruginosa ва MRSA инкубатсия карда шуданд.Ин ду бактерия ҳамчун бактерияҳои намояндагии беморхона интихоб карда шуданд, ки метавонанд ба ташаккули биофилмҳо оварда расонанд ва ба SSI оварда расонанд (37).Тасвири 3 (А ва В) тасвирҳои микроскопи флуоресцентӣ ва натиҷаҳои ченкунии воҳиди ташаккули колония (CFU)-и субстратҳои дар суспензияи бактериявӣ барои кӯтоҳмуддат (12 соат) ва дарозмуддат (72 соат) инкубатсияшударо нишон медиҳад.Дар як муддати кӯтоҳ бактерияҳо кластерҳо ташкил карда, калон мешаванд ва худро бо моддаҳои луобмонанд мепӯшонанд ва бартараф кардани онҳоро пешгирӣ мекунанд.Бо вуҷуди ин, дар давоми инкубатсияи 72-соата, бактерияҳо ба камол мерасанд ва пароканда мешаванд, то колонияҳо ё кластерҳои бештар ташкил кунанд.Аз ин рӯ, метавон ҳисоб кард, ки инкубатсияи 72-соата тӯлонӣ буда, вақти мувофиқи инкубатсия барои ташаккули биофилми қавӣ дар рӯи замин аст (38).Дар як муддати кутох сатхи кандашу-да ва сатхи SHP адгезияи бактериявиро нишон дод, ки он нисбат ба субстрати урён такрибан 25 то 50 фоиз кам шуд.Бо вуҷуди ин, аз сабаби самаранокии аълои зидди биологӣ ва устувории худ, LOIS дар муддати кӯтоҳ ва дарозмуддат часпиши биофилми бактериявиро нишон надод.Диаграммаи схематикӣ (Расми 3C) шарҳи механизми зидди биологии ифлосшавии маҳлули etching, SHP ва LOIS-ро тавсиф мекунад.Тахмин дар он аст, ки субстрати кандашудаи дорои хосиятҳои гидрофиликӣ нисбат ба субстрати бараҳна майдони сатҳи калонтар хоҳад дошт.Аз ин рӯ, дар субстрати кандашуда часпидашавии бештари бактерияҳо ба амал меояд.Аммо, дар муқоиса бо субстрати бараҳна, субстрати кандашуда дар рӯи замин ба таври назаррас камтар биофилм ба вуҷуд омадааст.Ин дар он аст, ки молекулаҳои об ба сатҳи гидрофилӣ сахт мепайванданд ва ҳамчун равғани молиданӣ барои об амал мекунанд ва ҳамин тавр ба пайвастшавии бактерияҳо дар муддати кӯтоҳ халал мерасонанд (39).Аммо қабати молекулаҳои об хеле тунук буда, дар суспензияҳои бактериявӣ ҳалшаванда аст.Аз ин рӯ, қабати молекулавии об муддати тӯлонӣ нест мешавад, ки ба пайвастшавии васеъ ва паҳншавии бактерияҳо оварда мерасонад.Барои SHP, аз сабаби хосиятҳои кӯтоҳмуддати намнашавандаи он, пайвастшавии бактериявӣ монеъ мешавад.Коҳиши илтиҳоби бактериявӣ метавонад ба ҷайбҳои ҳавоии дар сохтори қабатӣ ҷойгиршуда ва энергияи пасти сатҳи рӯизаминӣ рабт дода шавад, ки ба ин васила тамоси байни суспензияи бактериявӣ ва сатҳи онро кам мекунад.Аммо дар SHP адгезияи васеъи бактериявӣ мушоҳида карда шуд, зеро он муддати тӯлонӣ хосиятҳои зидди ифлосшавии худро гум кардааст.Ин асосан аз сабаби нопадид шудани кисаҳои ҳаво дар натиҷаи фишори гидростатикӣ ва обшавии ҳаво дар об аст.Ин асосан аз сабаби нопадид шудани кисаҳои ҳавоӣ дар натиҷаи обшавӣ ва сохтори қабатӣ, ки майдони васеътари рӯи часпакро таъмин мекунад, вобаста аст (27, 40).Баръакси ин ду субстрат, ки ба устувории дарозмуддат таъсири муҳим доранд, равғани молиданӣ, ки дар LOIS мавҷуд аст, ба сохтори микро/нано ворид карда мешавад ва ҳатто дар муддати тӯлонӣ нест намешавад.Молҳои молиданӣ, ки бо сохторҳои микро/нано пур карда шудаанд, хеле устуворанд ва аз сабаби наздикии баланди кимиёвии худ ба сатҳи сахт ҷалб карда мешаванд ва ба ин васила пайвастагии бактерияҳоро барои муддати тӯлонӣ пешгирӣ мекунанд.Дар расми S6 тасвири микроскопи конфокалии инъикоскунандаи субстрати молиданӣ, ки дар шӯри буферии фосфатӣ (PBS) гузошта шудааст, нишон медиҳад.Тасвирҳои пайваста нишон медиҳанд, ки ҳатто пас аз 120 соати каме ларзиш (120 чархзанӣ) қабати молиданӣ дар LOIS бетағйир боқӣ мемонад, ки устувории дарозмуддатро дар шароити ҷараён нишон медиҳад.Ин аз сабаби наздикии баланди кимиёвӣ байни рӯйпӯши фтор дар асоси SAM ва равғани молиданӣ дар асоси перфторкарбон аст, то қабати устувори молиданӣ ба вуҷуд ояд.Аз ин рӯ, самаранокии зидди ифлосшавӣ нигоҳ дошта мешавад.Илова бар ин, субстрат бар зидди сафедаҳои намояндагӣ (альбумин ва фибриноген), ки дар плазма, ҳуҷайраҳои бо функсияи иммунӣ (макрофагҳо ва фибробластҳо) зич алоқаманданд ва онҳое, ки бо ташаккули устухон алоқаманданд, озмоиш карда шуданд.Мазмуни калсий хеле баланд аст.(Расми 3D, 1 ва 2 ва Расми S7) (41, 42).Илова бар ин, тасвирҳои микроскопи флуоресцентии санҷиши пайвастшавӣ барои фибриноген, альбумин ва калсий хусусиятҳои гуногуни часпидани ҳар як гурӯҳи субстратро нишон доданд (Расми S8).Ҳангоми ташаккули устухон қабатҳои навташкилшудаи устухон ва калсий метавонанд имплантатҳои ортопедиро иҳота кунанд, ки ин на танҳо хориҷ карданро душвор мегардонад, балки дар ҷараёни хориҷшавӣ ба бемор зарари ғайричашмдошт мерасонад.Аз ин рӯ, сатҳи пасти пасандозҳои калсий дар плитаҳои устухонҳо ва бурҳо барои ҷарроҳии ортопедӣ, ки хориҷ кардани имплантатро талаб мекунад, муфид аст.Дар асоси миқдори майдони замимашуда дар асоси шиддатнокии флуоресцентсия ва шумораи ҳуҷайраҳо, мо тасдиқ кардем, ки LOIS дар муқоиса бо дигар субстратҳо барои ҳама моддаҳои биологӣ хосиятҳои аълои зидди биологӣ нишон медиҳад.Тибқи натиҷаҳои таҷрибаҳои in vitro, LOIS-и зидди биологии ифлосшавӣ метавонад ба имплантатҳои ортопедӣ татбиқ карда шавад, ки на танҳо метавонад сироятҳои бактерияҳои биофилмро пешгирӣ кунад, балки инчунин илтиҳоби аз системаи иммунии фаъоли бадан ба вуҷудомадаро коҳиш диҳад.
(A) Тасвирҳои микроскопи флуорессенси ҳар як гурӯҳ (бараҳна, кандакорӣ, SHP ва LOIS) дар суспензияҳои Pseudomonas aeruginosa ва MRSA барои 12 ва 72 соат инкубатсия карда шуданд.(B) Шумораи CFU-и пайвастшудаи Pseudomonas aeruginosa ва MRSA дар сатҳи ҳар як гурӯҳ.(C) Диаграммаи схематикии механизми зидди биологии ифлосшавии кӯтоҳмуддат ва дарозмуддат, SHP ва LOIS.(D) (1) Миқдори фибробластҳои ба ҳар як субстрат часпидашуда ва тасвирҳои микроскопи флуоресцентии ҳуҷайраҳои ба луч ва LOIS часпидашуда.(2) Санҷиши пайвастшавии сафедаҳои марбут ба иммунӣ, альбумин ва калсий, ки дар раванди муолиҷаи устухон иштирок мекунанд (* P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001 ва **** P <0,0001).ns, муҳим нест.
