• HEBEI TOP-METAL I/E CO., LTD
    توهان جو ذميوار سپلائر پارٽنر

مصنوعات

آرٿوپيڊڪ امپلانٽس لاءِ اينٽي بيڪٽيريل انفيڪشن ۽ مدافعتي فرار ڪوٽنگ

مريضن لاءِ آرٿوپيڊڪ امپلانٽ سرجري، بيڪٽيريل انفيڪشن ۽ انفيڪشن-حوصلا افزائي مدافعتي ردعمل هميشه زندگي لاءِ خطرو بڻيل آهن.روايتي حياتياتي مواد حياتياتي آلودگي لاء حساس هوندا آهن، جيڪي بيڪرياريا کي زخمي علائقي تي حملو ڪرڻ ۽ پوسٽ آپريٽو انفيڪشن جو سبب بڻائيندو آهي.تنهن ڪري، آرٿوپيڊڪ امپلانٽس لاءِ اينٽي انفڪشن ۽ مدافعتي فرار ڪوٽنگ کي ترقي ڪرڻ جي فوري ضرورت آهي.هتي، اسان آرٿوپيڊڪ امپلانٽس لاءِ هڪ جديد سطح جي ترميمي ٽيڪنالاجي تيار ڪئي آهي جنهن کي Lubricated Orthopedic Implant Surface (LOIS) سڏيو ويندو آهي، جيڪو ٻوٽن جي پچر جي هموار سطح کان متاثر ٿيل آهي.LOIS ۾ مختلف قسم جي مائع ۽ حياتياتي مادو (جنهن ۾ سيلز، پروٽين، ڪلسيم ۽ بيڪٽيريا شامل آهن) جي ڊگهي ۽ مضبوط مائع ڀڃڻ واري صلاحيت آهي.ان کان علاوه، اسان ويٽرو سرجري دوران ناگزير نقصان کي نقل ڪندي سکريچ ۽ فڪسنگ فورس جي خلاف ميڪيڪل استحڪام جي تصديق ڪئي.خرگوش جي هڏن جي ميرو جي سوزش واري عورتن جي ڀڄڻ جو ماڊل استعمال ڪيو ويو مڪمل طور تي LOIS جي اينٽي بايولوجيڪل اسڪيلنگ ۽ اينٽي انفيڪشن جي صلاحيت جو مطالعو ڪرڻ لاءِ.اسان تصور ڪريون ٿا ته LOIS، جنهن ۾ اينٽي بايوفولنگ ملڪيت ۽ ميخانياتي استحڪام آهي، هڪ قدم اڳتي آهي انفڪشن فري آرٿوپيڊڪ سرجري ۾.
اڄ، مجموعي عمر جي ڪري، آرٿوپيڊڪ بيمارين ۾ مبتلا مريضن جو تعداد (جهڙوڪ بزرگ ڀڃڻ، degenerative گڏيل بيماريون، ۽ اوستيوپورسس) تمام گهڻو وڌي چڪو آهي (1, 2).تنهن ڪري، طبي ادارا آرٿوپيڊڪ سرجري کي وڏي اهميت سان ڳنڍيندا آهن، بشمول اسڪرو، پليٽ، ناخن ۽ مصنوعي جوڑوں جي آرٿوپيڊڪ امپلانٽس (3، 4).بهرحال، روايتي آرٿوپيڊڪ امپلانٽس کي بيڪٽيريل آسنجن ۽ بايوفيلم ٺهڻ لاء حساس ٿيڻ جي خبر ڏني وئي آهي، جيڪا سرجري کان پوء جراحي سائيٽ انفيڪشن (SSI) سبب ڪري سگهي ٿي (5, 6).هڪ ڀيرو آرٿوپيڊڪ امپلانٽ جي مٿاڇري تي بائيوفلم ٺهي وڃي ٿي، بائيو فلم کي هٽائڻ انتهائي مشڪل ٿي وڃي ٿو جيتوڻيڪ اينٽي بايوٽڪ جي وڏي مقدار جي استعمال سان.تنهن ڪري، اهو عام طور تي سخت postoperative انفيڪشن (7، 8) ڏانهن وڌي ٿو.مٿين مسئلن جي ڪري، متاثر ٿيل امپلانٽس جي علاج ۾ ٻيهر آپريشن شامل ٿيڻ گهرجي، بشمول سڀني امپلانٽس ۽ ڀرپاسي جي ٽشوز کي هٽائڻ؛تنهن ڪري، مريض سخت درد ۽ ڪجهه خطرن جو شڪار ٿيندو (9، 10).
