எலும்பியல் உள்வைப்பு அறுவை சிகிச்சைக்கு உட்படுத்தப்பட்ட நோயாளிகளுக்கு, பாக்டீரியா தொற்றுகள் மற்றும் தொற்றுநோயால் தூண்டப்பட்ட நோயெதிர்ப்பு மறுமொழிகள் எப்போதும் உயிருக்கு ஆபத்தான அபாயங்களாக உள்ளன.வழக்கமான உயிரியல் பொருட்கள் உயிரியல் மாசுபாட்டிற்கு ஆளாகின்றன, இது பாக்டீரியா காயமடைந்த பகுதியை ஆக்கிரமித்து அறுவை சிகிச்சைக்குப் பின் தொற்றுநோயை ஏற்படுத்துகிறது.எனவே, எலும்பியல் உள்வைப்புகளுக்கு தொற்று எதிர்ப்பு மற்றும் நோயெதிர்ப்பு தப்பிக்கும் பூச்சுகளை உருவாக்குவது அவசரத் தேவையாக உள்ளது.இங்கே, எலும்பியல் உள்வைப்புகளுக்கான மேம்பட்ட மேற்பரப்பை மாற்றியமைக்கும் தொழில்நுட்பத்தை நாங்கள் உருவாக்கியுள்ளோம், இது லூப்ரிகேட்டட் எலும்பியல் உள்வைப்பு மேற்பரப்பு (LOIS) என்று அழைக்கப்படுகிறது, இது குடம் தாவர குடங்களின் மென்மையான மேற்பரப்பால் ஈர்க்கப்பட்டுள்ளது.LOIS ஆனது பலவிதமான திரவங்கள் மற்றும் உயிரியல் பொருட்களுக்கு (செல்கள், புரதங்கள், கால்சியம் மற்றும் பாக்டீரியாக்கள் உட்பட) நீடித்த மற்றும் வலுவான திரவ விரட்டும் தன்மையைக் கொண்டுள்ளது.கூடுதலாக, இன் விட்ரோ அறுவை சிகிச்சையின் போது தவிர்க்க முடியாத சேதத்தை உருவகப்படுத்துவதன் மூலம் கீறல்கள் மற்றும் ஃபிக்ஸிங் ஃபோர்ஸுக்கு எதிரான இயந்திர ஆயுளை உறுதிப்படுத்தினோம்.முயல் எலும்பு மஜ்ஜை அழற்சி தொடை எலும்பு முறிவு மாதிரியானது LOIS இன் உயிரியல் எதிர்ப்பு அளவிடுதல் மற்றும் தொற்று எதிர்ப்பு திறனை முழுமையாக ஆய்வு செய்ய பயன்படுத்தப்பட்டது.ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகள் மற்றும் இயந்திர நீடித்த தன்மை கொண்ட LOIS, தொற்று இல்லாத எலும்பியல் அறுவை சிகிச்சையில் ஒரு படி முன்னேறும் என்று நாங்கள் கருதுகிறோம்.
இன்று, ஒட்டுமொத்த முதுமையின் காரணமாக, எலும்பியல் நோய்களால் பாதிக்கப்பட்ட நோயாளிகளின் எண்ணிக்கை (வயதான எலும்பு முறிவுகள், சிதைவு மூட்டு நோய்கள் மற்றும் ஆஸ்டியோபோரோசிஸ் போன்றவை) பெரிதும் அதிகரித்துள்ளது (1, 2).எனவே, மருத்துவ நிறுவனங்கள் எலும்பியல் அறுவை சிகிச்சைக்கு அதிக முக்கியத்துவம் கொடுக்கின்றன, இதில் திருகுகள், தட்டுகள், நகங்கள் மற்றும் செயற்கை மூட்டுகள் (3, 4) ஆகியவற்றின் எலும்பியல் உள்வைப்புகள் அடங்கும்.எவ்வாறாயினும், பாரம்பரிய எலும்பியல் உள்வைப்புகள் பாக்டீரியா ஒட்டுதல் மற்றும் பயோஃபில்ம் உருவாக்கத்திற்கு ஆளாகின்றன, இது அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு அறுவை சிகிச்சை தள தொற்றுநோயை (SSI) ஏற்படுத்தும் (5, 6).எலும்பியல் உள்வைப்பின் மேற்பரப்பில் பயோஃபில்ம் உருவானவுடன், அதிக அளவு நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளைப் பயன்படுத்தினாலும் பயோஃபில்மை அகற்றுவது மிகவும் கடினமாகிறது.எனவே, இது பொதுவாக கடுமையான அறுவை சிகிச்சைக்குப் பின் ஏற்படும் நோய்த்தொற்றுகளுக்கு வழிவகுக்கிறது (7, 8).மேலே உள்ள சிக்கல்கள் காரணமாக, பாதிக்கப்பட்ட உள்வைப்புகளின் சிகிச்சையானது, அனைத்து உள்வைப்புகள் மற்றும் சுற்றியுள்ள திசுக்களை அகற்றுவது உட்பட, மீண்டும் செயல்படுவதை உள்ளடக்கியிருக்க வேண்டும்;எனவே, நோயாளி கடுமையான வலி மற்றும் சில அபாயங்களை அனுபவிப்பார் (9, 10).
இந்த சிக்கல்களில் சிலவற்றைத் தீர்க்க, மேற்பரப்பில் இணைக்கப்பட்ட பாக்டீரியாக்களை அகற்றுவதன் மூலம் தொற்றுநோயைத் தடுக்க மருந்து-எலுட்டிங் எலும்பியல் உள்வைப்புகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன (11, 12).இருப்பினும், மூலோபாயம் இன்னும் பல வரம்புகளைக் காட்டுகிறது.மருந்து-எலுட்டிங் உள்வைப்புகளின் நீண்டகால உள்வைப்பு சுற்றியுள்ள திசுக்களுக்கு சேதத்தை ஏற்படுத்தியது மற்றும் அழற்சியை ஏற்படுத்துகிறது, இது நெக்ரோசிஸுக்கு வழிவகுக்கும் (13, 14).கூடுதலாக, அமெரிக்க உணவு மற்றும் மருந்து நிர்வாகத்தால் கண்டிப்பாக தடைசெய்யப்பட்ட மருந்து-எலுட்டிங் எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் உற்பத்தி செயல்முறைக்குப் பிறகு இருக்கும் கரிம கரைப்பான்கள், அதன் தரநிலைகளை பூர்த்தி செய்ய கூடுதல் சுத்திகரிப்பு நடவடிக்கைகள் தேவைப்படுகின்றன (15).மருந்து நீக்கும் உள்வைப்புகள் மருந்துகளின் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட வெளியீட்டிற்கு சவாலாக உள்ளன, மேலும் அவற்றின் மட்டுப்படுத்தப்பட்ட மருந்து ஏற்றுதல் காரணமாக, மருந்தின் நீண்ட கால பயன்பாடு சாத்தியமில்லை (16).
மற்றொரு பொதுவான உத்தி என்னவென்றால், உயிரியல் பொருட்கள் மற்றும் பாக்டீரியாக்கள் மேற்பரப்பில் ஒட்டிக்கொள்வதைத் தடுக்க ஒரு ஆன்டிஃபுலிங் பாலிமருடன் உள்வைப்பை பூசுவது (17).எடுத்துக்காட்டாக, பிளாஸ்மா புரதங்கள், செல்கள் மற்றும் பாக்டீரியாவுடன் தொடர்பு கொள்ளும்போது அவற்றின் ஒட்டாத பண்புகளால் zwitterionic பாலிமர்கள் கவனத்தை ஈர்த்துள்ளன.இருப்பினும், இது நீண்ட கால நிலைத்தன்மை மற்றும் இயந்திர ஆயுள் தொடர்பான சில வரம்புகளைக் கொண்டுள்ளது, இது எலும்பியல் உள்வைப்புகளில் அதன் நடைமுறைப் பயன்பாட்டைத் தடுக்கிறது, குறிப்பாக அறுவை சிகிச்சையின் போது இயந்திர ஸ்கிராப்பிங் காரணமாக (18, 19).கூடுதலாக, அதன் உயர் உயிர் இணக்கத்தன்மை, அகற்ற அறுவை சிகிச்சையின் தேவை இல்லாமை மற்றும் அரிப்பு மூலம் மேற்பரப்பு சுத்தம் செய்யும் பண்புகள் காரணமாக, மக்கும் பொருட்களால் செய்யப்பட்ட எலும்பியல் உள்வைப்புகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன (20, 21).அரிப்பின் போது, ​​பாலிமர் மேட்ரிக்ஸுக்கு இடையே உள்ள வேதியியல் பிணைப்புகள் உடைந்து மேற்பரப்பில் இருந்து பிரிக்கப்படுகின்றன, மேலும் பின்பற்றுபவர்கள் மேற்பரப்பை சுத்தம் செய்கிறார்கள்.இருப்பினும், மேற்பரப்பை சுத்தம் செய்வதன் மூலம் ஆன்டி-பயாலாஜிக்கல் ஃபவுலிங் குறுகிய காலத்தில் பயனுள்ளதாக இருக்கும்.கூடுதலாக, பாலி (லாக்டிக் அமிலம்-கிளைகோலிக் அமிலம் கோபாலிமர்) (PLGA), பாலிலாக்டிக் அமிலம் (PLA) மற்றும் மெக்னீசியம் சார்ந்த உலோகக் கலவைகள் உள்ளிட்ட பெரும்பாலான உறிஞ்சக்கூடிய பொருட்கள் உடலில் சீரற்ற மக்கும் மற்றும் அரிப்புக்கு உட்படும், இது இயந்திர நிலைத்தன்மையை எதிர்மறையாக பாதிக்கும்.(இருபத்து இரண்டு).கூடுதலாக, மக்கும் தட்டு துண்டுகள் பாக்டீரியாவை இணைக்க ஒரு இடத்தை வழங்குகிறது, இது நீண்ட காலத்திற்கு தொற்றுநோய்க்கான வாய்ப்பை அதிகரிக்கிறது.இயந்திர சிதைவு மற்றும் தொற்றுநோய்க்கான இந்த ஆபத்து பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சையின் நடைமுறை பயன்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்துகிறது (23).
தாமரை இலைகளின் படிநிலை அமைப்பைப் பிரதிபலிக்கும் சூப்பர்ஹைட்ரோபோபிக் (SHP) மேற்பரப்புகள், கறைபடியாத மேற்பரப்புகளுக்கு சாத்தியமான தீர்வாக மாறியுள்ளன (24, 25).SHP மேற்பரப்பு திரவத்தில் மூழ்கும்போது, ​​காற்று குமிழ்கள் சிக்கி, அதன் மூலம் காற்று பாக்கெட்டுகளை உருவாக்கி பாக்டீரியா ஒட்டுதலைத் தடுக்கும் (26).இருப்பினும், சமீபத்திய ஆய்வுகள், SHP மேற்பரப்பில் இயந்திர ஆயுள் மற்றும் நீண்ட கால நிலைத்தன்மை தொடர்பான குறைபாடுகள் இருப்பதாகக் காட்டுகின்றன, இது மருத்துவ உள்வைப்புகளில் அதன் பயன்பாட்டைத் தடுக்கிறது.மேலும், காற்றுப் பைகள் கரைந்து, அவற்றின் கறைபடியாத பண்புகளை இழக்கும், இதனால் SHP மேற்பரப்பின் பெரிய பரப்பளவு காரணமாக பரந்த பாக்டீரியா ஒட்டுதல் ஏற்படுகிறது (27, 28).சமீபத்தில், ஐசென்பெர்க் மற்றும் சகாக்கள் நேபெந்தஸ் பிட்சர் ஆலையால் ஈர்க்கப்பட்ட ஒரு மென்மையான மேற்பரப்பை உருவாக்குவதன் மூலம் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் மேற்பரப்பு பூச்சுக்கான ஒரு புதுமையான முறையை அறிமுகப்படுத்தினர் (29, 30).மென்மையான மேற்பரப்பு ஹைட்ராலிக் நிலைமைகளின் கீழ் நீண்ட கால நிலைத்தன்மையைக் காட்டுகிறது, உயிரியல் திரவங்களுக்கு மிகவும் திரவ விரட்டியாகும், மேலும் சுய பழுதுபார்க்கும் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது.இருப்பினும், சிக்கலான வடிவிலான மருத்துவ உள்வைப்புக்கு பூச்சு பூசுவதற்கு எந்த முறையும் இல்லை, அல்லது உள்வைப்புக்குப் பிறகு சேதமடைந்த திசுக்களின் குணப்படுத்தும் செயல்முறையை ஆதரிக்க நிரூபிக்கப்படவில்லை.
இங்கே, நாங்கள் ஒரு லூப்ரிகேட்டட் எலும்பியல் உள்வைப்பு மேற்பரப்பை (LOIS) அறிமுகப்படுத்துகிறோம், ஒரு மைக்ரோ/நானோ-கட்டமைக்கப்பட்ட எலும்பியல் உள்வைப்பு மேற்பரப்பு மற்றும் பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சையுடன் தொடர்புபடுத்தப்படுவதைத் தடுக்க ஒரு மெல்லிய மசகு எண்ணெய் அடுக்குடன் இறுக்கமாக இணைக்கப்பட்டுள்ளது, அதாவது எலும்பு முறிவு சரிசெய்தல் போன்றது.ஃவுளூரின்-செயல்படுத்தப்பட்ட மைக்ரோ/நானோ-நிலை அமைப்பு, கட்டமைப்பின் மீது மசகு எண்ணெயை உறுதியாக நிலைநிறுத்துவதால், வளர்ந்த LOIS ஆனது பல்வேறு திரவங்களின் ஒட்டுதலை முழுவதுமாக விரட்டி, நீண்ட காலத்திற்கு கறைபடியாத செயல்திறனைப் பராமரிக்கும்.LOIS பூச்சுகள் எலும்புத் தொகுப்பிற்காக வடிவமைக்கப்பட்ட பல்வேறு வடிவங்களின் பொருட்களுக்குப் பயன்படுத்தப்படலாம்.பயோஃபில்ம் பாக்டீரியா [சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா மற்றும் மெதிசிலின்-எதிர்ப்பு ஸ்டேஃபிளோகோகஸ் ஆரியஸ் (எம்ஆர்எஸ்ஏ)] மற்றும் உயிரியல் பொருட்கள் (செல்கள், புரதங்கள் மற்றும் கால்சியம்) ஆகியவற்றிற்கு எதிராக LOIS இன் சிறந்த ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகள் விட்ரோவில் உறுதிப்படுத்தப்பட்டுள்ளன.அடி மூலக்கூறுக்கு விரிவான ஒட்டுதலின் ஒட்டுதல் விகிதம் 1% க்கும் குறைவாக உள்ளது.கூடுதலாக, மேற்பரப்பு அரிப்பு போன்ற இயந்திர அழுத்தத்திற்குப் பிறகும், ஊடுருவக்கூடிய லூப்ரிகண்டால் ஏற்படும் சுய-குணப்படுத்துதல் அதன் கறைபடிந்த எதிர்ப்பு பண்புகளை பராமரிக்க உதவுகிறது.கட்டமைப்பு மற்றும் இரசாயன மாற்றத்திற்குப் பிறகும், மொத்த வலிமை கணிசமாகக் குறைக்கப்படாது என்பதை இயந்திர ஆயுள் சோதனை முடிவுகள் காட்டுகின்றன.கூடுதலாக, பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சையின் போது ஏற்படும் பல்வேறு இயந்திர அழுத்தங்களை LOIS தாங்கும் என்பதை நிரூபிக்க அறுவை சிகிச்சை சூழலில் இயந்திர அழுத்தத்தை உருவகப்படுத்தும் ஒரு சோதனை சோதனை மேற்கொள்ளப்பட்டது.இறுதியாக, முயல் அடிப்படையிலான விவோ தொடை எலும்பு முறிவு மாதிரியைப் பயன்படுத்தினோம், இது LOIS க்கு சிறந்த பாக்டீரியா எதிர்ப்பு பண்புகள் மற்றும் உயிர் இணக்கத்தன்மை உள்ளது என்பதை நிரூபித்தது.கதிரியக்க மற்றும் ஹிஸ்டோலாஜிக்கல் முடிவுகள், பொருத்தப்பட்ட 4 வாரங்களுக்குள் நிலையான லூப்ரிகண்ட் நடத்தை மற்றும் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகள் எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையை தாமதப்படுத்தாமல், பயனுள்ள தொற்று எதிர்ப்பு மற்றும் நோயெதிர்ப்பு தப்பிக்கும் செயல்திறனை அடைய முடியும் என்பதை உறுதிப்படுத்தியது.