Дар ҳолати фишорҳои консентратсионии ногузир, устувории механикӣ ҳамеша мушкилоти асосӣ барои татбиқи рӯйпӯшҳои зиддифулингӣ буд.Усулҳои анъанавии гели зидди канализатсия ба полимерҳои пасти об ҳалшаванда ва ноустуворӣ асос ёфтаанд.Аз ин рӯ, онҳо одатан дар барномаҳои биотиббӣ ба фишори механикӣ дучор мешаванд.Аз ин рӯ, рӯйпӯшҳои аз ҷиҳати механикӣ устувори зиддифулинг барои барномаҳо ба монанди имплантатсияҳои ортопедӣ мушкилот боқӣ мемонанд (43, 44).Тасвири 4А(1) ду намуди асосии фишорро, ки ба имплантатсияҳои ортопедӣ истифода мешавад, нишон медиҳад, аз ҷумла харошидан (фишори буридан) ва фишурдашавӣ бо тасвири оптикии имплантатҳои осебдидае, ки аз ҷониби фортепс тавлид шудааст.Масалан, вақте ки винт бо мурваттобак мустаҳкам карда мешавад ё вақте ки ҷарроҳ табақи устухонро бо пинцет сахт нигоҳ медорад ва қувваи фишурдашавандаро ба кор мебарад, пласти устухони пластикӣ осеб дида, ҳам дар тарозуи макро ва ҳам микро/нано харошида мешавад (Расми 4А, 2) .Барои санҷидани он, ки оё LOIS-и истеҳсолшуда ба ин осебҳо ҳангоми ҷарроҳии пластикӣ тоб оварда метавонад, наноиндентатсия барои муқоисаи сахтии субстрати бараҳна ва LOIS дар миқёси микро/нано барои омӯзиши хосиятҳои механикии сохтори микро/нано гузаронида шуд (Тасвири 4B).Диаграммаи схематикӣ рафтори гуногуни деформатсияи LOIS-ро аз сабаби мавҷудияти сохторҳои микро/нано нишон медиҳад.Дар асоси натиљањои наноиндентатсия хатти ќувваи љойгирї кашида шуд (расми 4С).Тасвири кабуд субстрати бараҳнаро нишон медиҳад, ки танҳо деформатсияи ночизро нишон медиҳад, тавре ки умқи ҳадди ниҳоии 0,26 мкм дида мешавад.Аз тарафи дигар, афзоиши тадриҷии қувваи наноиндентатсия ва ҷобаҷогузории дар LOIS (каҷи сурх) мушоҳидашуда метавонад нишонаҳои коҳиши хосиятҳои механикиро нишон диҳад, ки дар натиҷа умқи наноиндентатсия 1,61 мкм мешавад.Ин аз он сабаб аст, ки сохтори микро/нано, ки дар LOIS мавҷуд аст, фазои амиқтари пешрафтро барои нӯги наноиндетер таъмин мекунад, бинобар ин деформатсияи он нисбат ба субстрати бараҳна зиёдтар аст.Конста-Гдутос ва дигарон.(45) боварӣ дорад, ки аз сабаби мавҷудияти наноструктураи наноиндентатсия ва ноҳамвории микро/нано ба каҷҳои номунтазами наноиндентатсия оварда мерасонанд.Майдони сояафкан ба каҷи деформатсияи номунтазам, ки ба наноструктура мансуб аст, мувофиқат мекунад, дар ҳоле ки минтақаи сояафкан ба микроструктура мансуб аст.Ин деформатсия метавонад ба микроструктура/наноструктураи равғани молиданӣ осеб расонад ва ба фаъолияти зидди ифлосшавии он таъсири манфӣ расонад.Барои омӯзиши таъсири зарар ба LOIS, ҳангоми ҷарроҳии пластикӣ дар бадан зарари ногузир ба сохторҳои микро/нано такрор карда шуд.Бо истифода аз санҷишҳои адгезияи хун ва сафеда, устувории хосиятҳои зидди биологии LOIS пас аз in vitro муайян карда мешавад (Расми 4D).Як қатор тасвирҳои оптикӣ зарареро, ки дар наздикии сӯрохиҳои ҳар як субстрат рух додаанд, нишон медиҳанд.Барои нишон додани таъсири осеби механикӣ ба қабати зидди биологӣ санҷиши пайвастшавии хун гузаронида шуд (расми 4E).Мисли SHP, хосиятҳои зидди ифлосшавӣ аз сабаби осеб гум мешаванд ва LOIS бо роҳи дафъ кардани хун хосиятҳои аълои зидди ифлосиро нишон медиҳад.Ин аз он сабаб аст, ки энергияи сатҳ тавассути таъсири капиллярӣ, ки майдони вайроншударо фаро мегирад, ҷараён дорад, ки ҷараён дар равғани молидании микросохтор хосиятҳои зидди ифлосшавиро барқарор мекунад (35).Ҳамин тамоюл дар санҷиши пайвастшавии сафедаҳо бо истифода аз альбумин мушоҳида карда шуд.Дар мавзеи зарардида часпидани сафеда дар сатхи SHP ба таври васеъ мушохида карда мешавад ва бо чен кардани фарогирии майдони он онро метавон хамчун нисфи дарачаи часпидани субстрати урён муайян кард.Аз тарафи дигар, LOIS хосиятҳои зидди биологии худро бидуни пайвастшавӣ нигоҳ дошт (Расми 4, F ва G).Илова бар ин, сатҳи винт аксар вақт ба фишори сахти механикӣ, аз қабили пармакунӣ дучор мешавад, аз ин рӯ мо қобилияти пӯшиши LOIS-ро барои бетағйир мондани винт дар vitro омӯхтаем.Тасвири 4H тасвирҳои оптикии иддаоҳои гуногунро нишон медиҳад, аз ҷумла луч, SHP ва LOIS.Росткунҷаи сурх майдони мавриди ҳадафро нишон медиҳад, ки дар он ҳангоми имплантатсияи устухон фишори сахти механикӣ рух медиҳад.Монанди санҷиши пайвастшавии сафедаҳои пластинка, микроскопи флуоресцентӣ барои тасвири пайвастшавии сафедаҳо ва чен кардани майдони фарогирӣ барои исботи якпорчагии рӯйпӯши LOIS, ҳатто дар зери фишори механикии сахт истифода мешавад (Расми 4, I ва J).Бурдҳои бо LOIS коркардшуда самаранокии аълои зидди ифлосшавӣ нишон медиҳанд ва қариб ҳеҷ гуна сафеда ба рӯи он намечаспад.Аз тарафи дигар, пайвастагии сафеда дар винтҳои урён ва винтҳои SHP мушоҳида карда шуд, ки дар он ҷо фарогирии майдони винтҳои SHP аз се як ҳиссаи винтҳои луч буд.Илова бар ин, имплантати ортопедии, ки барои мустаҳкамкунӣ истифода мешавад, бояд аз ҷиҳати механикӣ қавӣ бошад, то ба фишори ба макони шикаста тобовар бошад, тавре ки дар расми 4K нишон дода шудааст.Аз ин рӯ, барои муайян кардани таъсири тағирёбии химиявӣ ба хосиятҳои механикӣ озмоиши печидан гузаронида шуд.Илова бар ин, ин барои нигоҳ доштани фишори собит аз имплантатсия анҷом дода мешавад.Қувваи механикии амудиро то он даме, ки имплант пурра печонида шавад ва каҷи шиддати шиддат ба даст ояд (расми 4L, 1) татбиқ кунед.Ду хосият, аз ҷумла модули Янг ва қувваи каҷӣ байни субстратҳои бараҳна ва LOIS ҳамчун нишондиҳандаи қувваи механикии онҳо муқоиса карда шуданд (Расми 4L, 2 ва 3).Модули ҷавон нишон медиҳад, ки қобилияти мавод ба тағирёбии механикӣ тобовар аст.Модули Янг дар ҳар як субстрат мутаносибан 41,48±1,01 ва 40,06±0,96 ГПа мебошад;фарки мушохидашуда кариб 3,4 фоизро ташкил медихад.Илова бар ин, гузориш дода мешавад, ки қувваи каҷ, ки сахтии маводро муайян мекунад, барои субстрат 102,34±1,51 ГПа ва барои SHP 96,99±0,86 ГПа мебошад.Заминаи бараҳна тақрибан 5,3% баландтар аст.Кам шудани хосиятҳои механикӣ метавонад аз таъсири ночиз ба амал ояд.Дар эффекти ноҳамворӣ, ноҳамвории микро/нано метавонад ҳамчун маҷмӯи рахҳо амал кунад, ки ба консентратсияи фишори маҳаллӣ оварда мерасонад ва ба хосиятҳои механикии имплант таъсир мерасонад (46).Бо вуҷуди ин, дар асоси он, ки сахтии устухони кортикали инсон аз 7,4 то 31,6 GPa аст ва модули ченшудаи LOIS аз устухони кортикали инсон зиёдтар аст (47), LOIS барои дастгирии шикаста ва умумии он кифоя аст. хосиятҳои механикӣ ҳадди ақал бо тағйироти сатҳи.