انهن مان ڪجهه مسئلن کي حل ڪرڻ لاء، منشيات-ايليوٽنگ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس ٺاهيا ويا آهن انفڪشن کي روڪڻ لاء مٿاڇري سان ڳنڍيل بيڪرياريا کي ختم ڪرڻ (11، 12).بهرحال، حڪمت عملي اڃا تائين ڪيترن ئي حدن کي ڏيکاري ٿو.اهو ٻڌايو ويو آهي ته ڊگھي عرصي تائين دوا جي ايلوٽنگ امپلانٽس جي ڀرپاسي جي بافتن کي نقصان پهچايو آهي ۽ سوزش جو سبب بڻيل آهي، جنهن جي نتيجي ۾ necrosis (13، 14).ان کان علاوه، نامياتي سالوينٽس جيڪي موجود ٿي سگھن ٿيون دوا سازي جي پيداوار واري عمل کان پوءِ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس، جيڪي آمريڪي فوڊ اينڊ ڊرگ ايڊمنسٽريشن پاران سختي سان منع ٿيل آھن، انھن جي معيار کي پورا ڪرڻ لاءِ اضافي صفائي جي قدمن جي ضرورت آھي (15).ڊرگ-ايليوٽنگ امپلانٽس منشيات جي ڪنٽرول ٿيل ڇڏڻ لاءِ مشڪل آهن، ۽ انهن جي محدود منشيات جي لوڊشيڊنگ جي ڪري، دوا جي ڊگهي مدت جي درخواست ممڪن ناهي (16).
ٻي عام حڪمت عملي اها آهي ته امپلانٽ کي اينٽي فولنگ پوليمر سان گڏ ڪيو وڃي ته جيئن حياتياتي مادو ۽ بيڪٽيريا کي مٿاڇري تي چڙهڻ کان روڪيو وڃي (17).مثال طور، zwitterionic polymers انهن جي غير چپکندڙ ملڪيتن جي ڪري ڌيان ڇڪايو آهي جڏهن پلازما پروٽين، سيلز ۽ بيڪٽيريا سان رابطي ۾ هجي.بهرحال، ان ۾ ڪجهه حدون آهن جيڪي ڊگھي مدت جي استحڪام ۽ ميخانياتي استحڪام سان لاڳاپيل آهن، جيڪي آرٿوپيڊڪ امپلانٽس ۾ ان جي عملي ايپليڪيشن کي روڪيندا آهن، خاص طور تي جراحي طريقيڪار دوران ميڪيڪل ڇڪڻ جي ڪري (18, 19).ان کان علاوه، ان جي اعلي بايو مطابقت جي ڪري، هٽائڻ جي سرجري جي ضرورت جي کوٽ، ۽ corrosion ذريعي مٿاڇري جي صفائي جي ملڪيت، آرٿوپيڊڪ امپلانٽس استعمال ڪيا ويا آهن جيڪي بايوڊيگريڊبل مواد مان ٺهيل آهن (20، 21).سنکنرن جي دوران، پوليمر ميٽرڪس جي وچ ۾ ڪيميائي بانڊ ڀڄي ويا آهن ۽ مٿاڇري کان جدا ٿي ويا آهن، ۽ پيروي ڪندڙ سطح کي صاف ڪن ٿا.بهرحال، مٿاڇري جي صفائي جي ذريعي اينٽي بايولوجيڪل فوولنگ وقت جي مختصر عرصي ۾ اثرائتو آهي.ان کان علاوه، تمام گهڻي جذبي واري مواد بشمول پولي (ليڪٽڪ ايسڊ-گليڪولڪ ايسڊ ڪوپوليمر) (PLGA)، پوليلڪڪڪ ايسڊ (PLA) ۽ ميگنيشيم تي ٻڌل مرکبات جسم ۾ غير معمولي بايوڊيگريڊيشن ۽ erosion کان گذرندا، جيڪي ميڪيڪل استحڪام کي منفي طور تي متاثر ڪندا.(ٻئي).ان کان علاوه، بايوڊيگريڊبل پليٽ جا ٽڪرا بيڪٽيريا کي ڳنڍڻ لاء هڪ جڳهه مهيا ڪن ٿا، جيڪو ڊگهي عرصي ۾ انفيڪشن جو موقعو وڌائي ٿو.ميڪانياتي تباهي ۽ انفيڪشن جو اهو خطرو پلاسٽڪ سرجري جي عملي درخواست کي محدود ڪري ٿو (23).