படம் 1A, வளர்ந்த LOIS இன் திட்ட வரைபடத்தைக் காட்டுகிறது, இது முயல் தொடை எலும்பு முறிவு மாதிரியில் மைக்ரோ/நானோ அளவிலான கட்டமைப்புகளுடன் பொருத்தப்பட்டு அதன் சிறந்த உயிரியல் எதிர்ப்பு கறைபடிதல் மற்றும் தொற்று எதிர்ப்பு பண்புகளை உறுதிப்படுத்துகிறது.ஒரு நீர் பானை தாவரத்தின் மேற்பரப்பை உருவகப்படுத்தவும், மேற்பரப்பின் மைக்ரோ/நானோ அமைப்பினுள் ஒரு மசகு எண்ணெய் அடுக்கை இணைத்து உயிரிழப்பைத் தடுக்கவும் பயோமிமெடிக் முறை மேற்கொள்ளப்படுகிறது.மசகு எண்ணெய் உட்செலுத்தப்பட்ட மேற்பரப்பு உயிரியல் பொருட்களுக்கும் மேற்பரப்புக்கும் இடையிலான தொடர்பைக் குறைக்கும்.எனவே, மேற்பரப்பில் நிலையான இரசாயன பிணைப்புகள் உருவாக்கம் காரணமாக, இது சிறந்த ஆண்டிஃபவுலிங் செயல்திறன் மற்றும் நீண்ட கால நிலைத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது.இதன் விளைவாக, லூப்ரிகேட்டிங் மேற்பரப்பின் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகள் உயிரியல் மருத்துவ ஆராய்ச்சியில் பல்வேறு நடைமுறை பயன்பாடுகளை அனுமதிக்கின்றன.இருப்பினும், இந்த சிறப்பு மேற்பரப்பு உடலில் எவ்வாறு தொடர்பு கொள்கிறது என்பது பற்றிய விரிவான ஆராய்ச்சி இன்னும் முடிக்கப்படவில்லை.அல்புமின் மற்றும் பயோஃபில்ம் பாக்டீரியாவைப் பயன்படுத்தி விட்ரோவில் உள்ள நிர்வாண அடி மூலக்கூறுகளுடன் LOIS ஐ ஒப்பிடுவதன் மூலம், LOIS இன் ஒட்டாத தன்மையை உறுதிப்படுத்த முடியும் (படம் 1B).கூடுதலாக, சாய்ந்த வெற்று அடி மூலக்கூறு மற்றும் LOIS அடி மூலக்கூறு (படம் S1 மற்றும் மூவி S1) மீது நீர்த்துளிகளை உருட்டுவதன் மூலம், உயிரியல் மாசுபடுத்தும் செயல்திறனை நிரூபிக்க முடியும்.ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கி படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, புரதம் மற்றும் பாக்டீரியாவின் இடைநீக்கத்தில் அடைகாக்கப்பட்ட வெளிப்படும் அடி மூலக்கூறு மேற்பரப்பில் ஒட்டிக்கொண்டிருக்கும் பெரிய அளவிலான உயிரியல் பொருள்களைக் காட்டியது.இருப்பினும், அதன் சிறந்த ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகள் காரணமாக, LOIS எந்த ஒளிரும் தன்மையையும் காட்டாது.அதன் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் மற்றும் ஆன்டி-இன்ஃபெக்ஷன் பண்புகளை உறுதி செய்வதற்காக, எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் மேற்பரப்பில் LOIS ஆனது எலும்புத் தொகுப்பிற்காக (தகடுகள் மற்றும் திருகுகள்) பயன்படுத்தப்பட்டு முயல் முறிவு மாதிரியில் வைக்கப்பட்டது.பொருத்துவதற்கு முன், நிர்வாண எலும்பியல் உள்வைப்பு மற்றும் LOIS ஆகியவை 12 மணி நேரம் பாக்டீரியா இடைநீக்கத்தில் அடைகாத்தன.முன்-இன்குபேஷன், ஒப்பிட்டுப் பார்க்க வெளிப்படும் உள்வைப்பின் மேற்பரப்பில் ஒரு பயோஃபில்ம் உருவாகிறது என்பதை உறுதி செய்கிறது.பொருத்தப்பட்ட 4 வாரங்களுக்குப் பிறகு எலும்பு முறிவு ஏற்பட்ட இடத்தின் புகைப்படத்தை படம் 1C காட்டுகிறது.இடதுபுறத்தில், ஒரு வெற்று எலும்பியல் உள்வைப்பு கொண்ட ஒரு முயல், உள்வைப்பின் மேற்பரப்பில் ஒரு பயோஃபில்ம் உருவாவதன் காரணமாக கடுமையான வீக்கத்தைக் காட்டியது.LOIS உடன் பொருத்தப்பட்ட முயல்களில் எதிர் விளைவு காணப்பட்டது, அதாவது, LOIS இன் சுற்றியுள்ள திசுக்கள் நோய்த்தொற்றின் அறிகுறிகளையோ அல்லது அழற்சியின் அறிகுறிகளையோ காட்டவில்லை.கூடுதலாக, இடதுபுறத்தில் உள்ள ஆப்டிகல் படம், வெளிப்படும் உள்வைப்புடன் முயலின் அறுவை சிகிச்சை தளத்தைக் குறிக்கிறது, இது LOIS இன் மேற்பரப்பில் வெளிப்படும் உள்வைப்பின் மேற்பரப்பில் பல பசைகள் காணப்படவில்லை என்பதைக் குறிக்கிறது.LOIS நீண்ட கால நிலைத்தன்மையைக் கொண்டிருப்பதையும், அதன் உயிரியல் எதிர்ப்பு கறைபடிதல் மற்றும் ஒட்டுதல் எதிர்ப்பு பண்புகளை பராமரிக்கும் திறனையும் கொண்டுள்ளது என்பதையும் இது காட்டுகிறது.
(A) LOIS இன் திட்ட வரைபடம் மற்றும் முயல் தொடை எலும்பு முறிவு மாதிரியில் அதன் பொருத்துதல்.(B) வெற்று மேற்பரப்பு மற்றும் LOIS அடி மூலக்கூறில் புரதம் மற்றும் பாக்டீரியா பயோஃபில்மின் ஃப்ளோரசன்ஸ் மைக்ரோஸ்கோபி படம்.பொருத்தப்பட்ட 4 வாரங்களுக்குப் பிறகு, (சி) எலும்பு முறிவு ஏற்பட்ட இடத்தின் புகைப்படப் படம் மற்றும் (டி) எக்ஸ்ரே படம் (சிவப்பு செவ்வகத்தால் உயர்த்தி காட்டப்பட்டது).பட உதவி: Kyomin Chae, Yonsei பல்கலைக்கழகம்.
கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்ட, எதிர்மறையாக பொருத்தப்பட்ட முயல்கள், வீக்கம் அல்லது நோய்த்தொற்றின் எந்த அறிகுறியும் இல்லாமல் ஒரு சாதாரண எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையைக் காட்டின.மறுபுறம், பாக்டீரியா சஸ்பென்ஷனில் முன்பே அடைகாக்கப்பட்ட SHP உள்வைப்புகள் சுற்றியுள்ள திசுக்களில் தொற்று தொடர்பான அழற்சியை வெளிப்படுத்துகின்றன.நீண்ட காலத்திற்கு பாக்டீரியா ஒட்டுதலைத் தடுக்க இயலாமை இதற்குக் காரணமாக இருக்கலாம் (படம் S2).LOIS குணப்படுத்தும் செயல்முறையை பாதிக்காது, ஆனால் உள்வைப்பு தொடர்பான சாத்தியமான நோய்த்தொற்றுகளைத் தடுக்கிறது என்பதை நிரூபிக்க, எலும்பு முறிவு தளத்தில் வெளிப்படும் நேர்மறை மேட்ரிக்ஸ் மற்றும் LOIS இன் எக்ஸ்ரே படங்கள் ஒப்பிடப்பட்டன (படம் 1D).வெற்று நேர்மறை உள்வைப்பின் எக்ஸ்ரே படம் தொடர்ந்து ஆஸ்டியோலிசிஸ் கோடுகளைக் காட்டியது, இது எலும்பு முழுமையாக குணமடையவில்லை என்பதைக் குறிக்கிறது.தொற்று தொடர்பான அழற்சியின் காரணமாக எலும்பு மீட்பு செயல்முறை மிகவும் தாமதமாகலாம் என்று இது அறிவுறுத்துகிறது.மாறாக, LOIS மூலம் பொருத்தப்பட்ட முயல்கள் குணமடைந்துவிட்டன மற்றும் வெளிப்படையான எலும்பு முறிவு இடத்தைக் காட்டவில்லை என்று அது காட்டியது.
நீண்ட கால நிலைத்தன்மை மற்றும் செயல்பாட்டுடன் கூடிய மருத்துவ உள்வைப்புகளை உருவாக்குவதற்காக (உயிர்க்கழிவுக்கு எதிர்ப்பு உட்பட), பல முயற்சிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டுள்ளன.இருப்பினும், பல்வேறு உயிரியல் பொருட்களின் இருப்பு மற்றும் திசு ஒட்டுதலின் இயக்கவியல் ஆகியவை அவற்றின் மருத்துவ ரீதியாக நம்பகமான முறைகளின் வளர்ச்சியைக் கட்டுப்படுத்துகின்றன.இந்தக் குறைபாடுகளைப் போக்க, மைக்ரோ/நானோ அடுக்கு அமைப்பு மற்றும் வேதியியல் ரீதியாக மாற்றியமைக்கப்பட்ட மேற்பரப்பை நாங்கள் உருவாக்கியுள்ளோம், இது அதிக தந்துகி விசை மற்றும் ரசாயன தொடர்பு காரணமாக உகந்ததாக உள்ளது, இது மென்மையான மசகு எண்ணெயை அதிக அளவில் வைத்திருக்கும்.LOIS இன் ஒட்டுமொத்த உற்பத்தி செயல்முறையை படம் 2A காட்டுகிறது.முதலில், மருத்துவ தர துருப்பிடிக்காத எஃகு (SS) 304 அடி மூலக்கூறை தயார் செய்யவும்.இரண்டாவதாக, ஹைட்ரோஃப்ளூரிக் அமிலம் (HF) கரைசலைப் பயன்படுத்தி ரசாயன பொறிப்பதன் மூலம் SS அடி மூலக்கூறில் மைக்ரோ/நானோ அமைப்பு உருவாகிறது.SS இன் அரிப்பு எதிர்ப்பை மீட்டெடுக்க, ஒரு நைட்ரிக் அமிலம் (HNO3) கரைசல் (31) பொறிக்கப்பட்ட அடி மூலக்கூறைச் செயலாக்கப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.செயலற்ற நிலை SS அடி மூலக்கூறின் அரிப்பு எதிர்ப்பை அதிகரிக்கிறது மற்றும் LOIS இன் ஒட்டுமொத்த செயல்திறனைக் குறைக்கும் அரிப்பு செயல்முறையை கணிசமாகக் குறைக்கிறது.பின்னர், 1H, 1H, 2H, 2H-perfluorooctyltriethoxysilane (POTS) உடன் ஒரு சுய-அசெம்பிள்டு மோனோலேயரை (SAM) உருவாக்குவதன் மூலம், மேற்பரப்பு மற்றும் மென்மையான லூப்ரிகண்ட் அஃபினிட்டிக்கு இடையேயான இரசாயன தொடர்புகளை மேம்படுத்துவதற்காக மேற்பரப்பு வேதியியல் ரீதியாக மாற்றியமைக்கப்படுகிறது.மேற்பரப்பு மாற்றம் புனையப்பட்ட மைக்ரோ/நானோ அளவிலான கட்டமைக்கப்பட்ட மேற்பரப்பின் மேற்பரப்பு ஆற்றலை கணிசமாகக் குறைக்கிறது, இது மென்மையான மசகு எண்ணெய்யின் மேற்பரப்பு ஆற்றலுடன் பொருந்துகிறது.இது மசகு எண்ணெயை முழுமையாக ஈரப்படுத்த அனுமதிக்கிறது, இதன் மூலம் மேற்பரப்பில் ஒரு நிலையான மசகு எண்ணெய் அடுக்கு உருவாகிறது.மாற்றியமைக்கப்பட்ட மேற்பரப்பு மேம்பட்ட ஹைட்ரோபோபிசிட்டியை வெளிப்படுத்துகிறது.மைக்ரோ/நானோ அமைப்பு (32, 33) காரணமாக அதிக இரசாயன தொடர்பு மற்றும் தந்துகி விசை காரணமாக வழுக்கும் மசகு எண்ணெய் LOIS இல் நிலையான நடத்தையை வெளிப்படுத்துகிறது என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன.மேற்பரப்பு மாற்றம் மற்றும் மசகு எண்ணெய் உட்செலுத்தலுக்குப் பிறகு SS இன் மேற்பரப்பில் உள்ள ஒளியியல் மாற்றங்கள் ஆய்வு செய்யப்பட்டன.மேற்பரப்பில் உருவாகும் மைக்ரோ/நானோ அடுக்கு அமைப்பு காட்சி மாற்றங்களை ஏற்படுத்தி மேற்பரப்பை கருமையாக்கும்.இந்த நிகழ்வு கரடுமுரடான மேற்பரப்பில் மேம்படுத்தப்பட்ட ஒளி சிதறல் விளைவுக்கு காரணமாகும், இது ஒளி பொறி நுட்பத்தால் ஏற்படும் பரவலான பிரதிபலிப்பை அதிகரிக்கிறது (34).கூடுதலாக, மசகு எண்ணெய் உட்செலுத்தப்பட்ட பிறகு, LOIS கருமையாகிறது.மசகு அடுக்கு அடி மூலக்கூறிலிருந்து குறைவான ஒளியை பிரதிபலிக்கச் செய்கிறது, இதன் மூலம் LOIS ஐ இருட்டாக்குகிறது.ஆன்டி-பயோஃபுலிங் செயல்திறனை அடைவதற்கு மிகச்சிறிய ஸ்லைடிங் கோணத்தை (எஸ்ஏ) காட்ட மைக்ரோஸ்ட்ரக்சர்/நானோஸ்ட்ரக்சரை மேம்படுத்த, ஸ்கேனிங் எலக்ட்ரான் மைக்ரோஸ்கோபி (எஸ்இஎம்) மற்றும் அணு ஜோடிகள் வெவ்வேறு எச்எஃப் எச்சிங் நேரங்களைச் செய்ய பயன்படுத்தப்பட்டன (0, 3)., 15 மற்றும் 60 நிமிடங்கள்) ஃபோர்ஸ் மைக்ரோஸ்கோப் (AFM) (படம் 2B).SEM மற்றும் AFM படங்கள் சிறிது நேரம் பொறித்த பிறகு (3 நிமிட பொறித்தல்), வெற்று அடி மூலக்கூறு சீரற்ற நானோ அளவிலான கடினத்தன்மையை உருவாக்கியுள்ளது என்பதைக் காட்டுகிறது.பொறிக்கும் நேரத்துடன் மேற்பரப்பு கடினத்தன்மை மாறுகிறது (படம் S3).நேரம் மாறுபடும் வளைவு, மேற்பரப்பு கடினத்தன்மை தொடர்ந்து அதிகரித்து 15 நிமிட பொறிப்பில் உச்சத்தை அடைகிறது, பின்னர் 30 நிமிட பொறிப்பில் கடினத்தன்மை மதிப்பில் சிறிது குறைவு மட்டுமே காணப்படுகிறது.இந்த கட்டத்தில், நானோ-நிலை கடினத்தன்மை பொறிக்கப்படுகிறது, அதே நேரத்தில் மைக்ரோ-லெவல் கடினத்தன்மை தீவிரமாக உருவாகிறது, கடினத்தன்மையை மேலும் நிலையானதாக மாற்றுகிறது.30 நிமிடங்களுக்கு மேல் பொறித்த பிறகு, கடினத்தன்மையில் மேலும் அதிகரிப்பு காணப்படுகிறது, இது பின்வருமாறு விரிவாக விளக்கப்பட்டுள்ளது: SS ஆனது இரும்பு, குரோமியம், நிக்கல், மாலிப்டினம் மற்றும் பல தனிமங்கள் உள்ளிட்ட உறுப்புகளுடன் கலந்த எஃகால் ஆனது.இந்த தனிமங்களில், இரும்பு, குரோமியம் மற்றும் மாலிப்டினம் ஆகியவை மைக்ரான்/நானோ அளவிலான கடினத்தன்மையை HF பொறிப்பதன் மூலம் SS இல் உருவாக்குவதில் முக்கிய பங்கு வகிக்கின்றன.அரிப்பின் ஆரம்ப கட்டங்களில், இரும்பு மற்றும் குரோமியம் முக்கியமாக அரிக்கப்பட்டன, ஏனெனில் மாலிப்டினம் மாலிப்டினத்தை விட அதிக அரிப்பு எதிர்ப்பைக் கொண்டுள்ளது.பொறித்தல் முன்னேறும் போது, ​​செதுக்கல் கரைசல் உள்ளூர் அதிகப்படியான செறிவூட்டலை அடைந்து, செதுக்குவதால் ஏற்படும் புளோரைடுகள் மற்றும் ஆக்சைடுகளை உருவாக்குகிறது.ஃவுளூரைடு மற்றும் ஆக்சைடு வீழ்படிவு மற்றும் இறுதியில் மேற்பரப்பில் மீண்டும் படிந்து, மைக்ரான்/நானோ வரம்பில் மேற்பரப்பு கடினத்தன்மையை உருவாக்குகிறது (31).இந்த மைக்ரோ/நானோ-நிலை கடினத்தன்மை LOIS இன் சுய-குணப்படுத்தும் பண்புகளில் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது.இரட்டை அளவிலான மேற்பரப்பு ஒரு ஒருங்கிணைந்த விளைவை உருவாக்குகிறது, இது தந்துகி சக்தியை பெரிதும் அதிகரிக்கிறது.இந்த நிகழ்வு மசகு எண்ணெய் மேற்பரப்பில் நிலையாக ஊடுருவ அனுமதிக்கிறது மற்றும் சுய-குணப்படுத்தும் பண்புகளுக்கு பங்களிக்கிறது (35).கடினத்தன்மையின் உருவாக்கம் பொறிக்கும் நேரத்தைப் பொறுத்தது.பொறிக்கப்பட்ட 10 நிமிடங்களுக்கு கீழ், மேற்பரப்பில் நானோ அளவிலான கடினத்தன்மை மட்டுமே உள்ளது, இது பயோஃபுலிங் எதிர்ப்பைக் கொண்டிருக்கும் போதுமான மசகு எண்ணெய் வைத்திருக்க போதுமானதாக இல்லை (36).மறுபுறம், பொறிக்கும் நேரம் 30 நிமிடங்களுக்கு மேல் இருந்தால், இரும்பு மற்றும் குரோமியம் மீண்டும் படிவதால் உருவான நானோ அளவிலான கடினத்தன்மை மறைந்துவிடும், மேலும் மாலிப்டினம் காரணமாக மைக்ரோ அளவிலான கடினத்தன்மை மட்டுமே இருக்கும்.அதிகமாக பொறிக்கப்பட்ட மேற்பரப்பில் நானோ அளவிலான கடினத்தன்மை இல்லை மற்றும் இரண்டு-நிலை கடினத்தன்மையின் ஒருங்கிணைந்த விளைவை இழக்கிறது, இது LOIS இன் சுய-குணப்படுத்தும் பண்புகளை எதிர்மறையாக பாதிக்கிறது.SA அளவீடுகள் வெவ்வேறு செதுக்கல் நேரங்களைக் கொண்ட அடி மூலக்கூறுகளில் கறைபடிதல் எதிர்ப்பு செயல்திறனை நிரூபிக்கச் செய்யப்பட்டன.டீயோனைஸ்டு (DI) நீர், இரத்தம், எத்திலீன் கிளைக்கால் (EG), எத்தனால் (EtOH) மற்றும் ஹெக்ஸாடேகேன் (HD) (படம் S4) உள்ளிட்ட பாகுத்தன்மை மற்றும் மேற்பரப்பு ஆற்றலின் அடிப்படையில் பல்வேறு வகையான திரவங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.வெவ்வேறு மேற்பரப்பு ஆற்றல்கள் மற்றும் பாகுத்தன்மை கொண்ட பல்வேறு திரவங்களுக்கு, 15 நிமிட பொறிப்பிற்குப் பிறகு LOIS இன் SA மிகக் குறைவாக இருப்பதை நேரம்-மாறுபடும் பொறித்தல் முறை காட்டுகிறது.எனவே, LOIS ஆனது மைக்ரான் மற்றும் நானோ அளவிலான கடினத்தன்மையை உருவாக்க 15 நிமிடங்களுக்கு பொறிக்க உகந்ததாக உள்ளது, இது லூப்ரிகண்டின் நீடித்துழைப்பு மற்றும் சிறந்த கறைபடிந்த எதிர்ப்பு பண்புகளை திறம்பட பராமரிக்க ஏற்றது.