(A) Диаграммаи схематикии (1) фишори механикие, ки ба имплантат ортопедӣ ҳангоми амалиёт истифода мешавад ва (2) тасвири оптикии имплантат ортопедии вайроншуда.(B) Диаграммаи схематикии андозагирии хосиятҳои нано-механикӣ тавассути наноиндентатсия ва LOIS дар сатҳи луч.(C) Каҷи қувваи ҷобаҷогузории наноиндентатсия аз рӯи луч ва LOIS.(D) Пас аз таҷрибаҳои in vitro, тақлид кардани тасвирҳои оптикии навъҳои гуногуни плитаҳои ортопедӣ (майдони вайроншуда бо росткунҷаи сурх нишон дода шудааст) барои тақлид кардани фишори механикии ҳангоми амалиёт ба вуҷуд омада.(E) Санҷиши адгезияи хун ва (F) санҷиши пайвастшавии сафедаи гурӯҳи пластинҳои ортопедии вайроншуда.(G) Фарогирии майдони сафедаи ба табақ часпидашударо чен кунед.(H) Тасвири оптикии навъҳои гуногуни винтҳои ортопедӣ пас аз таҷрибаи in vitro.(I) Санҷиши пайвастшавии сафедаҳо барои омӯзиши якпорчагии қабатҳои гуногун.(J) Фарогирии майдони сафедаи ба винт часпидашударо чен кунед.(K) Ҳаракати харгӯш барои тавлиди фишори собит дар устухони шикаста пешбинӣ шудааст.(L) (1) Натоиҷи санҷиш ва тасвирҳои оптикиро пеш ва баъд аз хам кардан.Тафовут дар (2) модули Янг ва (3) қувваи каҷ байни имплантат бараҳна ва SHP.Маълумот ҳамчун миёна ± SD (*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 ва ****P<0.0001) ифода карда мешаванд.Аксҳо бо эҳтиром: Кёмин Чае, Донишгоҳи Йонсей.
Дар ҳолатҳои клиникӣ, аксари тамоси бактериявӣ бо маводи биологӣ ва макони захм аз биофилмҳои баркамол ва баркамол пайдо мешаванд (48).Аз ин рӯ, Марказҳои ИМА оид ба назорат ва пешгирии бемориҳо тахмин мезананд, ки 65% тамоми сироятҳои инсон ба бифилмҳо алоқаманданд (49).Дар ин ҳолат, зарур аст, ки тарҳи таҷрибавии in vivo таъмин карда шавад, ки ташаккули пайвастаи биофилмро дар сатҳи имплант таъмин кунад.Аз ин рӯ, мо модели шикастани устухони харгӯшро таҳия кардем, ки дар он имплантатҳои ортопедӣ дар суспензияи бактериявӣ қаблан инкубатсия карда шуда, сипас ба устухонҳои харгӯш барои омӯзиши хосиятҳои зидди ифлосшавии LOIS in vivo имплантатсия карда шуданд.Аз сабаби се далели муҳими зерин, сироятҳои бактериявӣ на аз сӯзандоруи мустақими суспензияҳои бактериявӣ тавассути пеш аз культиватсия ба вуҷуд меоянд: (i) системаи иммунии харгӯшҳо табиатан нисбат ба одамон қавӣ аст;аз ин рӯ, сӯзандоруи суспензияҳои бактериявӣ ва бактерияҳои планктонӣ имконпазир аст Он ба ташаккули биофилмҳо таъсир намекунад.(II) Бактерияҳои планктонӣ ба антибиотикҳо бештар ҳассосанд ва антибиотикҳо одатан пас аз ҷарроҳӣ истифода мешаванд;Ниҳоят, (iii) суспензияи бактерияҳои планктониро бо моеъҳои бадани ҳайвон ҳал кардан мумкин аст (50).Бо пеш аз парвариши имплантатсия дар суспензияи бактериявӣ пеш аз имплантатсия, мо метавонем таъсири зараровари сирояти бактериявӣ ва аксуламали ҷисми бегонаро (FBR) ба раванди муолиҷаи устухон ҳаматарафа омӯзем.Харгӯшҳо 4 ҳафта пас аз имплантатсия қурбонӣ карда шуданд, зеро остеоинтегратсия барои раванди муолиҷаи устухон зарурӣ дар давоми 4 ҳафта анҷом меёбад.Сипас, имплантатҳо аз харгӯшҳо барои омӯзиши поёноб хориҷ карда шуданд.Дар расми 5А механизми паҳншавии бактерияҳо нишон дода шудааст.Имплантатҳои ортопедии сироятшуда ба бадан ворид карда мешаванд.Дар натиҷаи инкубатсияи пеш аз суспензияи бактериявӣ, аз шаш заргӯше, ки бо имплантатсияҳои бараҳна ҷойгир карда шудаанд, шаштоаш сироят ёфт, дар ҳоле ки ҳеҷ кадоме аз харгӯшҳое, ки бо имплантатҳои бо LOIS муолиҷашуда имплантатсия карда шудаанд, сироят наёфтанд.Инфексияҳои бактериявӣ дар се марҳила, аз ҷумла афзоиш, камолот ва парокандашавӣ ҷараён мегиранд (51).Аввалан, бактерияҳои замимашуда дар рӯи замин афзоиш ва афзоиш меёбанд ва баъдан бактерияҳо ҳангоми хориҷ кардани полимери берун аз ҳуҷайра (EPS), амилоид ва ДНК берун аз ҳуҷайра биофилм ташкил медиҳанд.Биофилм на танҳо ба воридшавии антибиотикҳо халал мерасонад, балки инчунин ба ҷамъшавии ферментҳои таназзулкунандаи антибиотикҳо (ба монанди β-лактамаза) мусоидат мекунад (52).Ниҳоят, биофилм бактерияҳои баркамолро ба бофтаҳои атроф паҳн мекунад.Аз ин рӯ, сироят пайдо мешавад.Илова бар ин, вақте ки ҷисми бегона ба бадан ворид мешавад, сирояте, ки метавонад аксуламали қавӣ ба вуҷуд орад, метавонад илтиҳоби шадид, дард ва паст шудани иммунитетро ба вуҷуд орад.Тасвири 5В шарҳи ФБР-ро, ки дар натиҷаи ворид кардани имплантат ортопедӣ ба вуҷуд омадааст, пешниҳод мекунад, на аксуламали иммунии аз сирояти бактериявӣ.Системаи масуният имплантатҳои воридшударо ҳамчун ҷисми бегона эътироф мекунад ва сипас ба ҳуҷайраҳо ва бофтаҳо вокуниш нишон медиҳад, ки ҷисми бегонаро пӯшонад (53).Дар рӯзҳои аввали ФБР дар рӯи имплантатсияҳои ортопедӣ матритсаи таъминкунанда ба вуҷуд омад, ки дар натиҷа адсорбсияи фибриноген ба амал омад.Сипас фибриногени адсорбшуда як шабакаи хеле зиччи фибринро ташкил медиҳад, ки ба пайвастшавии лейкоситҳо мусоидат мекунад (54).Пас аз ташаккули шабакаи фибрин, илтиҳоби шадид аз сабаби воридшавии нейтрофилҳо ба амал меояд.Дар ин марҳила, ситокинҳои гуногун ба монанди омили некрозии варам-α (TNF-α), интерлейкин-4 (IL-4) ва IL-β бароварда мешаванд ва моноситҳо ба макони имплантатсия ворид мешаванд ва ба ҳуҷайраҳои азим фарқ мекунанд.Фаге (41, 55, 56).Паст кардани FBR ҳамеша мушкил буд, зеро FBR аз ҳад зиёд метавонад илтиҳоби шадид ва музминро ба вуҷуд орад, ки метавонад ба мушкилоти марговар оварда расонад.Барои арзёбии таъсири сироятҳои бактериявӣ дар бофтаҳои атрофи имплантат ва LOIS, гематоксилин ва эозин (H&E) ва рангкунии Массон трихром (MT) истифода шуданд.Барои харгӯшҳое, ки бо субстратҳои урён имплантатсия карда шудаанд, сироятҳои шадиди бактериявӣ пеш рафтанд ва слайдҳои бофтаи H&E абсцессҳо ва некрозро, ки аз илтиҳоб ба вуҷуд омадаанд, равшан нишон доданд.Аз тарафи дигар, сатҳи хеле пурқуввати зидди биологии LOIS пайвастагии бактерияҳоро бозмедорад, аз ин рӯ он ҳеҷ гуна аломати сироятро нишон намедиҳад ва илтиҳобро коҳиш медиҳад (Расми 5C).Натиҷаҳои рангкунии МТ ҳамин тамоюлро нишон доданд.Бо вуҷуди ин, рангкунии MT инчунин омоси харгӯшҳоро, ки бо LOIS насб карда шудаанд, нишон дод, ки барқароршавӣ ба амал меояд (Расми 5D).Бо мақсади омӯзиши дараҷаи аксуламали иммунӣ, рангкунии иммуногистохимикӣ (IHC) бо истифода аз ситокинҳои TNF-α ва IL-6, ки ба аксуламали иммунӣ алоқаманданд, гузаронида шуд.Импланти манфии бараҳна, ки ба бактерияҳо дучор нашуда буд, бо LOIS, ки ба бактерияҳо дучор шуда буд, вале сироят накардааст, барои омӯзиши раванди табобат дар сурати набудани сирояти бактериявӣ муқоиса карда шуд.Дар расми 5E тасвири оптикии слайди IHC нишон дода шудааст, ки TNF-α-ро ифода мекунад.Майдони қаҳваранг аксуламали иммуниро ифода мекунад, ки нишон медиҳад, ки аксуламали иммунӣ дар LOIS каме коҳиш ёфтааст.Илова бар ин, ифодаи IL-6 дар LOIS нисбат ба ифодаи манфии бараҳна стерилӣ ба таври назаррас камтар буд (Расми 5F).Ифодаи ситокин бо роҳи чен кардани майдони рангкунии антитело, ки ба ситокин мувофиқ аст, муайян карда шуд (Расми 5G).Дар муқоиса бо харгӯшҳое, ки ба имплантатсияҳои манфӣ дучор шудаанд, сатҳи ифодаи харгӯшҳое, ки бо LOIS имплантатсия карда шудаанд, пасттар буданд ва фарқияти назаррасро нишон доданд.Пастшавии экспрессияи ситокинҳо нишон медиҳад, ки хосиятҳои дарозмуддат ва устувори зидди ифлосшавии LOIS на танҳо ба ҷилавгирӣ аз сироятҳои бактериявӣ, балки ба коҳиши FBR, ки аз ҷониби макрофагҳо ба субстрат часпида мешаванд, алоқаманд аст (53, 57, 58).Аз ин рӯ, вокуниши ками иммунӣ аз сабаби хосиятҳои саркашӣ аз иммунии LOIS метавонад оқибатҳои номатлубро пас аз имплантатсия, ба монанди аксуламали аз ҳад зиёди иммунӣ пас аз ҷарроҳии пластикӣ ҳал кунад.
$A) Диаграммаи схематикии механизми пайдоиш ва пањншавии биофилм дар сатњи имплантатњои ортопедии сироятшуда.eDNA, ДНК берун аз ҳуҷайра.$B) Диаграммаи схематикии аксуламали иммунии пас аз гузоштани имплантат ортопедї.(C) ранг кардани H&E ва (D) MT ранг кардани бофтаҳои атрофи имплантатҳои ортопедӣ бо мусбат ва LOIS.IHC-и ситокинҳои ба иммунӣ алоқаманд (E) TNF-α ва (F) IL-6 тасвирҳои рангшудаи харгӯшҳои бараҳна-манфӣ ва LOIS имплантатсияшуда мебошанд.(G) Миқдори ифодаи ситокинҳо тавассути андозагирии фарогирии минтақа (** P <0,01).
Мутобиқати биологии LOIS ва таъсири он ба раванди муолиҷаи устухон дар vivo бо истифода аз тасвири ташхисӣ [рентген ва микрокомпютерӣ (CT)] ва остеокласт IHC тафтиш карда шуд.Тасвири 6А раванди табобати устухонҳоро бо се марҳилаи гуногун нишон медиҳад: илтиҳоб, таъмир ва азнавсозӣ.Вақте ки шикаста рух медиҳад, ҳуҷайраҳои илтиҳобӣ ва фибробластҳо ба устухони шикаста ворид мешаванд ва ба бофтаи рагҳо сар мекунанд.Дар марҳилаи таъмир, нашъунамои бофтаи рагҳо дар наздикии макони шикаста паҳн мешавад.Бофтаи рагҳо барои ташаккули устухони нав, ки каллус номида мешавад, маводи ғизоӣ медиҳад.Марҳилаи ниҳоии раванди муолиҷаи устухон марҳилаи азнавсозӣ мебошад, ки дар он андозаи каллус бо ёрии афзоиши сатҳи остеокластҳои фаъолшуда ба андозаи устухони муқаррарӣ кам мешавад (59).Таҷдиди сеченака (3D)-и макони шикаста бо истифода аз сканҳои микро-КТ барои мушоҳида кардани фарқият дар сатҳи ташаккули каллус дар ҳар як гурӯҳ анҷом дода шуд.Барои мушоҳида кардани ғафсии каллуси атрофи устухони шикаста буридани устухони устухонро мушоҳида кунед (Расми 6, В ва В).Рентгенҳо инчунин барои тафтиш кардани макони шикастани ҳамаи гурӯҳҳо ҳар ҳафта барои мушоҳидаи равандҳои гуногуни барқароршавии устухон дар ҳар як гурӯҳ истифода мешуданд (Расми S9).Каллус ва устухонҳои баркамол мутаносибан бо кабуд/сабз ва устухони фил нишон дода шудаанд.Аксари бофтаҳои нарм бо ҳадди муқарраршуда филтр карда мешаванд.Бараҳна мусбат ва SHP ташаккули миқдори ками каллусро дар атрофи макони шикаста тасдиқ карданд.Аз тарафи дигар, манфии фошшудаи LOIS ва макони шикаста бо каллуси ғафс иҳота шудааст.Тасвирҳои Micro-CT нишон доданд, ки ташаккули каллус аз ҷониби сирояти бактериявӣ ва илтиҳоби сироятӣ монеъ мешавад.Ин дар он аст, ки системаи масуният ба табобати ҷароҳатҳои септикӣ, ки дар натиҷаи илтиҳоби сироятӣ ба вуҷуд омадаанд, афзалият медиҳад, на барқароршавии устухон (60).Барои мушоҳида кардани фаъолияти остеокласт ва резорбсияи устухон рангкунии IHC ва ба Тартрата тобовар кислотаи фосфатаза (TRAP) анҷом дода шуд (Расми 6D) (61).Дар мусбатҳои бараҳна ва SHP танҳо чанд остеокластҳои фаъолшуда бо рангҳои арғувон пайдо шуданд.Аз тарафи дигар, дар наздикии устухонҳои мусбӣ ва барҷастаи LOIS бисёр остеокластҳои фаъолшуда мушоҳида карда шуданд.Ин падида нишон медиҳад, ки дар ҳузури остеокластҳо, каллус дар атрофи макони шикаста раванди азнавсозии шадидро аз сар мегузаронад (62).Ҳаҷми устухон ва майдони ифодаи остеокласти каллус барои муқоисаи сатҳи ташаккули каллус дар атрофи макони шикаста дар ҳама гурӯҳҳо чен карда шуд, то миқдори сканҳои микро-КТ ва натиҷаҳои IHC (Расми 6E, 1 ва 2).Тавре ки интизор мерафт, манфиҳои бараҳна ва ташаккули каллус дар LOIS нисбат ба гурӯҳҳои дигар ба таври назаррас баландтар буданд, ки нишон медиҳанд, ки таҷдиди мусбии устухон рух додааст (63).Дар расми S10 тасвири оптикии макони ҷарроҳӣ, натиҷаи рангкунии MT дар бофтаи дар наздикии винт ҷамъшуда ва натиҷаи рангкунии TRAP, ки интерфейси винт-устухонро нишон медиҳад.Дар субстрати бараҳна, ташаккули каллуси қавӣ ва фиброз мушоҳида карда шуд, дар ҳоле ки имплантат бо LOIS коркардшуда сатҳи нисбатан часпакро нишон дод.Ба ҳамин монанд, дар муқоиса бо манфиҳои бараҳна, фиброзҳои пасттар дар харгӯшҳое, ки бо LOIS имплантатсия карда шудаанд, мушоҳида карда шуданд, ки бо тирҳои сафед нишон дода шудаанд.Илова бар ин, варами сахт (тирчаи кабуд) метавонад ба хосиятҳои эмгузаронии LOIS рабт дода шавад ва ба ин васила илтиҳоби шадидро коҳиш диҳад.Сатҳи часпак дар атрофи имплант ва камшавии фиброз аз он шаҳодат медиҳад, ки раванди хориҷшавӣ осонтар аст, ки одатан ба дигар шикастаҳо ё илтиҳоб оварда мерасонад.Раванди муолиҷаи устухон пас аз хориҷ кардани винт аз рӯи фаъолияти остеокласт дар интерфейси винт-устухон арзёбӣ шуд.Ҳам устухони бараҳна ва ҳам интерфейси имплантатсияи LOIS сатҳҳои шабеҳи остеокластҳоро барои табобати минбаъдаи устухон ҷаббида карданд, ки ин нишон медиҳад, ки қабати LOIS ба табобати устухон ё аксуламали иммунӣ таъсири манфӣ надорад.Барои тасдиқ кардани он, ки тағирёбии сатҳи дар LOIS анҷом додашуда ба раванди муолиҷаи устухон халал намерасонад, ташхиси рентгенӣ барои муқоисаи табобати устухони харгӯшҳо бо ионҳои манфии фошшуда ва 6 ҳафтаи имплантатсияи LOIS истифода шуд (Расми 6F).Натиҷаҳо нишон доданд, ки дар муқоиса бо гурӯҳи мусбати бараҳнаи сироятнашуда, LOIS дараҷаи якхелаи шифоёбии устухонҳоро нишон дод ва дар ҳарду гурӯҳ аломатҳои равшани шикастан (хати остеолизии доимӣ) вуҷуд надоштанд.