(A) LOIS இன் நான்கு-படி உற்பத்தி செயல்முறையின் திட்ட வரைபடம்.அடி மூலக்கூறில் உருவாகும் SAM ஐ இன்செட் காட்டுகிறது.(B) SEM மற்றும் AFM படங்கள், வெவ்வேறு செதுக்கல் நேரங்களின் கீழ் அடி மூலக்கூறின் மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்பை மேம்படுத்த பயன்படுகிறது.எக்ஸ்ரே ஃபோட்டோ எலக்ட்ரான் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி (எக்ஸ்பிஎஸ்) ஸ்பெக்ட்ரா (C) Cr2p மற்றும் (D) F1s ஆகியவற்றின் மேற்பரப்பு செயலிழப்பு மற்றும் SAM பூச்சுக்குப் பிறகு.au, தன்னிச்சையான அலகு.(இ) வெற்று, பொறிக்கப்பட்ட, SHP மற்றும் LOIS அடி மூலக்கூறுகளில் நீர்த்துளிகளின் பிரதிநிதித்துவ படங்கள்.(F) SHP மற்றும் LOIS இல் வெவ்வேறு மேற்பரப்பு பதற்றங்களைக் கொண்ட திரவங்களின் தொடர்பு கோணம் (CA) மற்றும் SA அளவீடு.தரவு சராசரி ± SD ஆக வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.
பின்னர், மேற்பரப்பின் வேதியியல் பண்புகளில் ஏற்படும் மாற்றத்தை உறுதிப்படுத்த, எக்ஸ்ரே ஃபோட்டோ எலக்ட்ரான் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி (XPS) ஒவ்வொரு மேற்பரப்பு பூச்சுக்குப் பிறகு அடி மூலக்கூறு மேற்பரப்பின் வேதியியல் கலவையில் ஏற்படும் மாற்றத்தை ஆய்வு செய்ய பயன்படுத்தப்பட்டது.HF பொறிக்கப்பட்ட மேற்பரப்பு மற்றும் HNO 3 சிகிச்சை மேற்பரப்பின் XPS அளவீட்டு முடிவுகளை படம் 2C காட்டுகிறது.587.3 மற்றும் 577.7 eV இல் உள்ள இரண்டு முக்கிய சிகரங்கள் குரோமியம் ஆக்சைடு அடுக்கில் இருக்கும் Cr-O பிணைப்பிற்குக் காரணமாக இருக்கலாம், இது HF பொறிக்கப்பட்ட மேற்பரப்பில் இருந்து முக்கிய வேறுபாடு ஆகும்.HNO3 மூலம் மேற்பரப்பில் இரும்பு மற்றும் குரோமியம் ஃவுளூரைடு நுகர்வு முக்கிய காரணமாகும்.HNO3-அடிப்படையிலான செதுக்கல் குரோமியத்தை மேற்பரப்பில் ஒரு செயலற்ற ஆக்சைடு அடுக்கை உருவாக்க அனுமதிக்கிறது, இது பொறிக்கப்பட்ட SS ஐ மீண்டும் அரிப்பை எதிர்க்கும்.படம் 2D இல், SAM பூச்சுக்குப் பிறகு மேற்பரப்பில் ஃப்ளோரோகார்பன் அடிப்படையிலான சிலேன் உருவானது என்பதை உறுதிப்படுத்த XPS ஸ்பெக்ட்ரா பெறப்பட்டது, இது EG, இரத்தம் மற்றும் EtOH ஆகியவற்றிற்கு கூட மிக அதிக திரவ விரட்டும் தன்மையைக் கொண்டுள்ளது.பிளாஸ்மா சிகிச்சையால் உருவாக்கப்பட்ட ஹைட்ராக்சில் குழுக்களுடன் சிலேன் செயல்பாட்டுக் குழுக்களுடன் வினைபுரிவதன் மூலம் SAM பூச்சு நிறைவு செய்யப்படுகிறது.இதன் விளைவாக, CF2 மற்றும் CF3 உச்சங்களில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு காணப்பட்டது.286 மற்றும் 296 eV க்கு இடையே உள்ள பிணைப்பு ஆற்றல், SAM பூச்சு மூலம் இரசாயன மாற்றம் வெற்றிகரமாக முடிக்கப்பட்டதைக் குறிக்கிறது.SHP ஒப்பீட்டளவில் பெரிய CF2 (290.1 ​​eV) மற்றும் CF3 (293.3 eV) சிகரங்களைக் காட்டுகிறது, அவை மேற்பரப்பில் உருவாகும் ஃப்ளோரோகார்பன் அடிப்படையிலான சிலேன் காரணமாகும்.படம் 2E, வெற்று, பொறிக்கப்பட்ட, SHP மற்றும் LOIS ஆகியவற்றுடன் தொடர்புள்ள பல்வேறு குழுக்களின் டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீரின் தொடர்பு கோணத்தின் (CA) அளவீடுகளின் பிரதிநிதித்துவ ஒளியியல் படங்களைக் காட்டுகிறது.இரசாயன பொறிப்பினால் உருவாகும் மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்பின் காரணமாக பொறிக்கப்பட்ட மேற்பரப்பு ஹைட்ரோஃபிலிக் ஆகிறது, இதனால் டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீர் கட்டமைப்பில் உறிஞ்சப்படுகிறது.இருப்பினும், அடி மூலக்கூறு SAM உடன் பூசப்பட்டால், அடி மூலக்கூறு வலுவான நீர் விரட்டும் தன்மையை வெளிப்படுத்துகிறது, எனவே ஒரு மேற்பரப்பு SHP உருவாகிறது மற்றும் தண்ணீருக்கும் மேற்பரப்புக்கும் இடையிலான தொடர்பு பகுதி சிறியதாக இருக்கும்.இறுதியாக, LOIS இல் CA இன் குறைவு காணப்பட்டது, இது நுண்ணிய கட்டமைப்பில் மசகு எண்ணெய் ஊடுருவலுக்கு காரணமாக இருக்கலாம், இதனால் தொடர்பு பகுதி அதிகரிக்கிறது.மேற்பரப்பு சிறந்த திரவ விரட்டும் தன்மை மற்றும் ஒட்டாத பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது என்பதை நிரூபிக்க, பல்வேறு திரவங்களைப் பயன்படுத்தி CA மற்றும் SA ஐ அளவிடுவதன் மூலம் LOIS ஆனது SHP அடி மூலக்கூறுடன் ஒப்பிடப்பட்டது (படம் 2F).டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீர், இரத்தம், EG, EtOH மற்றும் HD (படம் S4) உள்ளிட்ட பாகுத்தன்மை மற்றும் மேற்பரப்பு ஆற்றலின் அடிப்படையில் பல்வேறு வகையான திரவங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன.CA அளவீட்டு முடிவுகள், CA ஆனது HDக்கு மாறும்போது, ​​CA இன் குறைப்பு மதிப்பு, CA மிகக் குறைந்த மேற்பரப்பு ஆற்றலைக் கொண்டுள்ளது என்பதைக் காட்டுகிறது.கூடுதலாக, ஒட்டுமொத்த CA இன் LOIS குறைவாக உள்ளது.இருப்பினும், SA அளவீடு முற்றிலும் மாறுபட்ட நிகழ்வைக் காட்டுகிறது.அயனியாக்கம் செய்யப்பட்ட தண்ணீரைத் தவிர, அனைத்து திரவங்களும் நழுவாமல் SHP அடி மூலக்கூறுடன் ஒட்டிக்கொள்கின்றன.மறுபுறம், LOIS மிகக் குறைந்த SA ஐக் காட்டுகிறது, அங்கு அனைத்து திரவமும் 10° முதல் 15°க்குக் குறைவான கோணத்தில் சாய்ந்தால், அனைத்து திரவமும் உருளும்.SHP மேற்பரப்பை விட LOIS இன் ஒட்டாத தன்மை சிறந்தது என்பதை இது உறுதியாகக் காட்டுகிறது.கூடுதலாக, LOIS பூச்சுகள் டைட்டானியம் (Ti), பாலிஃபெனில்சல்போன் (PPSU), பாலிஆக்ஸிமெத்திலீன் (POM), பாலியெதர் ஈதர் கீட்டோன் (PEEK) மற்றும் பயோஅப்சார்பபிள் பாலிமர்கள் (PLGA) உள்ளிட்ட பல்வேறு வகையான பொருட்களுக்கும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, அவை பொருத்தக்கூடிய எலும்பியல் பொருட்கள் (படம் S5)).LOIS ஆல் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட பொருளில் உள்ள நீர்த்துளிகளின் வரிசையான படங்கள், LOIS இன் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகள் அனைத்து அடி மூலக்கூறுகளிலும் ஒரே மாதிரியாக இருப்பதைக் காட்டுகின்றன.கூடுதலாக, CA மற்றும் SA இன் அளவீட்டு முடிவுகள், LOIS இன் ஒட்டாத பண்புகளை மற்ற பொருட்களுக்குப் பயன்படுத்தலாம் என்பதைக் காட்டுகிறது.
LOIS இன் கறைபடிதல் எதிர்ப்பு பண்புகளை உறுதி செய்வதற்காக, பல்வேறு வகையான அடி மூலக்கூறுகள் (வெற்று, பொறிக்கப்பட்ட, SHP மற்றும் LOIS உட்பட) சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா மற்றும் MRSA உடன் அடைகாக்கப்பட்டது.இந்த இரண்டு பாக்டீரியாக்களும் பிரதிநிதி மருத்துவமனை பாக்டீரியாக்களாகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன, இது பயோஃபில்ம்களை உருவாக்க வழிவகுக்கும், இது SSI (37) க்கு வழிவகுக்கும்.படம் 3 (A மற்றும் B) ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கி படங்கள் மற்றும் காலனி உருவாக்கும் அலகு (CFU) முறையே குறுகிய கால (12 மணிநேரம்) மற்றும் நீண்ட கால (72 மணிநேரம்) பாக்டீரியல் இடைநீக்கத்தில் அடைகாக்கப்பட்ட அடி மூலக்கூறுகளின் அளவீட்டு முடிவுகளைக் காட்டுகிறது.குறுகிய காலத்தில், பாக்டீரியாக்கள் கொத்துக்களை உருவாக்கி, அளவு வளர்ந்து, சளி போன்ற பொருட்களால் தங்களை மூடிக்கொண்டு, அவற்றை அகற்றுவதைத் தடுக்கும்.இருப்பினும், 72 மணி நேர அடைகாக்கும் போது, ​​பாக்டீரியா முதிர்ச்சியடைந்து, அதிக காலனிகள் அல்லது கொத்துகளை உருவாக்குவதற்கு எளிதில் சிதறிவிடும்.எனவே, 72-மணிநேர அடைகாத்தல் நீண்டகாலம் மற்றும் மேற்பரப்பில் வலுவான உயிரிப்படத்தை உருவாக்குவதற்கு பொருத்தமான அடைகாக்கும் நேரம் என்று கருதலாம் (38).குறுகிய காலத்தில், பொறிக்கப்பட்ட மேற்பரப்பு மற்றும் SHP இன் மேற்பரப்பு பாக்டீரியா ஒட்டுதலை வெளிப்படுத்தியது, இது வெறும் அடி மூலக்கூறுடன் ஒப்பிடும்போது சுமார் 25% முதல் 50% வரை குறைக்கப்பட்டது.இருப்பினும், அதன் சிறந்த ஆன்டி-பயோஃபுலிங் செயல்திறன் மற்றும் நிலைத்தன்மையின் காரணமாக, LOIS ஆனது குறுகிய மற்றும் நீண்ட காலத்திற்கு பாக்டீரியா பயோஃபில்ம் ஒட்டுதலைக் காட்டவில்லை.திட்ட வரைபடம் (படம் 3C) செதுக்கல் கரைசல், SHP மற்றும் LOIS ஆகியவற்றின் உயிரியல் எதிர்ப்பு கறைபடிதல் பொறிமுறையின் விளக்கத்தை விவரிக்கிறது.ஹைட்ரோஃபிலிக் பண்புகளைக் கொண்ட பொறிக்கப்பட்ட அடி மூலக்கூறு வெற்று அடி மூலக்கூறை விட பெரிய பரப்பளவைக் கொண்டிருக்கும் என்பது அனுமானம்.எனவே, பொறிக்கப்பட்ட அடி மூலக்கூறில் அதிக பாக்டீரியா ஒட்டுதல் ஏற்படும்.இருப்பினும், வெற்று அடி மூலக்கூறுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​பொறிக்கப்பட்ட அடி மூலக்கூறு மேற்பரப்பில் உருவாகும் உயிர்ப் படலத்தை கணிசமாகக் குறைவாகக் கொண்டுள்ளது.ஏனென்றால், நீர் மூலக்கூறுகள் ஹைட்ரோஃபிலிக் மேற்பரப்பில் உறுதியாக பிணைக்கப்பட்டு தண்ணீருக்கான மசகு எண்ணெயாக செயல்படுகின்றன, இதனால் குறுகிய காலத்தில் பாக்டீரியாவின் ஒட்டுதலில் குறுக்கிடுகிறது (39).இருப்பினும், நீர் மூலக்கூறுகளின் அடுக்கு மிகவும் மெல்லியதாகவும், பாக்டீரியா இடைநீக்கங்களில் கரையக்கூடியதாகவும் உள்ளது.எனவே, நீர் மூலக்கூறு அடுக்கு நீண்ட காலத்திற்கு மறைந்துவிடும், இது விரிவான பாக்டீரியா ஒட்டுதல் மற்றும் பெருக்கத்திற்கு வழிவகுக்கிறது.SHP க்கு, அதன் குறுகிய கால அல்லாத ஈரப்பதம் பண்புகள் காரணமாக, பாக்டீரியா ஒட்டுதல் தடுக்கப்படுகிறது.குறைக்கப்பட்ட பாக்டீரியா ஒட்டுதல் அடுக்கு அமைப்பு மற்றும் குறைந்த மேற்பரப்பு ஆற்றலில் சிக்கியுள்ள காற்றுப் பைகள் காரணமாக இருக்கலாம், இதன் மூலம் பாக்டீரியா இடைநீக்கத்திற்கும் மேற்பரப்புக்கும் இடையிலான தொடர்பைக் குறைக்கிறது.இருப்பினும், SHP இல் விரிவான பாக்டீரியா ஒட்டுதல் காணப்பட்டது, ஏனெனில் அது நீண்ட காலமாக அதன் கறைபடிதல் பண்புகளை இழந்தது.இது முக்கியமாக ஹைட்ரோஸ்டேடிக் அழுத்தம் மற்றும் தண்ணீரில் காற்று கரைவதால் காற்று பாக்கெட்டுகள் காணாமல் போவதால் ஏற்படுகிறது.இது முக்கியமாக காற்று பாக்கெட்டுகள் கரைவதால் காணாமல் போவது மற்றும் ஒட்டுதலுக்கான பெரிய பரப்பளவை வழங்கும் அடுக்கு அமைப்பு (27, 40) காரணமாகும்.நீண்ட கால நிலைத்தன்மையில் முக்கியமான விளைவைக் கொண்டிருக்கும் இந்த இரண்டு அடி மூலக்கூறுகளைப் போலல்லாமல், LOIS இல் உள்ள மசகு எண்ணெய் மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்பில் செலுத்தப்படுகிறது மற்றும் நீண்ட காலத்திற்கு கூட மறைந்துவிடாது.நுண்ணிய/நானோ கட்டமைப்புகளால் நிரப்பப்பட்ட லூப்ரிகண்டுகள் மிகவும் உறுதியானவை மற்றும் அவற்றின் அதிக இரசாயன தொடர்பு காரணமாக மேற்பரப்பில் வலுவாக ஈர்க்கப்படுகின்றன, இதனால் நீண்ட காலத்திற்கு பாக்டீரியா ஒட்டுதலைத் தடுக்கிறது.பாஸ்பேட் பஃபர்டு சேலைனில் (பிபிஎஸ்) மூழ்கியிருக்கும் மசகு எண்ணெய் உட்செலுத்தப்பட்ட அடி மூலக்கூறின் பிரதிபலிப்பு கன்ஃபோகல் மைக்ரோஸ்கோப் படத்தை படம் S6 காட்டுகிறது.தொடர்ச்சியான படங்கள், 120 மணிநேரம் லேசான குலுக்கலுக்குப் பிறகும் (120 ஆர்பிஎம்), LOIS இல் உள்ள மசகு எண்ணெய் அடுக்கு மாறாமல் உள்ளது, இது ஓட்ட நிலைமைகளின் கீழ் நீண்ட கால நிலைத்தன்மையைக் குறிக்கிறது.ஃவுளூரின் அடிப்படையிலான SAM பூச்சுக்கும் பெர்ஃப்ளூரோகார்பன் அடிப்படையிலான லூப்ரிகண்டுக்கும் இடையே உள்ள உயர் இரசாயனத் தொடர்பு காரணமாக இது ஒரு நிலையான மசகு எண்ணெய் அடுக்கு உருவாகிறது.எனவே, ஃபவுலிங் எதிர்ப்பு செயல்திறன் பராமரிக்கப்படுகிறது.கூடுதலாக, பிளாஸ்மாவில் உள்ள பிரதிநிதி புரதங்கள் (அல்புமின் மற்றும் ஃபைப்ரினோஜென்), நோயெதிர்ப்பு செயல்பாடு (மேக்ரோபேஜ்கள் மற்றும் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்கள்) மற்றும் எலும்பு உருவாக்கம் தொடர்பான செல்கள் ஆகியவற்றிற்கு எதிராக அடி மூலக்கூறு சோதிக்கப்பட்டது.கால்சியத்தின் உள்ளடக்கம் மிகவும் அதிகமாக உள்ளது.(படம் 3D, 1 மற்றும் 2, மற்றும் படம் S7) (41, 42).கூடுதலாக, ஃபைப்ரினோஜென், அல்புமின் மற்றும் கால்சியத்திற்கான ஒட்டுதல் சோதனையின் ஒளிரும் நுண்ணோக்கி படங்கள் ஒவ்வொரு அடி மூலக்கூறு குழுவின் வெவ்வேறு ஒட்டுதல் பண்புகளைக் காட்டின (படம் S8).எலும்பு உருவாக்கத்தின் போது, ​​புதிதாக உருவாகும் எலும்பு மற்றும் கால்சியம் அடுக்குகள் எலும்பியல் உள்வைப்பைச் சுற்றி வரலாம், இது அகற்றுவதை கடினமாக்குவது மட்டுமல்லாமல், அகற்றும் செயல்பாட்டின் போது நோயாளிக்கு எதிர்பாராத தீங்கு விளைவிக்கும்.எனவே, எலும்பு தகடுகள் மற்றும் திருகுகளில் குறைந்த அளவு கால்சியம் படிவுகள் உள்வைப்பு நீக்கம் தேவைப்படும் எலும்பியல் அறுவை சிகிச்சைக்கு பயனுள்ளதாக இருக்கும்.ஃப்ளோரசன்ஸின் தீவிரம் மற்றும் செல் எண்ணிக்கையின் அடிப்படையில் இணைக்கப்பட்ட பகுதியின் அளவீட்டின் அடிப்படையில், மற்ற அடி மூலக்கூறுகளுடன் ஒப்பிடும்போது அனைத்து உயிரியல் பொருட்களுக்கும் LOIS சிறந்த ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகளைக் காட்டுகிறது என்பதை உறுதிப்படுத்தினோம்.இன் விட்ரோ சோதனைகளின் முடிவுகளின்படி, எலும்பியல் உள்வைப்புகளுக்கு ஆன்டி-பயாலாஜிக்கல் ஃபவுலிங் LOIS ஐப் பயன்படுத்தலாம், இது பயோஃபில்ம் பாக்டீரியாவால் ஏற்படும் தொற்றுநோயைத் தடுப்பது மட்டுமல்லாமல், உடலின் செயலில் உள்ள நோயெதிர்ப்பு மண்டலத்தால் ஏற்படும் வீக்கத்தையும் குறைக்கும்.