$A) Диаграммаи схематикии чараёни муоличаи устухон баъди шикастан.$B) Фарќияти дараљаи ташаккули каллуси њар як гурўњи сатњ ва (C) тасвири буриши мавзеи шикаста.(D) ранг кардани TRAP барои визуализатсияи фаъолияти остеокласт ва резорбсияи устухон.Дар асоси фаъолияти TRAP, ташаккули каллуси берунии устухони кортикалӣ аз ҷониби (E) (1) микро-CT ва (2) фаъолияти остеокласт ба таври миқдорӣ таҳлил карда шуд.(F) 6 ҳафтаи пас аз имплантатсия, тасвирҳои рентгении устухони шикастаи манфии фошшуда (бо росткунҷаи рахи сурх таъкид карда мешавад) ва LOIS (бо росткунҷаи кабуди кабуд таъкид карда мешавад).Таҳлили оморӣ тавассути таҳлили яктарафаи дисперсия (ANOVA) анҷом дода шуд.* Р <0,05.** Р <0,01.
Хулоса, LOIS як намуди нави стратегияи сирояти антибактериалӣ ва қабати фирор аз иммуниро барои имплантатсияҳои ортопедӣ таъмин мекунад.Имплантатҳои муқаррарии ортопедӣ бо функсияи SHP хосиятҳои зидди биологии кӯтоҳмуддатро нишон медиҳанд, аммо хосиятҳои худро барои муддати тӯлонӣ нигоҳ дошта наметавонанд.Супергидрофобияи субстрат футурҳои ҳаворо байни бактерияҳо ва субстрат нигоҳ медорад ва ба ин васила ҷайбҳои ҳаворо ташкил медиҳад ва ба ин васила сирояти бактериявиро пешгирӣ мекунад.Аммо аз сабаби паҳншавии ҳаво, ин кисаҳои ҳавоӣ ба осонӣ хориҷ карда мешаванд.Аз тарафи дигар, LOIS қобилияти худро барои пешгирии сироятҳои марбут ба биофилм собит кардааст.Аз ин рӯ, аз сабаби хосиятҳои зидди рад кардани қабати молидан ба сатҳи сохтори қабати микро/нано, илтиҳоби марбут ба сироятро пешгирӣ кардан мумкин аст.Усулҳои гуногуни тавсиф, аз ҷумла андозагирии SEM, AFM, XPS ва CA барои оптимизатсияи шароити истеҳсолии LOIS истифода мешаванд.Илова бар ин, LOIS инчунин метавонад ба маводҳои гуногуни биологӣ, ки одатан дар таҷҳизоти ортопедӣ истифода мешаванд, ба монанди PLGA, Ti, PE, POM ва PPSU татбиқ карда шаванд.Сипас, LOIS дар in vitro озмоиш карда шуд, то хосиятҳои зидди биологии худро бар зидди бактерияҳо ва моддаҳои биологии марбут ба аксуламали иммунӣ исбот кунад.Натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки он дар муқоиса бо имплантат бараҳна таъсири аълои антибактериалӣ ва зидди биологӣ дорад.Илова бар ин, LOIS қувваи механикиро ҳатто пас аз татбиқи фишори механикӣ нишон медиҳад, ки дар ҷарроҳии пластикӣ ногузир аст.Аз сабаби хосиятҳои худтабобати равғани молиданӣ дар сатҳи сохтори микро/нано, LOIS хосиятҳои зидди биологии ифлосшавии худро бомуваффақият нигоҳ дошт.Барои омӯхтани хосиятҳои биологӣ ва антибактериалии LOIS in vivo, LOIS ба устухони харгӯш дар тӯли 4 ҳафта имплантатсия карда шуд.Дар харгӯшҳое, ки бо LOIS имплантатсия карда шудаанд, сирояти бактериявӣ мушоҳида нашудааст.Илова бар ин, истифодаи IHC сатҳи пасти вокуниши иммунии маҳаллиро нишон дод, ки LOIS раванди муолиҷаи устухонҳоро бозмедорад.LOIS хосиятҳои хуби зиддибактериявӣ ва эмгузарониро нишон медиҳад ва собит шудааст, ки пеш аз ва ҳангоми ҷарроҳии ортопедӣ, махсусан барои синтези устухон, ташаккули биофилмро самаранок пешгирӣ мекунад.Бо истифода аз модели шикастани илтиҳоби устухони устухони заргӯш, таъсири сироятҳои марбут ба биофилм ба раванди муолиҷаи устухон, ки тавассути имплантатҳои қаблан инкубатсияшуда ба вуҷуд омадаанд, амиқ омӯхта шуд.Ҳамчун омӯзиши оянда, модели нави in vivo барои омӯзиши сироятҳои эҳтимолӣ пас аз имплантатсия барои пурра фаҳмидан ва пешгирии сироятҳои марбут ба биофилм дар давоми тамоми раванди табобат зарур аст.Илова бар ин, остеиндуксия то ҳол мушкилоти ҳалнашуда дар ҳамгироӣ бо LOIS мебошад.Тадқиқоти иловагӣ барои якҷоя кардани адгезияи интихобшудаи ҳуҷайраҳои остеоиндуктивӣ ё тибби барқароршаванда бо LOIS барои бартараф кардани мушкилот лозим аст.Дар маҷмӯъ, LOIS як қабати имплантатсияи ортопедиро бо устувории механикӣ ва хосиятҳои аълои зидди биологӣ муаррифӣ мекунад, ки метавонад SSI ва таъсири манфии иммуниро коҳиш диҳад.
Субстрати 15mm x 15mm x 1mm 304 SS (Dong Kang M-Tech Co., Корея) дар оби ацетон, EtOH ва DI барои 15 дақиқа барои тоза кардани ифлоскунандаҳо бишӯед.Барои ташаккул додани сохтори микро/нано-сатҳи рӯи рӯи замин, субстрати тозашуда дар маҳлули HF аз 48% то 51% (DUKSAN Corp., Кореяи Ҷанубӣ) дар ҳарорати 50 ° C ғарқ карда мешавад.Вақти пошидан аз 0 то 60 дақиқа фарқ мекунад.Сипас, субстрати кандашуда бо оби деионизатсияшуда тоза карда шуд ва дар маҳлули 65% HNO3 (Korea DUKSAN Corp.) дар 50 ° C барои 30 дақиқа ҷойгир карда шуд, то дар рӯи рӯи он қабати пассиватсияи оксиди хром ба вуҷуд ояд.Пас аз пассиватсия, субстрат бо оби деионизатсияшуда шуста мешавад ва барои ба даст овардани субстрат бо сохтори қабатӣ хушк мешавад.Баъдан, субстрат ба плазмаи оксиген (100 Вт, 3 дақиқа) дучор карда шуд ва фавран дар маҳлули 8,88 мм POTS (Сигма-Алдрих, Олмон) дар толуол дар ҳарорати хонагӣ барои 12 соат таъмид карда шуд.Сипас, субстрате, ки бо POTS пӯшонида шудааст, бо EtOH тоза карда шуд ва дар 150 ° C барои 2 соат барои ба даст овардани POTS SAM зиччи гарм карда шуд.Пас аз пӯшонидани SAM, қабати молиданӣ дар рӯи замин тавассути истифодаи равғани перфторполиэтерӣ (Krytox 101; DuPont, ИМА) бо ҳаҷми боркунии 20 мкм/см 2 ба вуҷуд омад. Пеш аз истифода равғани молиданро тавассути филтри 0,2 микрон филтр кунед.Равғани молиданро бо кунҷи 45° барои 15 дақиқа кашед.Ҳамин тартиби истеҳсолӣ барои имплантатҳои ортопедии аз 304 SS сохташуда истифода шудааст (плиткаи қулфкунӣ ва винти қулфи кортикалӣ; Dong Kang M-Tech Co., Корея).Ҳама имплантатҳои ортопедӣ барои мувофиқ кардани геометрияи устухони харгӯш тарҳрезӣ шудаанд.
Морфологияи рӯизаминии субстрат ва имплантатҳои ортопедӣ тавассути партовҳои саҳроии SEM (Inspect F50, FEI, ИМА) ва AFM (XE-100, Park Systems, Кореяи Ҷанубӣ) тафтиш карда шуд.Ноҳамвории сатҳ (Ra, Rq) бо роҳи зарб кардани майдони 20 мкм ба 20 мкм (n=4) чен карда мешавад.Барои таҳлили таркиби кимиёвии рӯизаминӣ системаи XPS (PHI 5000 VersaProbe, ULVAC PHI, Ҷопон) истифода шуд, ки бо манбаи рентгении Al Ka ​​бо андозаи нуқта 100μm2 муҷаҳҳаз шудааст.Барои чен кардани CA ва SA як системаи андозагирии CA, ки бо камераи динамикии аксбардорӣ муҷаҳҳаз шудааст (SmartDrop, FEMTOBIOMED, ​​Кореяи Ҷанубӣ) истифода шудааст.Барои ҳар як андозагирӣ, аз 6 то 10 мкл қатраҳо (оби деионизатсияшуда, хуни асп, EG, 30% этанол ва HD) барои чен кардани CA дар рӯи замин ҷойгир карда мешаванд.Вақте ки кунҷи майли субстрат бо суръати 2°/с зиёд мешавад (n = 4), SA ҳангоми афтидани қатра чен карда мешавад.
Pseudomonas aeruginosa [Маҷмӯаи фарҳанги навъи амрикоӣ (ATCC) 27853] ва MRSA (ATCC 25923) аз ATCC (Манасас, Вирҷиния, ИМА) харида шуданд ва фарҳанги захира дар -80°C нигоҳ дошта шуд.Пеш аз истифода, фарҳанги яхкардашуда дар шўрбои лӯбиёи трипсин обшуда (Комед, Корея) дар ҳарорати 37 ° C барои 18 соат инкубатсия карда шуд ва сипас барои фаъол кардани он ду маротиба интиқол дода шуд.Пас аз инкубатсия, фарҳанг дар 10,000 rpm барои 10 дақиқа дар 4 ° C центрифуга карда шуд ва ду маротиба бо маҳлули PBS (pH 7.3) шуста шуд.Пас аз он, фарҳанги центрифугашуда дар лавҳаҳои агар хун (BAP) зери фарҳанг карда мешавад.MRSA ва Pseudomonas aeruginosa як шабонарӯз омода карда шуда, дар шўрбои Лурия-Бертани парвариш карда шуданд.Консентратсияи Pseudomonas aeruginosa ва MRSA дар инкулят аз ҷониби CFU суспензия дар ҳалкунии пайдарпай дар агар ба таври миқдорӣ муайян карда шуд.Сипас, консентратсияи бактерияҳоро ба стандарти 0,5 Макфарланд танзим кунед, ки ба 108 CFU/мл баробар аст.Сипас суспензияи бактериявии коркунандаро 100 маротиба то 106 CFU/мл маҳлул кунед.Барои санҷидани хосиятҳои адгезияи зиддибактериалӣ, субстрат дар 121°C барои 15 дақиқа пеш аз истифода стерилизатсия карда шуд.Пас аз он, субстрат ба 25 мл суспензияи бактериявӣ гузаронида шуд ва дар 37 ° C бо ларзиши шадид (200 чархзанӣ) барои 12 ва 72 соат инкубатсия карда шуд.Пас аз инкубатсия, ҳар як субстрат аз инкубатор хориҷ карда шуд ва 3 маротиба бо PBS шуста шуд, то ҳама гуна бактерияҳои шинокунанда дар рӯи замин хориҷ карда шаванд.Барои мушоҳида кардани биофилм дар субстрат, биофилм бо метанол мустаҳкам карда шуд ва бо 1 мл афлесуни кримидин барои 2 дақиқа ранг карда шуд.Пас аз он микроскопи флуоресцентӣ (BX51TR, Olympus, Ҷопон) барои гирифтани аксҳои биофилми рангшуда истифода шуд.Барои муайян кардани миқдори биофилм дар субстрат, ҳуҷайраҳои замимашуда аз субстрат бо усули vortex bead ҷудо карда шуданд, ки ин усули мувофиқтарин барои нест кардани бактерияҳои замимашуда ҳисобида мешуд (n = 4).Бо истифода аз маҳлулҳои безарар, субстратро аз муҳити афзоиш хориҷ кунед ва плитаи чоҳро ламс кунед, то моеъи зиёдатиро хориҷ кунед.Ҳуҷайраҳои фуҷур замимашуда бо шустани ду маротиба бо PBS хушкида хориҷ карда шуданд.Пас аз он ҳар як субстрат ба найчаи озмоишии безарар гузаронида шуд, ки дорои 9 мл намакҳои 0,1% сафедаи эпт (PSW) ва 2 г аз 20 то 25 маҳтоби шишагини безарар (диаметри 0,4 то 0,5 мм) мебошад.Пас аз он барои 3 дақиқа гирдоб карда шуд, то ҳуҷайраҳоро аз намуна ҷудо кунад.Пас аз гардиш, суспензия 10 маротиба бо 0,1% PSW омехта карда шуд ва сипас 0,1 мл ҳар як ҳалкунанда ба BAP эм карда шуд.Пас аз 24 соати инкубатсия дар 37 ° C, CFU дастӣ ҳисоб карда шуд.
Барои ҳуҷайраҳо фибробластҳои муш NIH/3T3 (CRL-1658; American ATCC) ва макрофагҳои муш RAW 264.7 (TIB-71; American ATCC) истифода шуданд.Барои парвариши фибробластҳои муш аз миёнарави тағирёфтаи Eagle Dulbecco (DMEM; LM001-05, Welgene, Корея) истифода баред ва бо 10% хунобаи гӯсола (S103-01, Welgene) ва 1% пенициллин-стрептомицин (PS; LS202-02, Welgene (Welgene) илова кунед. DMEM-ро барои парвариши макрофагҳои муш, ки бо 10% хунобаи гови ҳомила (S001-01, Welgene) ва 1% PS илова карда шудааст, истифода баред, субстратро дар табақи фарҳанги шаш-чоҳ ҷойгир кунед, ва ҳуҷайраҳоро дар 105 ҳуҷайра/см2 пошед. Ҳуҷайраҳо дар як шабонарӯз дар 37 ° C ва 5% CO2 инкубатор карда шуданд, ки ҳуҷайраҳо бо 4% параформальдегид барои 20 дақиқа собит карда шуданд ва дар 0,5% Triton X Incurate барои 5 дақиқа дар -100 ҷойгир карда шуданд дар 37°C барои 30 дақиқа Пас аз раванди инкубатсия, субстратро бо 4′,6-диамин-2-фенилиндол (H -1200, Vector Laboratories, UK) VECTASHIELD (n = 4 барои як ҳуҷайра) истифода баред , fluorescein, fluorescein isothiocyanate-albumin (A9771, Sigma-Aldrich, Олмон) ва плазмаи инсон Фибриноген-конъюгатшудаи Alexa Fluor 488 (F13191, Invitrogen, ИМА) дар PBS (10 mM, pH7) гудохта шуд.Консентратсияи альбумин ва фибриноген мутаносибан 1 ва 150 мкг/мл буд.Баъд аз субстрат Пеш аз таъмид дар маҳлули сафеда, онҳоро бо PBS дањонро барои rehydrate рӯи.Сипас ҳамаи субстратҳоро ба табақи шашчоҳӣ, ки дорои маҳлули сафеда мебошад, ғӯтонед ва дар ҳарорати 37°С барои 30 ва 90 дақиқа инкубатсия кунед.Пас аз инкубатсия, субстрат аз маҳлули сафеда хориҷ карда шуд, бо нармӣ бо PBS 3 маротиба шуста шуд ва бо 4% параформальдегид (n = 4 барои ҳар як сафеда) мустаҳкам карда шуд.Барои калсий, хлориди натрий (0,21 М) ва фосфати калий (3,77 мМ)) дар оби деионизатсияшуда ҳал карда шуд.РН маҳлул бо илова кардани маҳлули гидрохлорид (1М) ба 2,0 тасҳеҳ карда шуд.Баъд хлориди калсий (5,62 мм) дар махлул гудохта шуд.Бо илова кардани 1M tris(hydroxymetyl)-aminoMetan рН маҳлулро ба 7,4 танзим мекунад.Ҳама субстратҳоро ба табақи шашчоҳи пур аз маҳлули фосфати 1,5× калсий гузоред ва пас аз 30 дақиқа аз маҳлул хориҷ кунед.Барои ранг кардан, 2 г Alizarin Red S (CI 58005) бо 100 мл оби деионизатсияшуда омехта кунед.Сипас, 10% гидроксиди аммонийро барои танзими рН ба 4 истифода баред. Субстратро бо маҳлули Ализарин Сурх барои 5 дақиқа ранг кунед ва сипас рангҳои зиёдатиро ҷунбонда, доғ кунед.Пас аз раванди ларзиш, субстратро хориҷ кунед.Маводро хушк мекунанд, баъд дар ацетон 5 дакика меандозанд, баъд дар махлули ацетон-ксилол (1:1) 5 дакика меандозанд ва дар охир бо ксилол (n = 4) шуста мешаванд.Микроскопи флуоресцентӣ (Axio Imager) бо линзаҳои объективии ×10 ва ×20 истифода мешавад..A2m, Zeiss, Олмон) ҳама субстратҳоро тасвир мекунанд.ImageJ/FIJI (https://imagej.nih.gov/ij/) барои муайян кардани миқдори маълумоти адгезияи моддаҳои биологӣ дар ҳар як гурӯҳи чаҳор минтақаи гуногуни тасвир истифода шудааст.Ҳама тасвирҳоро ба тасвирҳои дуӣ бо ҳадди муқарраршуда барои муқоисаи субстрат табдил диҳед.