(A) 12 மற்றும் 72 மணிநேரங்களுக்கு சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா மற்றும் MRSA இடைநீக்கங்களில் அடைகாக்கப்பட்ட ஒவ்வொரு குழுவின் (நிர்வாண, பொறிக்கப்பட்ட, SHP மற்றும் LOIS) ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கி படங்கள்.(B) ஒவ்வொரு குழுவின் மேற்பரப்பிலும் சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா மற்றும் MRSA ஆகியவற்றின் பின்பற்றும் CFU எண்ணிக்கை.(C) குறுகிய கால மற்றும் நீண்ட கால செதுக்கல், SHP மற்றும் LOIS இன் உயிரியல் எதிர்ப்பு கறைபடிதல் பொறிமுறையின் திட்ட வரைபடம்.(D) (1) ஒவ்வொரு அடி மூலக்கூறு மற்றும் ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கி படங்களுடன் ஒட்டியிருக்கும் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்களின் எண்ணிக்கை வெற்று மற்றும் LOIS உடன் ஒட்டிய செல்கள்.(2) எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டில் ஈடுபட்டுள்ள நோயெதிர்ப்பு தொடர்பான புரதங்கள், அல்புமின் மற்றும் கால்சியம் ஆகியவற்றின் ஒட்டுதல் சோதனை (* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001 மற்றும் **** P <0.0001).ns, முக்கியமில்லை.
தவிர்க்க முடியாத செறிவூட்டப்பட்ட அழுத்தங்களின் விஷயத்தில், எந்திரவியல் ஆயுள் எப்பொழுதும் எதிர்ப்புப் பூச்சுகளைப் பயன்படுத்துவதற்கான முக்கிய சவாலாக இருந்து வருகிறது.பாரம்பரிய கழிவுநீர் எதிர்ப்பு ஜெல் முறைகள் குறைந்த நீரில் கரையும் தன்மை மற்றும் உடையக்கூடிய தன்மை கொண்ட பாலிமர்களை அடிப்படையாகக் கொண்டவை.எனவே, அவை பொதுவாக உயிரியல் மருத்துவப் பயன்பாடுகளில் இயந்திர அழுத்தத்திற்கு ஆளாகின்றன.எனவே, எலும்பியல் உள்வைப்புகள் (43, 44) போன்ற பயன்பாடுகளுக்கு இயந்திர ரீதியில் நீடித்த ஆண்டிஃபவுலிங் பூச்சுகள் சவாலாக இருக்கின்றன.எலும்பியல் உள்வைப்புகளுக்கு பயன்படுத்தப்படும் இரண்டு முக்கிய வகையான அழுத்தங்களை படம் 4A(1) காட்டுகிறது, இதில் கீறல் (வெட்டி அழுத்தம்) மற்றும் ஃபோர்செப்ஸ் மூலம் உருவாக்கப்பட்ட சேதமடைந்த உள்வைப்பின் ஒளியியல் படத்துடன் சுருக்கம் ஆகியவை அடங்கும்.எடுத்துக்காட்டாக, திருகு ஒரு ஸ்க்ரூடிரைவரால் இறுக்கப்படும்போது அல்லது அறுவை சிகிச்சை நிபுணர் எலும்புத் தகட்டை சாமணம் கொண்டு இறுக்கமாகப் பிடித்து அழுத்தும் சக்தியைப் பயன்படுத்தும்போது, ​​பிளாஸ்டிக் எலும்புத் தகடு சேதமடைந்து மேக்ரோ மற்றும் மைக்ரோ/நானோ செதில்கள் இரண்டிலும் கீறப்படும் (படம் 4A, 2) .பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சையின் போது தயாரிக்கப்பட்ட LOIS இந்த சேதங்களைத் தாங்குமா என்பதைச் சோதிப்பதற்காக, நுண்ணிய/நானோ கட்டமைப்பின் தாக்கத்தின் இயந்திர பண்புகளை ஆய்வு செய்வதற்காக, வெற்று அடி மூலக்கூறு மற்றும் LOIS இன் கடினத்தன்மையை மைக்ரோ/நானோ அளவில் ஒப்பிட்டு நானோஇன்டென்டேஷன் செய்யப்பட்டது (படம். 4B).மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்புகள் இருப்பதால் LOIS இன் வெவ்வேறு சிதைவு நடத்தையை திட்ட வரைபடம் காட்டுகிறது.நானோஇன்டென்டேஷன் முடிவுகளின் அடிப்படையில் ஒரு விசை-இடப்பெயர்ச்சி வளைவு வரையப்பட்டது (படம் 4 சி).நீலப் படம் வெற்று அடி மூலக்கூறைக் குறிக்கிறது, இது 0.26-மைக்ரான் அதிகபட்ச உள்தள்ளல் ஆழத்தால் காணப்படுவது போல் சிறிய சிதைவை மட்டுமே காட்டுகிறது.மறுபுறம், LOIS (சிவப்பு வளைவு) இல் காணப்பட்ட நானோஇன்டென்டேஷன் விசையின் படிப்படியான அதிகரிப்பு மற்றும் இடப்பெயர்ச்சி ஆகியவை குறைக்கப்பட்ட இயந்திர பண்புகளின் அறிகுறிகளைக் காட்டக்கூடும், இதன் விளைவாக 1.61μm நானோஇன்டென்டேஷன் ஆழம் ஏற்படுகிறது.ஏனென்றால், LOIS இல் இருக்கும் மைக்ரோ/நானோ அமைப்பு நானோஇன்டெண்டரின் முனைக்கு ஒரு ஆழமான முன்னேற்ற இடத்தை வழங்குகிறது, எனவே அதன் சிதைவு வெறும் அடி மூலக்கூறை விட அதிகமாக உள்ளது.கான்ஸ்டா-க்டூடோஸ் மற்றும் பலர்.(45) நானோ கட்டமைப்புகள் இருப்பதால், நானோஇன்டென்டேஷன் மற்றும் மைக்ரோ/நானோ கடினத்தன்மை ஆகியவை ஒழுங்கற்ற நானோஇன்டென்டேஷன் வளைவுகளுக்கு வழிவகுக்கும் என்று நம்புகிறார்.நிழலாடிய பகுதியானது நானோ கட்டமைப்பிற்குக் காரணமான ஒழுங்கற்ற சிதைவு வளைவுடன் ஒத்திருக்கிறது, அதே சமயம் நிழல் இல்லாத பகுதி நுண் கட்டமைப்பிற்குக் காரணமாகும்.இந்த சிதைவு, ஹோல்டிங் லூப்ரிகண்டின் நுண் கட்டமைப்பு/நானோ கட்டமைப்பை சேதப்படுத்தலாம் மற்றும் அதன் கறைபடிதல் எதிர்ப்பு செயல்திறனை எதிர்மறையாக பாதிக்கலாம்.LOIS இல் ஏற்படும் சேதத்தின் தாக்கத்தை ஆய்வு செய்வதற்காக, பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சையின் போது மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்புகளுக்கு தவிர்க்க முடியாத சேதம் உடலில் பிரதிபலித்தது.இரத்தம் மற்றும் புரோட்டீன் ஒட்டுதல் சோதனைகளைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், சோதனைக்குப் பிறகு LOIS இன் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகளின் நிலைத்தன்மையை தீர்மானிக்க முடியும் (படம் 4D).ஒவ்வொரு அடி மூலக்கூறின் துளைகளுக்கு அருகில் ஏற்பட்ட சேதத்தை ஆப்டிகல் படங்களின் தொடர் காட்டுகிறது.ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பூச்சு மீது இயந்திர சேதத்தின் விளைவை நிரூபிக்க இரத்த ஒட்டுதல் சோதனை செய்யப்பட்டது (படம் 4E).SHP ஐப் போலவே, கறைபடிதல் எதிர்ப்பு பண்புகள் சேதத்தின் காரணமாக இழக்கப்படுகின்றன, மேலும் LOIS இரத்தத்தை விரட்டுவதன் மூலம் சிறந்த கறைபடிதல் பண்புகளை வெளிப்படுத்துகிறது.ஏனென்றால், சேதமடைந்த பகுதியை உள்ளடக்கிய தந்துகி நடவடிக்கையால் மேற்பரப்பு ஆற்றல் இயக்கப்படுவதால், நுண்கட்டமைக்கப்பட்ட மசகு எண்ணெய் லூப்ரிகண்டில் உள்ள ஓட்டம் கறைபடிதல் எதிர்ப்பு பண்புகளை மீட்டெடுக்கிறது (35).அல்புமினைப் பயன்படுத்தி புரத ஒட்டுதல் சோதனையிலும் இதே போக்கு காணப்பட்டது.சேதமடைந்த பகுதியில், SHP இன் மேற்பரப்பில் புரதத்தின் ஒட்டுதல் பரவலாகக் காணப்படுகிறது, மேலும் அதன் பரப்பளவை அளவிடுவதன் மூலம், இது வெற்று அடி மூலக்கூறின் ஒட்டுதல் மட்டத்தில் பாதியாக அளவிடப்படுகிறது.மறுபுறம், LOIS அதன் ஆண்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகளை ஒட்டுதலை ஏற்படுத்தாமல் பராமரித்தது (படம் 4, எஃப் மற்றும் ஜி).கூடுதலாக, திருகு மேற்பரப்பு பெரும்பாலும் துளையிடுதல் போன்ற வலுவான இயந்திர அழுத்தத்திற்கு உட்பட்டது, எனவே LOIS பூச்சு இன் விட்ரோவில் அப்படியே இருக்கும் திறனை நாங்கள் ஆய்வு செய்தோம்.படம் 4H வெற்று, SHP மற்றும் LOIS உட்பட பல்வேறு திருகுகளின் ஒளியியல் படங்களைக் காட்டுகிறது.சிவப்பு செவ்வகமானது எலும்பு பொருத்துதலின் போது வலுவான இயந்திர அழுத்தம் ஏற்படும் இலக்கு பகுதியைக் குறிக்கிறது.பிளேட்டின் புரத ஒட்டுதல் சோதனையைப் போலவே, வலுவான இயந்திர அழுத்தத்தின் கீழும் கூட, LOIS பூச்சுகளின் ஒருமைப்பாட்டை நிரூபிக்க, புரத ஒட்டுதலைப் படம்பிடிக்கவும், கவரேஜ் பகுதியை அளவிடவும் ஒரு ஒளிரும் நுண்ணோக்கி பயன்படுத்தப்படுகிறது (படம் 4, I மற்றும் J).LOIS-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட திருகுகள் சிறந்த கறைபடிந்த எதிர்ப்பு செயல்திறனை வெளிப்படுத்துகின்றன, மேலும் கிட்டத்தட்ட எந்த புரதமும் மேற்பரப்புடன் ஒட்டவில்லை.மறுபுறம், வெற்று திருகுகள் மற்றும் SHP திருகுகளில் புரத ஒட்டுதல் காணப்பட்டது, அங்கு SHP திருகுகளின் பரப்பளவு வெறும் திருகுகளில் மூன்றில் ஒரு பங்காக இருந்தது.கூடுதலாக, ஃபிக்ஸேஷனுக்குப் பயன்படுத்தப்படும் எலும்பியல் உள்வைப்பு, படம் 4K இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, எலும்பு முறிவு தளத்தில் பயன்படுத்தப்படும் அழுத்தத்தைத் தாங்கும் வகையில் இயந்திர ரீதியாக வலுவாக இருக்க வேண்டும்.எனவே, இயந்திர பண்புகளில் இரசாயன மாற்றத்தின் விளைவை தீர்மானிக்க வளைக்கும் சோதனை செய்யப்பட்டது.கூடுதலாக, உள்வைப்பிலிருந்து நிலையான அழுத்தத்தை பராமரிக்க இது செய்யப்படுகிறது.உள்வைப்பு முழுவதுமாக மடிக்கப்பட்டு, அழுத்த-திரிபு வளைவு கிடைக்கும் வரை செங்குத்து இயந்திர சக்தியைப் பயன்படுத்தவும் (படம் 4L, 1).யங்கின் மாடுலஸ் மற்றும் ஃப்ளெக்சுரல் வலிமை உள்ளிட்ட இரண்டு பண்புகள் வெற்று மற்றும் LOIS அடி மூலக்கூறுகளுக்கு இடையில் அவற்றின் இயந்திர வலிமையின் குறிகாட்டிகளாக ஒப்பிடப்பட்டன (படம் 4L, 2 மற்றும் 3).யங்கின் மாடுலஸ் என்பது ஒரு பொருளின் இயந்திர மாற்றங்களைத் தாங்கும் திறனைக் குறிக்கிறது.ஒவ்வொரு அடி மூலக்கூறின் யங்கின் மாடுலஸ் முறையே 41.48±1.01 மற்றும் 40.06±0.96 GPa ஆகும்;கவனிக்கப்பட்ட வேறுபாடு சுமார் 3.4% ஆகும்.கூடுதலாக, பொருளின் கடினத்தன்மையை நிர்ணயிக்கும் வளைக்கும் வலிமையானது, வெற்று அடி மூலக்கூறுக்கு 102.34±1.51 GPa மற்றும் SHPக்கு 96.99±0.86 GPa ஆகும்.வெற்று அடி மூலக்கூறு தோராயமாக 5.3% அதிகமாக உள்ளது.இயந்திர பண்புகளில் சிறிய குறைவு உச்சநிலை விளைவு காரணமாக இருக்கலாம்.உச்சநிலை விளைவில், மைக்ரோ/நானோ கரடுமுரடான குறிப்புகளின் தொகுப்பாக செயல்படலாம், இது உள்ளூர் அழுத்த செறிவுக்கு வழிவகுக்கும் மற்றும் உள்வைப்பின் இயந்திர பண்புகளை பாதிக்கிறது (46).இருப்பினும், மனிதனின் கார்டிகல் எலும்பின் விறைப்புத்தன்மை 7.4 மற்றும் 31.6 GPa க்கு இடையில் இருப்பதாகவும், அளவிடப்பட்ட LOIS மாடுலஸ் மனித கார்டிகல் எலும்பை விட அதிகமாக இருப்பதாகவும் (47) கூறப்பட்டதன் அடிப்படையில், LOIS எலும்பு முறிவை ஆதரிக்க போதுமானது மற்றும் அதன் ஒட்டுமொத்த தி இயந்திர பண்புகள் மேற்பரப்பு மாற்றத்தால் மிகக் குறைவாகவே பாதிக்கப்படுகின்றன.