Микроскопи конфокалии Zeiss LSM 700 барои назорат кардани устувории қабати молиданӣ дар PBS дар реҷаи инъикос истифода шуд.Намунаи шишаи бо қабати молидани сӯзандоруи фторӣ асосёфта дар маҳлули PBS ғарқ карда шуд ва бо истифода аз ларзиши орбиталӣ (SHO-1D; Daihan Scientific, Кореяи Ҷанубӣ) дар шароити ларзиши ҳалим (120 чархзанӣ) озмуда шуд.Сипас намуна гиред ва талафоти равғанро тавассути чен кардани талафоти нури инъикосшуда назорат кунед.Барои ба даст овардани тасвирҳои флуоресцентӣ дар ҳолати инъикос, намуна ба лазери 633 нм дучор мешавад ва сипас ҷамъоварӣ карда мешавад, зеро нур аз намуна бармегардад.Намунаҳо дар фосилаи вақти 0, 30, 60 ва 120 соат чен карда шуданд.
Барои муайян кардани таъсири раванди тағир додани сатҳ ба хосиятҳои наномеханикии имплантатсияҳои ортопедӣ, як наноиндентер (TI 950 TriboIndenter, Hysitron, ИМА) барои чен кардани наноиндедион, ки бо нӯги алмоси пирамидаи сетарафаи Беркович муҷаҳҳаз шудааст, истифода шуд.Сарбории баландтарин 10 мН ва майдони 100μmx 100μm аст.Барои ҳама ченакҳо вақти боркунӣ ва борфарорӣ 10 сония ва вақти нигоҳдорӣ дар зери сарбории авҷи гиреҳ 2 сония аст.Аз панҷ макони гуногун андозагирӣ кунед ва ҳисоби миёна гиред.Барои баҳодиҳии қобилияти механикӣ дар зери сарборӣ, бо истифода аз мошини универсалии озмоишӣ (Instron 5966, Instron, ИМА) озмоиши кундалии се нуқта гузаронида шуд.Субстрат бо суръати доимии 10 Н/с бо сарбории зиёд фишурда мешавад.Барномаи нармафзори универсалии Bluehill (n = 3) барои ҳисоб кардани модули флексия ва фишори максималии фишурда истифода шудааст.
Барои тақлид кардани раванди амалиёт ва зарари механикии марбут ба ҳангоми амалиёт, раванди амалиёт дар vitro гузаронида шуд.Сумҳои рон аз харгӯшҳои сафеди Зеландияи Нав ба қатл расонида шуда буданд.Дар давоми 1 ҳафта, устухони рон дар 4% параформальдегид тоза карда шуд.Тавре ки дар усули озмоиши ҳайвонот тавсиф карда шудааст, устухони собит ҷарроҳӣ карда шуд.Пас аз ҷарроҳӣ, имплантатҳои ортопедӣ дар хун (хуни асп, KISAN, Корея) дар тӯли 10 сония ғарқ карда шуданд, то тасдиқ кунад, ки оё илтиҳоби хун пас аз татбиқи осеби механикӣ рух додааст (n = 3).
Ҳамагӣ 24 харгӯшҳои сафедпӯсти Зеландияи Нав (вазнаш аз 3,0 то 3,5 кг, синну соли миёна 6 моҳа) ба таври тасодуфӣ ба чор гурӯҳ тақсим шуданд: манфии бараҳна, мусбати бараҳна, SHP ва LOIS.Ҳама расмиёти марбут ба ҳайвонот мувофиқи стандартҳои ахлоқии Кумитаи нигоҳубин ва истифодабарии ҳайвонот (IACUC тасдиқ, KOREA-2017-0159) анҷом дода шуданд.Имплантоти ортопедӣ аз як лавҳаи қулфкунанда бо панҷ сӯрохӣ (дарозӣ 41 мм, бараш 7 мм ва ғафсӣ 2 мм) ва винтҳои қулфи кортикалӣ (дарозӣ 12 мм, диаметри 2,7 мм) барои мустаҳкам кардани шикаста иборат аст.Ба истиснои он плитаҳо ва винтҳое, ки дар гурӯҳи бараҳна-манфӣ истифода мешаванд, ҳама плитаҳо ва винтҳо дар суспензияи MRSA (106 CFU/мл) барои 12 соат инкубатсия карда шуданд.Гурӯҳи бараҳна-манфӣ (n = 6) бо имплантатсияҳои рӯи бараҳна бидуни таъсири суспензияи бактериявӣ ҳамчун назорати манфӣ барои сироят табобат карда шуд.Гурӯҳи мусбии бараҳна (n = 6) бо имплантатҳои рӯи луч, ки ба бактерияҳо ҳамчун назорати мусбӣ барои сироят дучор шудаанд, муносибат карда шуд.Гурӯҳи SHP (n = 6) бо имплантатсияҳои бактериявии SHP табобат карда шуд.Ниҳоят, гурӯҳи LOIS бо имплантатҳои бактериявии LOIS табобат карда шуд (n = 6).Хамаи хайвонот дар кафас нигох дошта шуда, бисьёр хурок ва об дода мешавад.Пеш аз амалиёт харгушхо 12 соат руза доштанд.Ҳайвонот тавассути сӯзандоруи дохили мушакҳои ксилазин (5 мг/кг) ва сӯзандоруи дохиливаридии паклитаксел (3 мг/кг) барои индуксия наркоз карда шуданд.Пас аз он, 2% изофлуран ва 50% то 70% оксигени тиббиро (суръати ҷараёни 2 л/дақ) тавассути системаи нафаскашӣ барои нигоҳ доштани анестезия интиқол диҳед.Он тавассути равиши мустақим ба устухони паҳлӯӣ имплантатсия карда мешавад.Пас аз гирифтани мӯй ва безараргардонии повидон-йод аз пӯст дар беруни устухони миёнаи чап буридани дарозии тақрибан 6 см гузаронида шуд.Бо кушодани фосилаи байни мушакҳои устухони рон, устухон пурра кушода мешавад.Плитаро дар назди чоҳи устухон ҷойгир кунед ва онро бо чор винт мустаҳкам кунед.Пас аз васл кардан, бо истифода аз арра (ғафсӣ 1 мм) дар майдони байни сӯрохи дуюм ва сӯрохи чорум ба таври сунъӣ шикаста эҷод кунед.Баъди анҷоми ҷарроҳӣ захмро бо намак шуста, бо дарз бастаанд.Ба ҳар як харгӯш ба зери пӯст энрофлоксацин (5 мг/кг) пошида шуд, ки дар сеяки намак маҳлул карда шудааст.Рентгени пас аз ҷарроҳии устухони устухон дар ҳама ҳайвонот (0, 7, 14, 21, 28 ва 42 рӯз) барои тасдиқи остеотомияи устухон гирифта шуд.Пас аз анестезияи амиқ, ҳама ҳайвонҳо тавассути воридкунии KCl (2 ммоль / кг) дар рӯзҳои 28 ва 42 кушта шуданд.Пас аз қатл, устухони устухон тавассути микро-КТ барои мушоҳида ва муқоисаи раванди муолиҷаи устухон ва ташаккули устухони нав байни чаҳор гурӯҳ скан карда шуд.