(A) செயல்பாட்டின் போது எலும்பியல் உள்வைப்புக்கு பயன்படுத்தப்படும் இயந்திர அழுத்தம் (1) மற்றும் (2) சேதமடைந்த எலும்பியல் உள்வைப்பின் ஒளியியல் படம்.(B) நானோ-இயந்திர பண்புகளை நானோஇன்டென்டேஷன் மற்றும் வெற்று மேற்பரப்பில் LOIS மூலம் அளவிடும் திட்ட வரைபடம்.(C) வெற்று மேற்பரப்பு மற்றும் LOIS இன் நானோஇன்டென்டேஷன் விசை-இடப்பெயர்ச்சி வளைவு.(D) இன் விட்ரோ பரிசோதனைகளுக்குப் பிறகு, அறுவை சிகிச்சையின் போது ஏற்படும் இயந்திர அழுத்தத்தை உருவகப்படுத்த, பல்வேறு வகையான எலும்பியல் தகடுகளின் ஒளியியல் படங்களை உருவகப்படுத்தவும் (சேதமடைந்த பகுதி சிவப்பு செவ்வகத்துடன் சிறப்பிக்கப்படுகிறது).(இ) சேதமடைந்த எலும்பியல் தட்டு குழுவின் இரத்த ஒட்டுதல் சோதனை மற்றும் (எஃப்) புரத ஒட்டுதல் சோதனை.(G) தட்டில் ஒட்டியிருக்கும் புரதத்தின் பரப்பளவை அளவிடவும்.(H) இன் விட்ரோ பரிசோதனைக்குப் பிறகு பல்வேறு வகையான எலும்பியல் திருகுகளின் ஒளியியல் படங்கள்.(I) வெவ்வேறு பூச்சுகளின் ஒருமைப்பாட்டை ஆய்வு செய்ய புரத ஒட்டுதல் சோதனை.(J) திருகு ஒட்டிய புரதத்தின் பரப்பளவை அளவிடவும்.(கே) முயலின் அசைவு முறிந்த எலும்பில் நிலையான அழுத்தத்தை உருவாக்குவதை நோக்கமாகக் கொண்டது.(எல்) (1) வளைப்பதற்கு முன்னும் பின்னும் சோதனை முடிவுகள் மற்றும் ஆப்டிகல் படங்களை வளைக்கவும்.(2) யங்கின் மாடுலஸ் மற்றும் (3) வெற்று உள்வைப்புக்கும் SHPக்கும் இடையே உள்ள வளைக்கும் வலிமை.தரவு சராசரி ± SD (*P <0.05, **P <0.01, ***P<0.001 மற்றும் ****P <0.0001) என வெளிப்படுத்தப்படுகிறது.பட உதவி: Kyomin Chae, Yonsei பல்கலைக்கழகம்.
மருத்துவ சூழ்நிலைகளில், உயிரியல் பொருட்கள் மற்றும் காயப்பட்ட இடங்களுடனான பெரும்பாலான பாக்டீரியா தொடர்பு முதிர்ந்த, முதிர்ந்த உயிரிப்படங்களிலிருந்து வருகிறது (48).எனவே, நோய் கட்டுப்பாடு மற்றும் தடுப்புக்கான அமெரிக்க மையங்கள் மனித நோய்த்தொற்றுகளில் 65% உயிரிப்படங்களுடன் தொடர்புடையவை என்று மதிப்பிடுகிறது (49).இந்த வழக்கில், உள்வைப்பின் மேற்பரப்பில் நிலையான பயோஃபில்ம் உருவாக்கத்தை வழங்கும் இன் விவோ சோதனை வடிவமைப்பை வழங்குவது அவசியம்.எனவே, முயல் தொடை எலும்பு முறிவு மாதிரியை நாங்கள் உருவாக்கினோம், அதில் எலும்பியல் உள்வைப்புகள் ஒரு பாக்டீரியா இடைநீக்கத்தில் முன்கூட்டியே அடைக்கப்பட்டு, பின்னர் விவோவில் LOIS இன் கறைபடிதல் எதிர்ப்பு பண்புகளை ஆய்வு செய்ய முயல் தொடை எலும்புகளில் பொருத்தப்பட்டன.பின்வரும் மூன்று முக்கிய உண்மைகள் காரணமாக, பாக்டீரியா தொற்றுகள், பாக்டீரியல் இடைநீக்கங்களை நேரடியாக உட்செலுத்துவதை விட, முன் கலாச்சாரத்தால் தூண்டப்படுகின்றன: (i) முயல்களின் நோயெதிர்ப்பு அமைப்பு இயற்கையாகவே மனிதர்களை விட வலிமையானது;எனவே, பாக்டீரியல் இடைநீக்கங்கள் மற்றும் பிளாங்க்டோனிக் பாக்டீரியாவை உட்செலுத்துவது சாத்தியமாகும், இது உயிரிப்படங்களின் உருவாக்கத்தில் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தாது.(Ii) பிளாங்க்டோனிக் பாக்டீரியா நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளுக்கு மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படுகிறது, மேலும் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகள் பொதுவாக அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு பயன்படுத்தப்படுகின்றன;இறுதியாக, (iii) பிளாங்க்டோனிக் பாக்டீரியா சஸ்பென்ஷன் விலங்குகளின் உடல் திரவங்களால் நீர்த்தப்படலாம் (50).உள்வைப்புக்கு முன் ஒரு பாக்டீரியா சஸ்பென்ஷனில் உள்வைப்பை முன்கூட்டியே வளர்ப்பதன் மூலம், எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டில் பாக்டீரியா தொற்று மற்றும் வெளிநாட்டு உடல் எதிர்வினை (FBR) ஆகியவற்றின் தீங்கு விளைவிக்கும் விளைவுகளை நாம் முழுமையாக ஆய்வு செய்யலாம்.பொருத்தப்பட்ட 4 வாரங்களுக்குப் பிறகு முயல்கள் பலியிடப்பட்டன, ஏனெனில் எலும்புகளை குணப்படுத்தும் செயல்முறைக்கு அவசியமான ஒசியோஇன்டெக்ரேஷன் 4 வாரங்களுக்குள் முடிக்கப்படும்.பின்னர், கீழ்நிலை ஆய்வுகளுக்காக முயல்களிலிருந்து உள்வைப்புகள் அகற்றப்பட்டன.படம் 5A பாக்டீரியாவின் பெருக்கம் பொறிமுறையைக் காட்டுகிறது.பாதிக்கப்பட்ட எலும்பியல் உள்வைப்பு உடலில் அறிமுகப்படுத்தப்படுகிறது.பாக்டீரியல் சஸ்பென்ஷனில் முன் அடைகாத்ததன் விளைவாக, நிர்வாண உள்வைப்புகள் மூலம் பொருத்தப்பட்ட ஆறு முயல்களில் ஆறு நோய்த்தொற்றுக்கு உள்ளானது, அதே நேரத்தில் LOIS-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட உள்வைப்புகள் மூலம் பொருத்தப்பட்ட முயல்கள் எதுவும் பாதிக்கப்படவில்லை.வளர்ச்சி, முதிர்ச்சி மற்றும் சிதறல் (51) உள்ளிட்ட மூன்று படிகளில் பாக்டீரியா தொற்றுகள் தொடர்கின்றன.முதலில், இணைக்கப்பட்ட பாக்டீரியாக்கள் மேற்பரப்பில் இனப்பெருக்கம் செய்து வளரும், பின்னர் பாக்டீரியாக்கள் எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் பாலிமர் (இபிஎஸ்), அமிலாய்டு மற்றும் எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் டிஎன்ஏவை வெளியேற்றும் போது ஒரு உயிரியலை உருவாக்குகின்றன.பயோஃபில்ம் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளின் ஊடுருவலில் குறுக்கிடுவது மட்டுமல்லாமல், ஆண்டிபயாடிக்-சிதைக்கும் நொதிகளின் (β-லாக்டமேஸ் போன்றவை) (52) திரட்சியை ஊக்குவிக்கிறது.இறுதியாக, பயோஃபில்ம் முதிர்ந்த பாக்டீரியாவை சுற்றியுள்ள திசுக்களில் பரவுகிறது.அதனால் தொற்று ஏற்படுகிறது.கூடுதலாக, ஒரு வெளிநாட்டு உடல் உடலில் நுழையும் போது, ​​வலுவான நோய் எதிர்ப்பு சக்தியை ஏற்படுத்தும் ஒரு தொற்று கடுமையான வீக்கம், வலி ​​மற்றும் நோய் எதிர்ப்பு சக்தியை குறைக்கும்.படம் 5B, பாக்டீரியா தொற்று காரணமாக ஏற்படும் நோய் எதிர்ப்பு சக்தியைக் காட்டிலும், எலும்பியல் உள்வைப்பைச் செருகுவதால் ஏற்படும் FBR இன் மேலோட்டத்தை வழங்குகிறது.நோயெதிர்ப்பு அமைப்பு செருகப்பட்ட உள்வைப்பை ஒரு வெளிநாட்டு உடலாக அங்கீகரிக்கிறது, பின்னர் செல்கள் மற்றும் திசுக்கள் வெளிநாட்டு உடலை இணைக்க வினைபுரியச் செய்கிறது (53).FBR இன் ஆரம்ப நாட்களில், எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் மேற்பரப்பில் சப்ளை மேட்ரிக்ஸ் உருவாக்கப்பட்டது, இதன் விளைவாக ஃபைப்ரினோஜனின் உறிஞ்சுதல் ஏற்பட்டது.உறிஞ்சப்பட்ட ஃபைப்ரினோஜென் பின்னர் மிகவும் அடர்த்தியான ஃபைப்ரின் நெட்வொர்க்கை உருவாக்குகிறது, இது லுகோசைட்டுகளின் இணைப்பை ஊக்குவிக்கிறது (54).ஃபைப்ரின் நெட்வொர்க் உருவானவுடன், நியூட்ரோபில்களின் ஊடுருவல் காரணமாக கடுமையான வீக்கம் ஏற்படும்.இந்த கட்டத்தில், கட்டி நெக்ரோசிஸ் காரணி-α (TNF-α), இன்டர்லூகின்-4 (IL-4) மற்றும் IL-β போன்ற பல்வேறு சைட்டோகைன்கள் வெளியிடப்படுகின்றன, மேலும் மோனோசைட்டுகள் உள்வைப்பு தளத்தில் ஊடுருவி மாபெரும் செல்களாக வேறுபடுகின்றன.பேஜ் (41, 55, 56).FBR ஐக் குறைப்பது எப்போதுமே ஒரு சவாலாக உள்ளது, ஏனெனில் அதிகப்படியான FBR கடுமையான மற்றும் நாள்பட்ட அழற்சியை ஏற்படுத்தும், இது ஆபத்தான சிக்கல்களுக்கு வழிவகுக்கும்.வெற்று உள்வைப்பு மற்றும் LOIS ஐச் சுற்றியுள்ள திசுக்களில் பாக்டீரியா தொற்றுகளின் தாக்கத்தை மதிப்பிடுவதற்காக, ஹெமாடாக்சிலின் மற்றும் ஈசின் (H&E) மற்றும் மேசன் ட்ரைக்ரோம் (MT) கறை ஆகியவை பயன்படுத்தப்பட்டன.வெற்று அடி மூலக்கூறுகளுடன் பொருத்தப்பட்ட முயல்களுக்கு, கடுமையான பாக்டீரியா தொற்றுகள் முன்னேறின, மேலும் H&E திசு ஸ்லைடுகள் வீக்கத்தால் ஏற்படும் புண்கள் மற்றும் நசிவுகளை தெளிவாகக் காட்டியது.மறுபுறம், மிகவும் வலுவான ஆன்டி-பயோஃபுலிங் மேற்பரப்பு LOIS பாக்டீரியா ஒட்டுதலைத் தடுக்கிறது, எனவே இது நோய்த்தொற்றின் அறிகுறிகளைக் காட்டாது மற்றும் வீக்கத்தைக் குறைக்கிறது (படம் 5 சி).MT ஸ்டைனிங்கின் முடிவுகள் அதே போக்கைக் காட்டின.இருப்பினும், LOIS உடன் பொருத்தப்பட்ட முயல்களில் எடிமாவை எம்டி கறை படிந்ததைக் காட்டியது, இது மீட்பு ஏற்படப் போகிறது என்பதைக் குறிக்கிறது (படம் 5 டி).நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியின் அளவை ஆய்வு செய்வதற்காக, நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியுடன் தொடர்புடைய சைட்டோகைன்கள் TNF-α மற்றும் IL-6 ஐப் பயன்படுத்தி இம்யூனோஹிஸ்டோகெமிக்கல் (IHC) கறை படிதல் செய்யப்பட்டது.பாக்டீரியாவுக்கு வெளிப்படாத ஒரு நிர்வாண எதிர்மறை உள்வைப்பு பாக்டீரியாவுக்கு வெளிப்படும் LOIS உடன் ஒப்பிடப்பட்டது, ஆனால் பாக்டீரியா தொற்று இல்லாத நிலையில் குணப்படுத்தும் செயல்முறையை ஆய்வு செய்ய தொற்று இல்லை.TNF-α ஐ வெளிப்படுத்தும் IHC ஸ்லைடின் ஆப்டிகல் படத்தை படம் 5E காட்டுகிறது.பழுப்பு நிற பகுதியானது நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியைக் குறிக்கிறது, இது LOIS இல் நோயெதிர்ப்பு பதில் சிறிது குறைக்கப்படுவதைக் குறிக்கிறது.கூடுதலாக, LOIS இல் IL-6 இன் வெளிப்பாடு மலட்டு நிர்வாணத்தின் எதிர்மறை வெளிப்பாட்டைக் காட்டிலும் கணிசமாகக் குறைவாக இருந்தது (படம் 5F).சைட்டோகைனின் வெளிப்பாடு சைட்டோகைனுடன் தொடர்புடைய ஆன்டிபாடி கறையின் பகுதியை அளவிடுவதன் மூலம் அளவிடப்பட்டது (படம் 5 ஜி).எதிர்மறை உள்வைப்புகளுக்கு வெளிப்படும் முயல்களுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​LOIS உடன் பொருத்தப்பட்ட முயல்களின் வெளிப்பாடு நிலைகள் குறைவாக இருந்தன, இது அர்த்தமுள்ள வேறுபாட்டைக் காட்டுகிறது.சைட்டோகைன் வெளிப்பாட்டின் குறைவு, LOIS இன் நீண்டகால, நிலையான கறைபடிதல் எதிர்ப்பு பண்புகள் பாக்டீரியா நோய்த்தொற்றுகளைத் தடுப்பதோடு மட்டுமல்லாமல், FBR இன் குறைப்புடனும் தொடர்புடையது என்பதைக் குறிக்கிறது, இது அடி மூலக்கூறுடன் ஒட்டிக்கொண்டிருக்கும் மேக்ரோபேஜ்களால் தூண்டப்படுகிறது (53, 57, 58).எனவே, LOIS இன் நோயெதிர்ப்பு ஏய்ப்பு பண்புகள் காரணமாக குறைக்கப்பட்ட நோயெதிர்ப்பு மறுமொழி, பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு அதிகப்படியான நோயெதிர்ப்பு பதில் போன்ற உள்வைப்புக்குப் பிறகு பக்க விளைவுகளைத் தீர்க்கலாம்.
(A) பயோஃபில்ம் உருவாக்கம் மற்றும் பாதிக்கப்பட்ட எலும்பியல் உள்வைப்பின் மேற்பரப்பில் பரவும் வழிமுறையின் திட்ட வரைபடம்.ஈடிஎன்ஏ, எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் டிஎன்ஏ.(B) எலும்பியல் உள்வைப்பு செருகப்பட்ட பிறகு நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியின் திட்ட வரைபடம்.(C) H&E கறை படிதல் மற்றும் (D) எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் சுற்றியுள்ள திசுக்களின் MT கறை மற்றும் வெற்று நேர்மறை மற்றும் LOIS.நோயெதிர்ப்பு தொடர்பான சைட்டோகைன்களின் IHC (E) TNF-α மற்றும் (F) IL-6 ஆகியவை நிர்வாண-எதிர்மறை மற்றும் LOIS- பொருத்தப்பட்ட முயல்களின் படிந்த படிமங்களாகும்.(ஜி) பகுதி கவரேஜ் அளவீடு மூலம் சைட்டோகைன் வெளிப்பாட்டின் அளவீடு (** பி <0.01).
LOIS இன் உயிர் இணக்கத்தன்மை மற்றும் எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டில் அதன் விளைவு ஆகியவை கண்டறியும் இமேஜிங் [x-ray மற்றும் மைக்ரோ-கம்ப்யூட்டட் டோமோகிராபி (CT)] மற்றும் ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட் IHC ஐப் பயன்படுத்தி விவோவில் ஆய்வு செய்யப்பட்டது.படம் 6A மூன்று வெவ்வேறு நிலைகளை உள்ளடக்கிய எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையைக் காட்டுகிறது: வீக்கம், பழுது மற்றும் மறுவடிவமைப்பு.எலும்பு முறிவு ஏற்பட்டால், அழற்சி செல்கள் மற்றும் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்கள் உடைந்த எலும்பில் ஊடுருவி வாஸ்குலர் திசுக்களில் வளர ஆரம்பிக்கும்.பழுதுபார்க்கும் கட்டத்தில், வாஸ்குலர் திசுக்களின் வளர்ச்சி எலும்பு முறிவு இடத்திற்கு அருகில் பரவுகிறது.வாஸ்குலர் திசு புதிய எலும்பு உருவாவதற்கு ஊட்டச்சத்துக்களை வழங்குகிறது, இது கால்ஸ் என்று அழைக்கப்படுகிறது.எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையின் இறுதி கட்டம் மறுவடிவமைப்பு கட்டமாகும், இதில் கால்சஸின் அளவு சாதாரண எலும்பின் அளவிற்கு குறைக்கப்படுகிறது, இது செயல்படுத்தப்பட்ட ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட்களின் அளவை அதிகரிப்பதன் மூலம் (59).எலும்பு முறிவு தளத்தின் முப்பரிமாண (3D) புனரமைப்பு, ஒவ்வொரு குழுவிலும் கால்சஸ் உருவாக்கத்தின் மட்டத்தில் உள்ள வேறுபாடுகளைக் கவனிக்க மைக்ரோ-சிடி ஸ்கேன்களைப் பயன்படுத்தி செய்யப்பட்டது.எலும்பு முறிந்த எலும்பைச் சுற்றியுள்ள கால்சஸின் தடிமனைக் காண தொடை எலும்பின் குறுக்குவெட்டைக் கவனிக்கவும் (படம் 6, பி மற்றும் சி).ஒவ்வொரு குழுவிலும் உள்ள வெவ்வேறு எலும்பு மீளுருவாக்கம் செயல்முறைகளைக் கவனிக்க ஒவ்வொரு வாரமும் அனைத்து குழுக்களின் எலும்பு முறிவு தளங்களையும் ஆய்வு செய்ய எக்ஸ்-கதிர்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன (படம் S9).கால்சஸ் மற்றும் முதிர்ந்த எலும்புகள் முறையே நீலம்/பச்சை மற்றும் தந்தத்தில் காட்டப்படுகின்றன.பெரும்பாலான மென்மையான திசுக்கள் முன்னமைக்கப்பட்ட வாசலில் வடிகட்டப்படுகின்றன.நிர்வாண நேர்மறை மற்றும் SHP எலும்பு முறிவு இடத்தைச் சுற்றி ஒரு சிறிய அளவு கால்சஸ் உருவாவதை உறுதிப்படுத்தியது.மறுபுறம், LOIS இன் வெளிப்படும் எதிர்மறை மற்றும் எலும்பு முறிவு தளம் தடித்த கால்சால் சூழப்பட்டுள்ளது.நுண்ணுயிர் CT படங்கள் பாக்டீரியா தொற்று மற்றும் தொற்று தொடர்பான அழற்சியால் கால்சஸ் உருவாவதற்கு தடையாக இருப்பதைக் காட்டியது.ஏனென்றால், நோயெதிர்ப்பு அமைப்பு எலும்பை மீட்டெடுப்பதை விட நோய்த்தொற்று தொடர்பான வீக்கத்தால் ஏற்படும் செப்டிக் காயங்களை குணப்படுத்துவதற்கு முன்னுரிமை அளிக்கிறது (60).ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட் செயல்பாடு மற்றும் எலும்பு மறுஉருவாக்கம் (படம் 6D) (61) ஆகியவற்றைக் கண்காணிக்க IHC மற்றும் டார்ட்ரேட்-எதிர்ப்பு அமில பாஸ்பேடேஸ் (TRAP) கறை படிதல் செய்யப்பட்டது.ஒரு சில செயல்படுத்தப்பட்ட ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட்கள் ஊதா நிறத்தில் மட்டுமே நிர்வாண நேர்மறை மற்றும் SHP இல் காணப்பட்டன.மறுபுறம், LOIS இன் நிர்வாண நேர்மறை மற்றும் முதிர்ந்த எலும்புகளுக்கு அருகில் பல செயல்படுத்தப்பட்ட ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட்கள் காணப்பட்டன.இந்த நிகழ்வு ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட்களின் முன்னிலையில், எலும்பு முறிவு இடத்தைச் சுற்றியுள்ள கால்சஸ் ஒரு வன்முறை மறுவடிவமைப்பு செயல்முறைக்கு உட்பட்டுள்ளது (62).மைக்ரோ சி.டி ஸ்கேன் மற்றும் ஐ.எச்.சி முடிவுகளைக் கணக்கிட, எலும்பு முறிவுத் தளத்தைச் சுற்றி கால்சஸ் உருவாவதை ஒப்பிட்டு, கால்சஸின் எலும்பு அளவு மற்றும் ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட் வெளிப்பாடு பகுதி அளவிடப்பட்டது (படம் 6E, 1 மற்றும் 2).எதிர்பார்த்தபடி, LOIS இல் நிர்வாண எதிர்மறைகள் மற்றும் கால்சஸ் உருவாக்கம் மற்ற குழுக்களை விட கணிசமாக அதிகமாக இருந்தது, இது நேர்மறை எலும்பு மறுவடிவமைப்பு நிகழ்ந்ததைக் குறிக்கிறது (63).படம் S10 அறுவைசிகிச்சை தளத்தின் ஒளியியல் படம், திருகுக்கு அருகில் சேகரிக்கப்பட்ட திசுக்களின் MT கறை முடிவு மற்றும் திருகு-எலும்பு இடைமுகத்தை முன்னிலைப்படுத்தும் TRAP கறை முடிவு ஆகியவற்றைக் காட்டுகிறது.வெற்று அடி மூலக்கூறில், வலுவான கால்சஸ் மற்றும் ஃபைப்ரோஸிஸ் உருவாக்கம் காணப்பட்டது, அதே நேரத்தில் LOIS-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட உள்வைப்பு ஒப்பீட்டளவில் ஒட்டப்படாத மேற்பரப்பைக் காட்டியது.இதேபோல், நிர்வாண எதிர்மறைகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​வெள்ளை அம்புகளால் சுட்டிக்காட்டப்பட்டபடி, LOIS உடன் பொருத்தப்பட்ட முயல்களில் குறைந்த ஃபைப்ரோஸிஸ் காணப்பட்டது.கூடுதலாக, உறுதியான எடிமா (நீல அம்பு) LOIS இன் நோயெதிர்ப்பு ஏய்ப்பு பண்புகளுக்கு காரணமாக இருக்கலாம், இதனால் கடுமையான வீக்கத்தைக் குறைக்கிறது.உள்வைப்பைச் சுற்றியுள்ள ஒட்டாத மேற்பரப்பு மற்றும் குறைக்கப்பட்ட ஃபைப்ரோஸிஸ் அகற்றும் செயல்முறை எளிதானது என்று கூறுகிறது, இது பொதுவாக மற்ற எலும்பு முறிவுகள் அல்லது வீக்கத்தில் விளைகிறது.திருகு அகற்றப்பட்ட பிறகு எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறை திருகு-எலும்பு இடைமுகத்தில் ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட் செயல்பாட்டால் மதிப்பிடப்பட்டது.வெற்று எலும்பு மற்றும் LOIS உள்வைப்பு இடைமுகம் இரண்டும் எலும்புகளை மேலும் குணப்படுத்துவதற்கு ஒத்த அளவிலான ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட்களை உறிஞ்சி, LOIS பூச்சு எலும்பு குணப்படுத்துதல் அல்லது நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியில் எதிர்மறையான விளைவைக் கொண்டிருக்கவில்லை என்பதைக் குறிக்கிறது.LOIS இல் செய்யப்படும் மேற்பரப்பு மாற்றம் எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டில் தலையிடாது என்பதை உறுதிப்படுத்த, எக்ஸ்ரே பரிசோதனையானது முயல்களின் எலும்பு குணப்படுத்துதலை வெளிப்படும் எதிர்மறை அயனிகள் மற்றும் 6 வார LOIS பொருத்துதலுடன் ஒப்பிட பயன்படுத்தப்பட்டது (படம் 6F).நோய்த்தொற்று இல்லாத நிர்வாண நேர்மறை குழுவோடு ஒப்பிடும்போது, ​​LOIS எலும்பு சிகிச்சையின் அதே அளவைக் காட்டியது, மேலும் இரு குழுக்களிலும் எலும்பு முறிவு (தொடர்ச்சியான ஆஸ்டியோலிசிஸ் கோடு) வெளிப்படையான அறிகுறிகள் எதுவும் இல்லை என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன.
(A) எலும்பு முறிவுக்குப் பிறகு எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையின் திட்ட வரைபடம்.(B) ஒவ்வொரு மேற்பரப்புக் குழுவின் கால்சஸ் உருவாக்கத்தின் அளவு மற்றும் (C) எலும்பு முறிவு தளத்தின் குறுக்கு வெட்டு படம்.(D) ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட் செயல்பாடு மற்றும் எலும்பு மறுஉருவாக்கம் ஆகியவற்றைக் காட்சிப்படுத்த TRAP கறை.TRAP செயல்பாட்டின் அடிப்படையில், கார்டிகல் எலும்பின் வெளிப்புற கால்சஸ் உருவாக்கம் (E) (1) மைக்ரோ-சிடி மற்றும் (2) ஆஸ்டியோக்ளாஸ்ட் செயல்பாடு மூலம் அளவு பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.(எஃப்) பொருத்தப்பட்ட 6 வாரங்களுக்குப் பிறகு, வெளிப்பட்ட எதிர்மறையின் முறிந்த எலும்பின் எக்ஸ்ரே படங்கள் (சிவப்புக் கோடு கொண்ட செவ்வகத்தால் சிறப்பிக்கப்பட்டது) மற்றும் LOIS (நீலக் கோடு கொண்ட செவ்வகத்தால் உயர்த்தப்பட்டது).மாறுபாட்டின் ஒரு வழி பகுப்பாய்வு (ANOVA) மூலம் புள்ளிவிவர பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.* பி <0.05.** பி <0.01.
சுருக்கமாக, LOIS ஆனது ஒரு புதிய வகை பாக்டீரியா எதிர்ப்புத் தொற்று உத்தி மற்றும் எலும்பியல் உள்வைப்புகளுக்கு நோயெதிர்ப்பு தப்பிக்கும் பூச்சு ஆகியவற்றை வழங்குகிறது.SHP செயல்பாட்டுடன் கூடிய வழக்கமான எலும்பியல் உள்வைப்புகள் குறுகிய கால எதிர்ப்பு உயிரியல் பண்புகளை வெளிப்படுத்துகின்றன, ஆனால் நீண்ட காலத்திற்கு அவற்றின் பண்புகளை பராமரிக்க முடியாது.அடி மூலக்கூறின் சூப்பர்ஹைட்ரோபோபசிட்டி பாக்டீரியா மற்றும் அடி மூலக்கூறுக்கு இடையில் காற்று குமிழ்களை பொறிக்கிறது, அதன் மூலம் காற்று பாக்கெட்டுகளை உருவாக்குகிறது, இதனால் பாக்டீரியா தொற்று தடுக்கப்படுகிறது.இருப்பினும், காற்றின் பரவல் காரணமாக, இந்த காற்று பாக்கெட்டுகள் எளிதில் அகற்றப்படுகின்றன.மறுபுறம், பயோஃபில்ம் தொடர்பான நோய்த்தொற்றுகளைத் தடுக்கும் திறனை LOIS நன்கு நிரூபித்துள்ளது.எனவே, அடுக்கு மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்பின் மேற்பரப்பில் செலுத்தப்படும் மசகு எண்ணெய் அடுக்கின் நிராகரிப்பு எதிர்ப்பு பண்புகள் காரணமாக, தொற்று தொடர்பான அழற்சியைத் தடுக்கலாம்.LOIS உற்பத்தி நிலைமைகளை மேம்படுத்த SEM, AFM, XPS மற்றும் CA அளவீடுகள் உள்ளிட்ட பல்வேறு குணாதிசய முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.கூடுதலாக, PLGA, Ti, PE, POM மற்றும் PPSU போன்ற எலும்பியல் பொருத்துதல் கருவிகளில் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் பல்வேறு உயிரியல் பொருட்களுக்கும் LOIS பயன்படுத்தப்படலாம்.பின்னர், பாக்டீரியா மற்றும் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியுடன் தொடர்புடைய உயிரியல் பொருட்களுக்கு எதிராக அதன் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகளை நிரூபிக்க LOIS இன் விட்ரோவில் சோதிக்கப்பட்டது.வெற்று உள்வைப்புடன் ஒப்பிடும்போது இது சிறந்த பாக்டீரியா எதிர்ப்பு மற்றும் ஆன்டி-பயோஃபுலிங் விளைவுகளைக் கொண்டுள்ளது என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன.கூடுதலாக, LOIS இயந்திர அழுத்தத்தைப் பயன்படுத்திய பின்னரும் இயந்திர வலிமையைக் காட்டுகிறது, இது பிளாஸ்டிக் அறுவை சிகிச்சையில் தவிர்க்க முடியாதது.மைக்ரோ/நானோ கட்டமைப்பின் மேற்பரப்பில் லூப்ரிகண்டின் சுய-குணப்படுத்தும் பண்புகள் காரணமாக, LOIS அதன் உயிரியல் எதிர்ப்பு கறைபடிந்த பண்புகளை வெற்றிகரமாக பராமரித்தது.விவோவில் LOIS இன் உயிர் இணக்கத்தன்மை மற்றும் பாக்டீரியா எதிர்ப்பு பண்புகளை ஆய்வு செய்வதற்காக, LOIS 4 வாரங்களுக்கு முயல் தொடை எலும்புக்குள் பொருத்தப்பட்டது.LOIS உடன் பொருத்தப்பட்ட முயல்களில் பாக்டீரியா தொற்று எதுவும் காணப்படவில்லை.கூடுதலாக, IHC இன் பயன்பாடு உள்ளூர் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியின் குறைந்த அளவை நிரூபித்தது, LOIS எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையைத் தடுக்காது என்பதைக் குறிக்கிறது.LOIS சிறந்த பாக்டீரியா எதிர்ப்பு மற்றும் நோயெதிர்ப்பு ஏய்ப்பு பண்புகளை வெளிப்படுத்துகிறது, மேலும் எலும்பியல் அறுவை சிகிச்சைக்கு முன்னும் பின்னும் பயோஃபில்ம் உருவாவதை திறம்பட தடுக்கிறது, குறிப்பாக எலும்பு தொகுப்புக்காக.முயல் எலும்பு மஜ்ஜை அழற்சி தொடை எலும்பு முறிவு மாதிரியைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், முன் அடைகாக்கப்பட்ட உள்வைப்புகளால் தூண்டப்பட்ட எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டில் பயோஃபில்ம் தொடர்பான நோய்த்தொற்றுகளின் விளைவு ஆழமாக ஆய்வு செய்யப்பட்டது.எதிர்கால ஆய்வாக, முழு குணப்படுத்தும் செயல்பாட்டின் போது பயோஃபில்ம் தொடர்பான நோய்த்தொற்றுகளை முழுமையாகப் புரிந்துகொள்வதற்கும் தடுப்பதற்கும் உள்வைப்புக்குப் பிறகு சாத்தியமான தொற்றுநோய்களைப் படிக்க புதிய இன் விவோ மாதிரி தேவைப்படுகிறது.கூடுதலாக, LOIS உடன் ஒருங்கிணைப்பதில் ஆஸ்டியோஇண்டக்ஷன் இன்னும் தீர்க்கப்படாத சவாலாக உள்ளது.சவாலை சமாளிக்க ஆஸ்டியோஇண்டக்டிவ் செல்கள் அல்லது மீளுருவாக்கம் செய்யும் மருந்துகளின் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட ஒட்டுதலை LOIS உடன் இணைக்க மேலும் ஆராய்ச்சி தேவை.ஒட்டுமொத்தமாக, LOIS ஆனது ஒரு நம்பிக்கைக்குரிய எலும்பியல் உள்வைப்பு பூச்சு மற்றும் இயந்திர வலிமை மற்றும் சிறந்த ஆன்டி-பயோஃபுலிங் பண்புகளை பிரதிபலிக்கிறது, இது SSI மற்றும் நோயெதிர்ப்பு பக்க விளைவுகளை குறைக்கும்.
அசுத்தங்களை அகற்ற 15 நிமிடங்களுக்கு 15 மிமீ x 15 மிமீ x 1 மிமீ 304 எஸ்எஸ் அடி மூலக்கூறு (டாங் காங் எம்-டெக் கோ., கொரியா) அசிட்டோன், EtOH மற்றும் DI தண்ணீரில் கழுவவும்.மேற்பரப்பில் ஒரு மைக்ரோ/நானோ-நிலை கட்டமைப்பை உருவாக்க, சுத்தம் செய்யப்பட்ட அடி மூலக்கூறு 50 ° C வெப்பநிலையில் 48% முதல் 51% HF கரைசலில் (DUKSAN Corp., தென் கொரியா) மூழ்கடிக்கப்படுகிறது.பொறித்தல் நேரம் 0 முதல் 60 நிமிடங்கள் வரை மாறுபடும்.பின்னர், பொறிக்கப்பட்ட அடி மூலக்கூறு டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட தண்ணீரில் சுத்தம் செய்யப்பட்டு, மேற்பரப்பில் குரோமியம் ஆக்சைடு செயலற்ற அடுக்கை உருவாக்க 30 நிமிடங்களுக்கு 50 ° C இல் 65% HNO3 (கொரியா DUKSAN கார்ப்.) கரைசலில் வைக்கப்பட்டது.செயலற்ற நிலைக்குப் பிறகு, அடி மூலக்கூறு டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட தண்ணீரில் கழுவப்பட்டு, அடுக்கு அமைப்புடன் ஒரு அடி மூலக்கூறைப் பெற உலர்த்தப்படுகிறது.அடுத்து, அடி மூலக்கூறு ஆக்ஸிஜன் பிளாஸ்மாவுக்கு (100 W, 3 நிமிடங்கள்) வெளிப்பட்டது, உடனடியாக 8.88 mM POTS (சிக்மா-ஆல்ட்ரிச், ஜெர்மனி) கரைசலில் அறை வெப்பநிலையில் 12 மணி நேரம் அறை வெப்பநிலையில் மூழ்கியது.பின்னர், POTS பூசப்பட்ட அடி மூலக்கூறு EtOH உடன் சுத்தம் செய்யப்பட்டு, அடர்த்தியான POTS SAM ஐப் பெற 2 மணி நேரம் 150 ° C இல் இணைக்கப்பட்டது.SAM பூச்சுக்குப் பிறகு, 20 μm/cm 2 ஏற்றும் அளவு கொண்ட perfluoropoliether லூப்ரிகண்டை (Krytox 101; DuPont, USA) பயன்படுத்துவதன் மூலம் அடி மூலக்கூறின் மீது ஒரு மசகு எண்ணெய் அடுக்கு உருவாக்கப்பட்டது.15 நிமிடங்களுக்கு 45° கோணத்தில் சாய்த்து அதிகப்படியான மசகு எண்ணெயை அகற்றவும்.304 SS (லாக்கிங் பிளேட் மற்றும் கார்டிகல் லாக்கிங் ஸ்க்ரூ; டோங் காங் எம்-டெக் கோ., கொரியா) மூலம் செய்யப்பட்ட எலும்பியல் உள்வைப்புகளுக்கும் அதே உற்பத்தி செயல்முறை பயன்படுத்தப்பட்டது.அனைத்து எலும்பியல் உள்வைப்புகளும் முயல் தொடை எலும்பின் வடிவவியலுக்கு ஏற்றவாறு வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன.