Пас аз иҷроиш, бофтаҳои нарм, ки бевосита бо имплантатҳои ортопедӣ дар тамос буданд, ҷамъ карда шуданд.Матоъ дар формалини буферии 10% бетараф як шабонарӯз муқаррар карда шуд ва сипас дар EtOH хушк карда шуд.Бофтаи хушкшуда дар парафин ҷойгир карда шуд ва бо ғафсии 40 мкм бо истифода аз микротом (400CS; EXAKT, Олмон) тақсим карда шуд.Барои дидани сироят, рангкунии H&E ва рангкунии MT гузаронида шуд.Барои санҷидани вокуниши мизбон, бофтаи ҷудошуда бо антиденои ибтидоии харгӯш зидди TNF-α (AB6671, Abcam, ИМА) ва харгӯш зидди IL-6 (AB6672; Abcam, ИМА) инкубатсия карда шуд ва сипас бо хрен коркард карда шуд.Оксидаза.Мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда системаи рангкунии комплекси avidin-biotin (ABC) ба қисмҳо татбиқ кунед.Барои он ки ҳамчун маҳсулоти реаксияи қаҳваранг пайдо шавад, 3,3-диаминобензидин дар ҳама қисмҳо истифода шуд.Сканери рақамии слайд (Pannoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Маҷористон) барои визуалии ҳамаи буридаҳо истифода шуд ва ҳадди аққал чаҳор субстрат дар ҳар гурӯҳ тавассути нармафзори ImageJ таҳлил карда шуд.
Тасвирҳои рентгенӣ дар ҳама ҳайвонҳо пас аз ҷарроҳӣ ва ҳар ҳафта барои назорат кардани шифоёбии шикаста гирифта шуданд (n = 6 дар як гурӯҳ).Пас аз иҷроиш, micro-CT-и баландсифат барои ҳисоб кардани ташаккули каллус дар атрофи устухон пас аз табобат истифода шуд.Растани ба даст овардашударо тоза карда, дар параформальдегиди 4% дар давоми 3 рӯз мустаҳкам карда, дар 75% этанол хушк карда шуд.Пас аз он устухонҳои хушкшуда бо истифода аз микро-КТ (SkyScan 1173, Brooke Micro-CT, Kandy, Белгия) барои тавлиди тасвирҳои вокселҳои 3D (2240 ​​× 2240 пиксел) аз намунаи устухон скан карда шуданд.Барои кам кардани садои сигнал филтри 1,0 мм Al-ро истифода баред ва ба ҳама сканҳо ҳалли баландро татбиқ кунед (E = 133 кВп, I = 60 мкА, вақти ҳамгироӣ = 500 мс).Нармафзори Nrecon (версияи 1.6.9.8, Bruker microCT, Kontich, Белгия) барои тавлиди ҳаҷми 3D намунаи сканшуда аз проексияи паҳлӯии 2D гирифташуда истифода шуд.Барои таҳлил, тасвири аз нав сохташудаи 3D мувофиқи макони шикаста ба кубҳои 10 мм × 10 мм × 10 мм тақсим карда мешавад.Каллусро берун аз устухони кортикалӣ ҳисоб кунед.Нармафзори DataViewer (версияи 1.5.1.2; Bruker microCT, Kontich, Belgium) барои ба таври рақамӣ равона кардани ҳаҷми устухони сканшуда ва барои таҳлил нармафзори CT-Analyzer (версияи 1.14.4.1; Bruker microCT, Kontich, Belgium) истифода шудааст.Коэффисиентҳои нисбии ҷабби рентгенӣ дар устухон ва каллуси баркамол аз рӯи зичии онҳо фарқ мекунанд ва сипас ҳаҷми каллус миқдори муайян карда мешавад (n = 4).Барои тасдиқи он, ки мутобиқати биологии LOIS раванди муолиҷаи устухонҳоро таъхир намекунад, дар ду харгӯш таҳлили иловагии рентгенӣ ва микро-КТ гузаронида шуд: гурӯҳҳои бараҳна-манфӣ ва LOIS.Ҳарду гурӯҳ дар ҳафтаи 6-ум ба қатл расонида шуданд.
Сумҳои рони ҳайвонҳои қурбонӣ ҷамъоварӣ карда шуда, дар давоми 3 рӯз дар параформальдегиди 4% маҳкам карда шуданд.Пас аз устухони ортопедӣ бодиққат аз устухон хориҷ карда мешавад.Муддати 21 рӯз бо истифода аз 0,5 М EDTA (EC-900, Корпоратсияи Миллии Диагностикӣ) устухони устухон декалсификатсия карда шуд.Сипас устухони декалсификатсияшуда дар EtOH таъмид карда шуд, то он хушк шавад.Дар ксилоли устухони хушкшуда хориҷ карда шуд ва дар парафин ҷойгир карда шуд.Сипас намуна бо микротомаи автоматии гардишгар (Leica RM2255, Leica Biosystems, Олмон) бо ғафсии 3 мкм бурида шуд.Барои ранг кардани TRAP (F6760, Sigma-Oldrich, Олмон) намунаҳои ҷудошуда депарафинизатсия карда шуданд, регидрат карда шуданд ва дар реагенти TRAP дар 37°C барои 1 соат инкубатсия карда шуданд.Тасвирҳо тавассути сканери слайд (Pannoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Маҷористон) ба даст оварда шуданд ва тавассути чен кардани фарогирии минтақаи оғушташуда миқдорашон муайян карда шуд.Дар ҳар як озмоиш, ҳадди аққал чаҳор субстрат дар ҳар як гурӯҳ тавассути нармафзори ImageJ таҳлил карда шуданд.
Таҳлили аҳамияти оморӣ бо истифода аз GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., ИМА) анҷом дода шуд.Барои санҷидани фарқияти байни гурӯҳҳои арзёбӣ t-санҷиши ҷудонашаванда ва таҳлили яктарафаи дисперсия (ANOVA) истифода шудааст.Дараҷаи аҳамиятнокӣ дар расм чунин нишон дода шудааст: *P<0,05, **P<0,01, ***P<0,001 ва ****P<0,0001;NS, фарқияти назаррас нест.
Барои маводи иловагӣ барои ин мақола, лутфан нигаред ба http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/44/eabb0025/DC1
Ин мақолаи дастрасии кушодаест, ки тибқи шартҳои литсензияи Creative Commons Attribution-Non-Commons паҳн карда мешавад, ки имкон медиҳад, ки истифода, паҳн ва дубора тавлид дар ҳама гуна васоити ахбори омма, ба шарте ки истифода ба манфиати тиҷоратӣ набошад ва асос ин аст, ки асл кор дуруст аст.Истинод.
Эзоҳ: Мо танҳо аз шумо хоҳиш мекунем, ки суроғаи почтаи электрониро пешниҳод кунед, то шахсе, ки шумо ба саҳифа тавсия медиҳед, бидонад, ки шумо мехоҳед паёми электрониро бубинед ва почтаи электронӣ спам нест.Мо ягон суроғаи почтаи электрониро сабт намекунем.
Ин савол барои санҷидани он, ки оё шумо меҳмони инсон ҳастед ва пешгирӣ кардани ирсоли спамҳои худкор истифода мешавад.
Чо Кён Мин, О Янг Чанг, Пак Ҷун Ҷун, Ли Ҷин Ҳюк, Ким Хён Чеол, Ли Кён Мун, Ли Чанг Кю, Ли Ён Тэк, Ли Сан Ук, Чон Моруи
Қабати антибактериалӣ ва иммунии имплантатҳои ортопедӣ метавонад сироятҳо ва аксуламалҳои иммунии аз сироятҳо ба вуҷудомадаро коҳиш диҳад.
Чо Кён Мин, О Янг Чанг, Пак Ҷун Ҷун, Ли Ҷин Ҳюк, Ким Хён Чеол, Ли Кён Мун, Ли Чанг Кю, Ли Ён Тэк, Ли Сан Ук, Чон Моруи
Қабати антибактериалӣ ва иммунии имплантатҳои ортопедӣ метавонад сироятҳо ва аксуламалҳои иммунии аз сироятҳо ба вуҷудомадаро коҳиш диҳад.
© 2021 Ассотсиатсияи Амрико оид ба пешрафти илм.ҳамаи ҳуқуқ маҳфуз аст.AAAS шарики HINARI, AGORA, OARE, CHORUS, CLOCKSS, CrossRef ва COUNTER мебошад.Advances Science ISSN 2375-2548.