அடி மூலக்கூறு மற்றும் எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் மேற்பரப்பு உருவவியல் புல உமிழ்வு SEM (F50, FEI, USA ஐ ஆய்வு) மற்றும் AFM (XE-100, பார்க் சிஸ்டம்ஸ், தென் கொரியா) மூலம் ஆய்வு செய்யப்பட்டது.மேற்பரப்பு கடினத்தன்மை (Ra, Rq) 20 μm பகுதியை 20 μm (n=4) ஆல் பெருக்குவதன் மூலம் அளவிடப்படுகிறது.ஒரு XPS (PHI 5000 VersaProbe, ULVAC PHI, ஜப்பான்) அமைப்பு 100μm2 புள்ளி அளவு கொண்ட அல் Kα எக்ஸ்ரே மூலத்துடன் கூடிய மேற்பரப்பு இரசாயன கலவையை ஆய்வு செய்ய பயன்படுத்தப்பட்டது.திரவ CA மற்றும் SA ஐ அளவிடுவதற்கு டைனமிக் இமேஜ் கேப்சர் கேமரா (SmartDrop, FEMTOBIOMED, ​​தென் கொரியா) பொருத்தப்பட்ட CA அளவீட்டு அமைப்பு பயன்படுத்தப்பட்டது.ஒவ்வொரு அளவீட்டிற்கும், 6 முதல் 10 μl நீர்த்துளிகள் (டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீர், குதிரை இரத்தம், EG, 30% எத்தனால் மற்றும் HD) CA ஐ அளவிட மேற்பரப்பில் வைக்கப்படுகின்றன.அடி மூலக்கூறின் சாய்வு கோணம் 2°/s (n = 4) வேகத்தில் அதிகரிக்கும் போது, ​​துளி விழும் போது SA அளவிடப்படுகிறது.
சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா [அமெரிக்கன் வகை கலாச்சார சேகரிப்பு (ATCC) 27853] மற்றும் MRSA (ATCC 25923) ஆகியவை ATCC (மனாசாஸ், வர்ஜீனியா, அமெரிக்கா) இலிருந்து வாங்கப்பட்டன, மேலும் பங்கு கலாச்சாரம் -80 ° C இல் பராமரிக்கப்பட்டது.பயன்படுத்துவதற்கு முன், உறைந்த கலாச்சாரம் டிரிப்சின்-தாவ்டு சோயாபீன் குழம்பில் (கோமெட், கொரியா) 37 ° C வெப்பநிலையில் 18 மணி நேரம் அடைகாத்து, பின்னர் அதை செயல்படுத்த இரண்டு முறை மாற்றப்பட்டது.அடைகாத்த பிறகு, கலாச்சாரம் 10,000 rpm இல் 10 நிமிடங்களுக்கு 4 ° C இல் மையவிலக்கு செய்யப்பட்டு, PBS (pH 7.3) கரைசலில் இரண்டு முறை கழுவப்பட்டது.மையவிலக்கு கலாச்சாரம் பின்னர் இரத்த அகார் தட்டுகளில் (பிஏபி) துணை கலாச்சாரம் செய்யப்படுகிறது.MRSA மற்றும் சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா ஆகியவை ஒரே இரவில் தயாரிக்கப்பட்டு லூரியா-பெர்டானி குழம்பில் வளர்க்கப்பட்டன.இனோகுலத்தில் சூடோமோனாஸ் ஏருகினோசா மற்றும் எம்ஆர்எஸ்ஏ ஆகியவற்றின் செறிவு, அகார் மீதான தொடர் நீர்த்தங்களில் இடைநீக்கத்தின் CFU ஆல் அளவுரீதியாக தீர்மானிக்கப்பட்டது.பின்னர், பாக்டீரியா செறிவை 0.5 McFarland தரநிலைக்கு சரிசெய்யவும், இது 108 CFU/ml க்கு சமம்.பின்னர் வேலை செய்யும் பாக்டீரியா இடைநீக்கத்தை 100 முறை 106 CFU/mlக்கு நீர்த்துப்போகச் செய்யுங்கள்.பாக்டீரியா எதிர்ப்பு ஒட்டுதல் பண்புகளை சோதிக்க, அடி மூலக்கூறு 121 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 15 நிமிடங்களுக்கு பயன்பாட்டிற்கு முன் கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்டது.அடி மூலக்கூறு பின்னர் 25 மில்லி பாக்டீரியா சஸ்பென்ஷனுக்கு மாற்றப்பட்டு 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 12 மற்றும் 72 மணி நேரம் தீவிரமான குலுக்கலுடன் (200 ஆர்பிஎம்) அடைகாக்கப்பட்டது.அடைகாத்த பிறகு, ஒவ்வொரு அடி மூலக்கூறும் இன்குபேட்டரிலிருந்து அகற்றப்பட்டு, மேற்பரப்பில் ஏதேனும் மிதக்கும் பாக்டீரியாக்களை அகற்ற PBS உடன் 3 முறை கழுவப்பட்டது.அடி மூலக்கூறில் உள்ள பயோஃபில்மைக் கவனிப்பதற்காக, பயோஃபில்ம் மெத்தனால் மூலம் சரி செய்யப்பட்டு, 1 மில்லி கிரிமிடின் ஆரஞ்சு நிறத்தில் 2 நிமிடங்களுக்கு கறைபட்டது.பின்னர் ஒரு ஒளிரும் நுண்ணோக்கி (BX51TR, ஒலிம்பஸ், ஜப்பான்) படிந்த பயோஃபில்மின் படங்களை எடுக்க பயன்படுத்தப்பட்டது.அடி மூலக்கூறில் உள்ள பயோஃபில்மை அளவிட, இணைக்கப்பட்ட செல்கள் அடி மூலக்கூறிலிருந்து பீட் வர்டெக்ஸ் முறையால் பிரிக்கப்பட்டன, இது இணைக்கப்பட்ட பாக்டீரியாக்களை அகற்ற மிகவும் பொருத்தமான முறையாகக் கருதப்பட்டது (n = 4).மலட்டு ஃபோர்செப்ஸைப் பயன்படுத்தி, வளர்ச்சி ஊடகத்திலிருந்து அடி மூலக்கூறை அகற்றி, அதிகப்படியான திரவத்தை அகற்ற கிணறு தட்டைத் தட்டவும்.மலட்டு PBS மூலம் இரண்டு முறை கழுவுவதன் மூலம் தளர்வாக இணைக்கப்பட்ட செல்கள் அகற்றப்பட்டன.ஒவ்வொரு அடி மூலக்கூறும் 9 மில்லி 0.1% புரதம் ept உப்பு (PSW) மற்றும் 2 கிராம் 20 முதல் 25 மலட்டு கண்ணாடி மணிகள் (0.4 முதல் 0.5 மிமீ விட்டம்) கொண்ட ஒரு மலட்டு சோதனைக் குழாய்க்கு மாற்றப்பட்டது.மாதிரியிலிருந்து செல்களைப் பிரிக்க 3 நிமிடங்களுக்கு அது சுழல் செய்யப்பட்டது.சுழலுக்குப் பிறகு, இடைநீக்கம் தொடர்ச்சியாக 0.1% PSW உடன் 10 மடங்கு நீர்த்தப்பட்டது, பின்னர் ஒவ்வொரு நீர்த்தத்திலும் 0.1 மில்லி BAP இல் தடுப்பூசி போடப்பட்டது.37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 24 மணிநேரம் அடைகாத்த பிறகு, CFU கைமுறையாக கணக்கிடப்பட்டது.
செல்களுக்கு, மவுஸ் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்கள் NIH/3T3 (CRL-1658; அமெரிக்கன் ATCC) மற்றும் மவுஸ் மேக்ரோபேஜ்கள் RAW 264.7 (TIB-71; அமெரிக்கன் ATCC) பயன்படுத்தப்பட்டன.மவுஸ் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்களை வளர்ப்பதற்கும், 10% கன்று சீரம் (S103-01, Welgene) மற்றும் 1% பென்சிலின்-ஸ்ட்ரெப்டோமைசின் (PS 10% கரு போவின் சீரம் (S001-01, வெல்ஜீன்) மற்றும் 1% PS உடன் இணைந்து, மவுஸ் மேக்ரோபேஜ்களை வளர்ப்பதற்கு DMEM ஐப் பயன்படுத்தவும், மேலும் 105 செல்கள்/செ.மீ. செல்கள் ஒரே இரவில் 37 டிகிரி செல்சியஸ் மற்றும் 5% CO2 இல் அடைக்கப்பட்டுள்ளன, செல்கள் 4% பாராஃபோர்மால்டிஹைடுடன் 20 நிமிடங்களுக்கு சரி செய்யப்பட்டு, 5 நிமிடங்களுக்கு -100 க்கு அடி மூலக்கூறை 50nM tetramethyl இல் மூழ்கடித்து 30 நிமிடங்களுக்கு 37°C வெப்பநிலையில், 4′,6-diamino-2-phenylindole (H -1200, Vector Laboratories, UK) VECTASHIELD நிர்ணயம் செய்யும் ஊடகம் (ஒரு கலத்திற்கு n = 4) , fluorescein, fluorescein isothiocyanate-albumin (A9771, Sigma-Aldrich, Germany) மற்றும் மனித பிளாஸ்மா Alexa Fluor 488-conjugated fibrinogen (F13191, Invitrogen, USA) pH 10 m.M4BS இல் கரைக்கப்பட்டது.அல்புமின் மற்றும் ஃபைப்ரினோஜனின் செறிவு முறையே 1 மற்றும் 150 μg/ml ஆகும்.அடி மூலக்கூறுக்குப் பிறகு புரதக் கரைசலில் மூழ்குவதற்கு முன், மேற்பரப்பை மீண்டும் நீரேற்றம் செய்ய பிபிஎஸ் மூலம் அவற்றை துவைக்கவும்.பின்னர் அனைத்து அடி மூலக்கூறுகளையும் புரதக் கரைசலைக் கொண்ட ஆறு கிணறு தட்டில் மூழ்கடித்து, 30 மற்றும் 90 நிமிடங்களுக்கு 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் அடைகாக்கவும்.அடைகாத்த பிறகு, அடி மூலக்கூறு புரதக் கரைசலில் இருந்து அகற்றப்பட்டு, பிபிஎஸ் மூலம் 3 முறை மெதுவாகக் கழுவப்பட்டு, 4% பாராஃபோர்மால்டிஹைடுடன் (ஒவ்வொரு புரதத்திற்கும் n = 4) சரி செய்யப்பட்டது.கால்சியத்திற்கு, சோடியம் குளோரைடு (0.21 M) மற்றும் பொட்டாசியம் பாஸ்பேட் (3.77 mM) ) டீயோனைஸ்டு நீரில் கரைக்கப்பட்டது.ஹைட்ரோகுளோரைடு கரைசலை (1M) சேர்ப்பதன் மூலம் கரைசலின் pH 2.0 ஆக சரி செய்யப்பட்டது.பின்னர் கால்சியம் குளோரைடு (5.62 மிமீ) கரைசலில் கரைக்கப்பட்டது.1M tris(hydroxymethyl)-அமினோ மீத்தேன் சேர்ப்பதன் மூலம் கரைசலின் pH ஐ 7.4க்கு சரிசெய்கிறது.அனைத்து அடி மூலக்கூறுகளையும் 1.5× கால்சியம் பாஸ்பேட் கரைசலில் நிரப்பப்பட்ட ஆறு கிணறு தட்டில் மூழ்கடித்து, 30 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு கரைசலில் இருந்து அகற்றவும்.கறை படிவதற்கு, 2 கிராம் Alizarin Red S (CI 58005) 100 மில்லி டீயோனைஸ்டு தண்ணீரில் கலக்கவும்.பிறகு, 10% அம்மோனியம் ஹைட்ராக்சைடைப் பயன்படுத்தி pH ஐ 4 ஆக சரிசெய்யவும். அடி மூலக்கூறை அலிசரின் ரெட் கரைசலுடன் 5 நிமிடங்கள் சாயமிட்டு, பின்னர் அதிகப்படியான சாயத்தை குலுக்கி துடைக்கவும்.குலுக்கல் செயல்முறைக்குப் பிறகு, அடி மூலக்கூறை அகற்றவும்.பொருள் நீரிழப்பு செய்யப்பட்டு, பின்னர் 5 நிமிடங்களுக்கு அசிட்டோனில் மூழ்கி, பின்னர் 5 நிமிடங்களுக்கு அசிட்டோன்-சைலீன் (1:1) கரைசலில் மூழ்கி, இறுதியாக சைலீன் (n = 4) மூலம் கழுவப்படுகிறது.×10 மற்றும் ×20 ஆப்ஜெக்டிவ் லென்ஸ்கள் கொண்ட ஃப்ளோரசன்ஸ் மைக்ரோஸ்கோப் (ஆக்ஸியோ இமேஜர்) பயன்படுத்தப்படுகிறது..A2m, Zeiss, Germany) படங்கள் அனைத்தும் அடி மூலக்கூறுகள்.ImageJ/FIJI (https://imagej.nih.gov/ij/) நான்கு வெவ்வேறு இமேஜிங் பகுதிகளின் ஒவ்வொரு குழுவிலும் உள்ள உயிரியல் பொருட்களின் ஒட்டுதல் தரவை அளவிட பயன்படுத்தப்பட்டது.அடி மூலக்கூறு ஒப்பிடுவதற்கு நிலையான வரம்புகளுடன் அனைத்து படங்களையும் பைனரி படங்களாக மாற்றவும்.
ஒரு Zeiss LSM 700 confocal நுண்ணோக்கி பிபிஎஸ்ஸில் உள்ள மசகு எண்ணெய் அடுக்கின் நிலைத்தன்மையை பிரதிபலிப்பு முறையில் கண்காணிக்கப் பயன்படுத்தப்பட்டது.உட்செலுத்தப்பட்ட மசகு அடுக்குடன் கூடிய ஃவுளூரின்-அடிப்படையிலான SAM- பூசப்பட்ட கண்ணாடி மாதிரியானது PBS கரைசலில் மூழ்கி, லேசான நடுங்கும் சூழ்நிலையில் (120 rpm) சுற்றுப்பாதை ஷேக்கரை (SHO-1D; Daihan Scientific, தென் கொரியா) பயன்படுத்தி சோதிக்கப்பட்டது.பின்னர் மாதிரியை எடுத்து, பிரதிபலித்த ஒளியின் இழப்பை அளவிடுவதன் மூலம் மசகு எண்ணெய் இழப்பைக் கண்காணிக்கவும்.பிரதிபலிப்பு பயன்முறையில் ஃப்ளோரசன்ஸ் படங்களைப் பெற, மாதிரியானது 633 nm லேசருக்கு வெளிப்படுத்தப்பட்டு பின்னர் சேகரிக்கப்படுகிறது, ஏனெனில் ஒளி மாதிரியிலிருந்து மீண்டும் பிரதிபலிக்கும்.மாதிரிகள் 0, 30, 60 மற்றும் 120 மணிநேர இடைவெளியில் அளவிடப்பட்டன.
எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் நானோ மெக்கானிக்கல் பண்புகளில் மேற்பரப்பை மாற்றியமைக்கும் செயல்முறையின் செல்வாக்கைத் தீர்மானிக்க, நானோஇன்டெனியோனை அளவிடுவதற்கு மூன்று பக்க பிரமிடு வடிவ பெர்கோவிச் வைர முனையுடன் கூடிய நானோஇண்டெண்டர் (TI 950 TriboIndenter, Hysitron, USA) பயன்படுத்தப்பட்டது.உச்ச சுமை 10 mN மற்றும் பரப்பளவு 100μmx 100μm.அனைத்து அளவீடுகளுக்கும், ஏற்றுதல் மற்றும் இறக்குதல் நேரம் 10 வி, மற்றும் உச்ச உள்தள்ளல் சுமையின் கீழ் வைத்திருக்கும் நேரம் 2 வி.ஐந்து வெவ்வேறு இடங்களில் இருந்து அளவீடுகளை எடுத்து சராசரியை எடுக்கவும்.சுமையின் கீழ் இயந்திர வலிமை செயல்திறனை மதிப்பிடுவதற்காக, ஒரு உலகளாவிய சோதனை இயந்திரத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரு குறுக்கு மூன்று-புள்ளி வளைக்கும் சோதனை செய்யப்பட்டது (இன்ஸ்ட்ரான் 5966, இன்ஸ்ட்ரான், அமெரிக்கா).அடி மூலக்கூறு அதிகரித்த சுமையுடன் 10 N/s நிலையான விகிதத்தில் சுருக்கப்படுகிறது.புளூஹில் யுனிவர்சல் மென்பொருள் நிரல் (n = 3) நெகிழ்வு மாடுலஸ் மற்றும் அதிகபட்ச அழுத்த அழுத்தத்தை கணக்கிட பயன்படுத்தப்பட்டது.
செயல்பாட்டின் போது ஏற்படும் செயல்பாட்டு செயல்முறை மற்றும் தொடர்புடைய இயந்திர சேதத்தை உருவகப்படுத்துவதற்காக, அறுவை சிகிச்சை செயல்முறை விட்ரோவில் செய்யப்பட்டது.தூக்கிலிடப்பட்ட நியூசிலாந்து வெள்ளை முயல்களிடமிருந்து தொடை எலும்புகள் சேகரிக்கப்பட்டன.தொடை எலும்பு சுத்தம் செய்யப்பட்டு 1 வாரத்திற்கு 4% பாராஃபோர்மால்டிஹைடில் சரி செய்யப்பட்டது.விலங்கு பரிசோதனை முறையில் விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி, நிலையான தொடை எலும்பு அறுவை சிகிச்சை மூலம் இயக்கப்பட்டது.அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு, எலும்பியல் உள்வைப்பு இரத்தத்தில் (குதிரை இரத்தம், கிசான், கொரியா) 10 வினாடிகளுக்கு மூழ்கியது, இயந்திர காயம் பயன்படுத்தப்பட்ட பிறகு இரத்த ஒட்டுதல்கள் ஏற்பட்டதா என்பதை உறுதிப்படுத்தவும் (n = 3).
மொத்தம் 24 ஆண் நியூசிலாந்து வெள்ளை முயல்கள் (எடை 3.0 முதல் 3.5 கிலோ, சராசரி வயது 6 மாதங்கள்) தோராயமாக நான்கு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன: நிர்வாண எதிர்மறை, நிர்வாண நேர்மறை, SHP மற்றும் LOIS.விலங்குகள் சம்பந்தப்பட்ட அனைத்து நடைமுறைகளும் நிறுவன விலங்கு பராமரிப்பு மற்றும் பயன்பாட்டுக் குழுவின் (IACUC அங்கீகரிக்கப்பட்டது, கொரியா-2017-0159) நெறிமுறைத் தரங்களுக்கு இணங்க செய்யப்பட்டது.எலும்பியல் உள்வைப்பு ஐந்து துளைகள் (நீளம் 41 மிமீ, அகலம் 7 ​​மிமீ மற்றும் தடிமன் 2 மிமீ) மற்றும் கார்டிகல் லாக்கிங் திருகுகள் (நீளம் 12 மிமீ, விட்டம் 2.7 மிமீ) எலும்பு முறிவு சரிசெய்தல் கொண்ட பூட்டுதல் தட்டு கொண்டுள்ளது.வெற்று-எதிர்மறை குழுவில் பயன்படுத்தப்படும் அந்த தட்டுகள் மற்றும் திருகுகள் தவிர, அனைத்து தட்டுகள் மற்றும் திருகுகள் 12 மணி நேரம் MRSA இடைநீக்கத்தில் (106 CFU/ml) அடைகாக்கப்பட்டன.நிர்வாண-எதிர்மறை குழு (n=6) பாக்டீரியா இடைநீக்கத்தை வெளிப்படுத்தாமல் நிர்வாண மேற்பரப்பு உள்வைப்புகளுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது, இது தொற்றுநோய்க்கான எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டாக இருந்தது.வெற்று நேர்மறை குழு (n = 6) பாக்டீரியாவுக்கு வெளிப்படும் வெற்று மேற்பரப்பு உள்வைப்பு மூலம் நோய்த்தொற்றுக்கான நேர்மறையான கட்டுப்பாட்டாக சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது.SHP குழு (n = 6) பாக்டீரியா வெளிப்படும் SHP உள்வைப்புகளுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது.இறுதியாக, LOIS குழு பாக்டீரியா வெளிப்படும் LOIS உள்வைப்புகள் (n = 6) மூலம் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது.அனைத்து விலங்குகளும் ஒரு கூண்டில் வைக்கப்படுகின்றன, மேலும் நிறைய உணவு மற்றும் தண்ணீர் வழங்கப்படுகிறது.அறுவை சிகிச்சைக்கு முன், முயல்கள் 12 மணி நேரம் உண்ணாவிரதம் இருந்தன.சைலாசைன் (5மிகி/கிலோ) தசைநார் ஊசி மற்றும் தூண்டலுக்காக பக்லிடாக்செல் (3மிகி/கிகி) நரம்புவழி ஊசி மூலம் விலங்குகள் மயக்கமடைந்தன.அதன் பிறகு, 2% ஐசோஃப்ளூரேன் மற்றும் 50% முதல் 70% மருத்துவ ஆக்சிஜனை (ஓட்டம் வீதம் 2 எல்/நிமிடத்திற்கு) சுவாச அமைப்பு மூலம் செலுத்தி மயக்க நிலையைப் பராமரிக்கவும்.இது பக்கவாட்டு தொடை எலும்புக்கு நேரடி அணுகுமுறை மூலம் பொருத்தப்படுகிறது.முடி அகற்றுதல் மற்றும் தோலின் போவிடோன்-அயோடின் கிருமி நீக்கம் செய்த பிறகு, இடது நடுத்தர தொடை எலும்பின் வெளிப்புறத்தில் சுமார் 6 செமீ நீளமுள்ள கீறல் செய்யப்பட்டது.தொடை எலும்பை மறைக்கும் தசைகளுக்கு இடையே உள்ள இடைவெளியைத் திறப்பதன் மூலம், தொடை எலும்பு முழுமையாக வெளிப்படும்.தொடை தண்டு முன் தட்டு வைக்கவும் மற்றும் நான்கு திருகுகள் அதை சரி.சரிசெய்த பிறகு, இரண்டாவது துளைக்கும் நான்காவது துளைக்கும் இடையில் உள்ள பகுதியில் செயற்கையாக ஒரு எலும்பு முறிவை உருவாக்க, ஒரு மரக்கட்டை (1 மிமீ தடிமன்) பயன்படுத்தவும்.அறுவை சிகிச்சையின் முடிவில், காயம் உப்புநீரால் கழுவப்பட்டு, தையல்களால் மூடப்பட்டது.ஒவ்வொரு முயலுக்கும் என்ரோஃப்ளோக்சசின் (5 மி.கி./கி.கி.) மூன்றில் ஒரு பங்கு உப்புநீரில் நீர்த்த தோலடியாக செலுத்தப்பட்டது.எலும்பின் ஆஸ்டியோடோமியை உறுதிப்படுத்த அனைத்து விலங்குகளிலும் (0, 7, 14, 21, 28 மற்றும் 42 நாட்கள்) தொடை எலும்பின் எக்ஸ்ரே எடுக்கப்பட்டது.ஆழ்ந்த மயக்க மருந்துக்குப் பிறகு, அனைத்து விலங்குகளும் 28 மற்றும் 42 நாட்களில் நரம்பு வழியாக KCl (2 mmol/kg) மூலம் கொல்லப்பட்டன.மரணதண்டனைக்குப் பிறகு, நான்கு குழுக்களுக்கிடையில் எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறை மற்றும் புதிய எலும்பு உருவாக்கம் ஆகியவற்றைக் கவனித்து ஒப்பிட்டுப் பார்க்க, தொடை எலும்பு மைக்ரோ-சிடி மூலம் ஸ்கேன் செய்யப்பட்டது.
மரணதண்டனைக்குப் பிறகு, எலும்பியல் உள்வைப்புகளுடன் நேரடி தொடர்பில் இருந்த மென்மையான திசுக்கள் சேகரிக்கப்பட்டன.திசு ஒரே இரவில் 10% நடுநிலை பஃபர் ஃபார்மலினில் சரி செய்யப்பட்டது, பின்னர் EtOH இல் நீரிழப்பு செய்யப்பட்டது.நீரிழப்பு திசு பாரஃபினில் உட்பொதிக்கப்பட்டு மைக்ரோடோமைப் பயன்படுத்தி 40 μm தடிமனில் பிரிக்கப்பட்டது (400CS; EXAKT, ஜெர்மனி).நோய்த்தொற்றைக் காட்சிப்படுத்த, எச்&இ ஸ்டைனிங் மற்றும் எம்டி ஸ்டைனிங் செய்யப்பட்டது.ஹோஸ்ட் பதிலைச் சரிபார்க்க, பிரிக்கப்பட்ட திசு முயல் எதிர்ப்பு TNF-α முதன்மை ஆன்டிபாடி (AB6671, Abcam, USA) மற்றும் முயல் எதிர்ப்பு IL-6 (AB6672; Abcam, USA) ஆகியவற்றுடன் அடைகாக்கப்பட்டு, பின்னர் குதிரைவாலியுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டது.ஆக்சிடேஸ்.உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி பிரிவுகளுக்கு அவிடின்-பயோட்டின் காம்ப்ளக்ஸ் (ஏபிசி) கறை அமைப்பைப் பயன்படுத்துங்கள்.ஒரு பழுப்பு எதிர்வினை தயாரிப்பாக தோன்றுவதற்கு, 3,3-டைமினோபென்சிடின் அனைத்து பகுதிகளிலும் பயன்படுத்தப்பட்டது.அனைத்து துண்டுகளையும் காட்சிப்படுத்த டிஜிட்டல் ஸ்லைடு ஸ்கேனர் (பனோரமிக் 250 ஃப்ளாஷ் III, 3DHISTECH, ஹங்கேரி) பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் ஒவ்வொரு குழுவிலும் குறைந்தது நான்கு அடி மூலக்கூறுகள் ImageJ மென்பொருளால் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.
அறுவைசிகிச்சைக்குப் பிறகு அனைத்து விலங்குகளிலும் எக்ஸ்ரே படங்கள் எடுக்கப்பட்டன மற்றும் எலும்பு முறிவு குணப்படுத்துவதைக் கண்காணிக்க ஒவ்வொரு வாரமும் எடுக்கப்பட்டது (ஒரு குழுவிற்கு n = 6).மரணதண்டனைக்குப் பிறகு, குணமான பிறகு தொடை எலும்பைச் சுற்றி கால்சஸ் உருவாவதைக் கணக்கிட உயர் தெளிவுத்திறன் கொண்ட மைக்ரோ-சிடி பயன்படுத்தப்பட்டது.பெறப்பட்ட தொடை எலும்பு சுத்தம் செய்யப்பட்டு, 4% பாராஃபோர்மால்டிஹைடில் 3 நாட்களுக்கு சரி செய்யப்பட்டது, மேலும் 75% எத்தனாலில் நீரிழப்பு செய்யப்பட்டது.நீரிழப்பு எலும்புகள் பின்னர் மைக்ரோ-சி.டி (ஸ்கைஸ்கேன் 1173, புரூக் மைக்ரோ-சி.டி, கண்டி, பெல்ஜியம்) பயன்படுத்தி எலும்பு மாதிரியின் 3D வோக்சல் படங்களை (2240×2240 பிக்சல்கள்) உருவாக்க ஸ்கேன் செய்யப்பட்டன.சிக்னல் இரைச்சலைக் குறைக்க 1.0 மிமீ Al வடிப்பானைப் பயன்படுத்தவும் மற்றும் அனைத்து ஸ்கேன்களுக்கும் உயர் தெளிவுத்திறனைப் பயன்படுத்தவும் (E = 133 kVp, I = 60 μA, ஒருங்கிணைப்பு நேரம் = 500 ms).Nrecon மென்பொருள் (பதிப்பு 1.6.9.8, Bruker microCT, Kontich, Belgium) வாங்கிய 2D பக்கவாட்டுத் திட்டத்திலிருந்து ஸ்கேன் செய்யப்பட்ட மாதிரியின் 3D தொகுதியை உருவாக்கப் பயன்படுத்தப்பட்டது.பகுப்பாய்விற்கு, 3D புனரமைக்கப்பட்ட படம் எலும்பு முறிவு தளத்தின் படி 10mm×10mm×10mm கனசதுரங்களாக பிரிக்கப்பட்டுள்ளது.கார்டிகல் எலும்பின் வெளிப்புற கால்சஸைக் கணக்கிடுங்கள்.ஸ்கேன் செய்யப்பட்ட எலும்பின் அளவை டிஜிட்டல் முறையில் திருப்பிவிட DataViewer (பதிப்பு 1.5.1.2; Bruker microCT, Kontich, Belgium) மென்பொருள் பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் CT-Analyzer (பதிப்பு 1.14.4.1; Bruker microCT, Kontich, Belgium) மென்பொருள் பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது.முதிர்ந்த எலும்பு மற்றும் கால்சஸ் ஆகியவற்றில் உள்ள சார்பு எக்ஸ்ரே உறிஞ்சுதல் குணகங்கள் அவற்றின் அடர்த்தியால் வேறுபடுகின்றன, பின்னர் கால்சஸின் அளவு அளவிடப்படுகிறது (n = 4).LOIS இன் உயிர் இணக்கத்தன்மை எலும்பு குணப்படுத்தும் செயல்முறையை தாமதப்படுத்தாது என்பதை உறுதிப்படுத்த, கூடுதல் எக்ஸ்ரே மற்றும் மைக்ரோ-சிடி பகுப்பாய்வு இரண்டு முயல்களில் செய்யப்பட்டது: நிர்வாண-எதிர்மறை மற்றும் LOIS குழுக்கள்.இரு குழுக்களும் 6வது வாரத்தில் தூக்கிலிடப்பட்டனர்.
பலியிடப்பட்ட விலங்குகளின் தொடை எலும்புகள் சேகரிக்கப்பட்டு 3 நாட்களுக்கு 4% பாராஃபோர்மால்டிஹைடில் சரி செய்யப்பட்டது.எலும்பியல் உள்வைப்பு பின்னர் தொடை எலும்பிலிருந்து கவனமாக அகற்றப்படுகிறது.0.5 M EDTA (EC-900, National Diagnostics Corporation) ஐப் பயன்படுத்தி 21 நாட்களுக்கு தொடை எலும்பு நீக்கப்பட்டது.பின்னர் டிகால்சிஃபைட் தொடை எலும்பை நீரிழப்பு செய்ய EtOH இல் மூழ்கடித்தது.நீரிழப்பு தொடை எலும்பு சைலினில் அகற்றப்பட்டு பாரஃபினில் பதிக்கப்பட்டது.பின்னர் மாதிரியானது 3 μm தடிமன் கொண்ட தானியங்கி ரோட்டரி மைக்ரோடோம் (லைக்கா RM2255, லைக்கா பயோசிஸ்டம்ஸ், ஜெர்மனி) மூலம் வெட்டப்பட்டது.TRAP ஸ்டைனிங்கிற்கு (F6760, Sigma-Aldrich, Germany), பிரிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் 1 மணிநேரத்திற்கு 37°C வெப்பநிலையில் TRAP ரீஜெண்டில் டிபாரஃபினைஸ் செய்யப்பட்டு, மறுநீரேற்றம் செய்யப்பட்டு, அடைகாத்தன.ஸ்லைடு ஸ்கேனரைப் பயன்படுத்தி படங்கள் பெறப்பட்டன (பனோரமிக் 250 ஃப்ளாஷ் III, 3DHISTECH, ஹங்கேரி) மற்றும் கறை படிந்த பகுதியின் பரப்பளவை அளவிடுவதன் மூலம் அளவிடப்பட்டது.ஒவ்வொரு சோதனையிலும், ஒவ்வொரு குழுவிலும் குறைந்தது நான்கு அடி மூலக்கூறுகள் ImageJ மென்பொருளால் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.
GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., USA) ஐப் பயன்படுத்தி புள்ளிவிவர முக்கியத்துவம் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது.இணைக்கப்படாத டி-டெஸ்ட் மற்றும் மாறுபாட்டின் ஒரு வழி பகுப்பாய்வு (ANOVA) ஆகியவை மதிப்பீட்டுக் குழுக்களுக்கு இடையிலான வேறுபாடுகளைச் சோதிக்கப் பயன்படுத்தப்பட்டன.முக்கியத்துவ நிலை பின்வருமாறு படத்தில் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது: *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 மற்றும் ****P<0.0001;NS, குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடு இல்லை.
இந்தக் கட்டுரைக்கான துணைப் பொருட்களுக்கு, http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/44/eabb0025/DC1 ஐப் பார்க்கவும்
இது கிரியேட்டிவ் காமன்ஸ் பண்புக்கூறு-வணிகமற்ற உரிமத்தின் விதிமுறைகளின் கீழ் விநியோகிக்கப்படும் ஒரு திறந்த அணுகல் கட்டுரையாகும், இது எந்த ஊடகத்திலும் பயன்படுத்த, விநியோகம் மற்றும் இனப்பெருக்கம் செய்ய அனுமதிக்கிறது, இதன் பயன்பாடு வணிக லாபத்திற்காக அல்ல, மேலும் அசல் வேலை சரியானது.குறிப்பு.
குறிப்பு: மின்னஞ்சல் முகவரியை மட்டும் வழங்குமாறு கேட்டுக்கொள்கிறோம். இதன் மூலம் நீங்கள் அந்தப் பக்கத்திற்குப் பரிந்துரைக்கும் நபர் மின்னஞ்சலைப் பார்க்க வேண்டும் என்பதையும், அந்த மின்னஞ்சல் ஸ்பேம் அல்ல என்பதையும் அவர் அறிந்துகொள்வார்.நாங்கள் எந்த மின்னஞ்சல் முகவரிகளையும் கைப்பற்ற மாட்டோம்.
நீங்கள் ஒரு மனித பார்வையாளரா என்பதைச் சோதிக்கவும், தானியங்கி ஸ்பேம் சமர்ப்பிப்புகளைத் தடுக்கவும் இந்தக் கேள்வி பயன்படுத்தப்படுகிறது.
சோ கியுங் மின், ஓ யங் ஜாங், பார்க் ஜுன் ஜூன், லீ ஜின் ஹியுக், கிம் ஹியூன் சியோல், லீ கியுங் மூன், லீ சாங் கியூ, லீ யோன் டேக், லீ சன்-யுக், ஜியோங் மோருய்
எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் பாக்டீரியா எதிர்ப்பு மற்றும் நோயெதிர்ப்பு தப்பிக்கும் பூச்சுகள் தொற்றுநோய்களால் ஏற்படும் நோய்த்தொற்றுகள் மற்றும் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழிகளைக் குறைக்கும்.
சோ கியுங் மின், ஓ யங் ஜாங், பார்க் ஜுன் ஜூன், லீ ஜின் ஹியுக், கிம் ஹியூன் சியோல், லீ கியுங் மூன், லீ சாங் கியூ, லீ யோன் டேக், லீ சன்-யுக், ஜியோங் மோருய்
எலும்பியல் உள்வைப்புகளின் பாக்டீரியா எதிர்ப்பு மற்றும் நோயெதிர்ப்பு தப்பிக்கும் பூச்சுகள் தொற்றுநோய்களால் ஏற்படும் நோய்த்தொற்றுகள் மற்றும் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழிகளைக் குறைக்கும்.
©2021 அறிவியல் முன்னேற்றத்திற்கான அமெரிக்க சங்கம்.அனைத்து உரிமைகளும் பாதுகாக்கப்பட்டவை.AAAS ஆனது HINARI, AGORA, OARE, CHORUS, CLOCKSS, CrossRef மற்றும் COUNTER ஆகியவற்றின் பங்குதாரர்.அறிவியல் முன்னேற்றங்கள் ISSN 2375-2548.