سپر هائيڊروفوبڪ (SHP) مٿاڇريون جيڪي لوٽس جي پنن جي ترتيب واري جوڙجڪ کي نقل ڪن ٿيون، مخالف ڦوڪندڙ سطحن لاء هڪ امڪاني حل بڻجي چڪا آهن (24, 25).جڏهن SHP جي مٿاڇري کي مائع ۾ وهايو ويندو آهي، هوائي بلبلن کي پڪڙيو ويندو، ان ڪري هوا جي کيسي ٺاهيندي ۽ بيڪٽيريا جي آسنجن کي روڪيندي (26).بهرحال، تازو اڀياس ڏيکاريا آهن ته SHP مٿاڇري ۾ ميڪيڪل استحڪام ۽ ڊگهي مدت جي استحڪام سان لاڳاپيل نقصانات آهن، جيڪي طبي امپلانٽس ۾ ان جي درخواست کي روڪيندا آهن.ان کان علاوه، هوا جي جبلن کي ڦهلائي ڇڏيندو ۽ انهن جي مخالف ڦڦڙن جي ملڪيت کي وڃائي ڇڏيندو، اهڙيء طرح SHP مٿاڇري جي وڏي مٿاڇري واري علائقي (27، 28) جي ڪري وسيع بيڪٽيريا آسنجن جي نتيجي ۾.تازو، ايزنبرگ ۽ ان جي ساٿين اينٽي بايو فولنگ مٿاڇري جي ڪوٽنگ جو هڪ جديد طريقو متعارف ڪرايو، هڪ نرم مٿاڇري کي ترقي ڪندي Nepenthes pitcher plant (29، 30).هموار مٿاڇري ڏيکاري ٿي ڊگھي مدت جي استحڪام کي هائيڊولڪ حالتن جي تحت، انتهائي مايع آهي حياتياتي مائع ڏانهن، ۽ خود مرمت جي ملڪيت آهي.جڏهن ته، پيچيده شڪل واري ميڊيڪل امپلانٽ تي ڪوٽنگ لاڳو ڪرڻ جو ڪو طريقو ناهي، ۽ نه ئي اهو ثابت ٿيو آهي ته امپلانٽيشن کان پوءِ خراب ٿيل ٽشو جي شفا جي عمل کي هٿي وٺرائي.
هتي، اسان متعارف ڪرايون ٿا هڪ لوڻ واري آرٿوپيڊڪ امپلانٽ مٿاڇري (LOIS)، هڪ مائڪرو/نانو ٺهيل آرٿوپيڊڪ امپلانٽ مٿاڇري ۽ مضبوط طور تي هڪ پتلي سڻڪ واري پرت سان ملائي ان کي پلاسٽڪ سرجري سان جڙيل ٿيڻ کان روڪڻ لاءِ بيڪٽيريا انفيڪشن، جهڙوڪ فرڪچر فيڪسيشن.ڇاڪاڻ ته فلورائن جي ڪم ڪندڙ مائڪرو/نانو-سطح جو ڍانچو مضبوطيءَ سان ڍانچي تي لوبريڪنٽ کي ٺيڪ ڪري ٿو، ترقي يافته LOIS مڪمل طور تي مختلف مائعن جي چپن کي رد ڪري سگهي ٿو ۽ گهڻي وقت تائين اينٽي فولنگ ڪارڪردگي برقرار رکي سگهي ٿو.LOIS ڪوٽنگ مختلف شڪلين جي مواد تي لاڳو ڪري سگھجن ٿيون جيڪي هڏن جي جوڙجڪ لاءِ آهن.بائيوفلم بيڪٽيريا [Pseudomonas aeruginosa ۽ methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)] ۽ حياتياتي مواد (سيلز، پروٽين ۽ ڪلسيم) جي خلاف LOIS جي شاندار اينٽي بايوفولنگ ملڪيت جي ويٽرو ۾ تصديق ڪئي وئي آهي.substrate کي وسيع adhesion جي adhesion شرح 1٪ کان گهٽ آهي.ان کان علاوه، مشيني دٻاءَ کان پوءِ به جيئن ته مٿاڇري جي ڇنڊڇاڻ ٿئي ٿي، خود شفا بخشيندڙ لوبريڪٽيٽ ان جي اينٽي فولنگ خاصيتن کي برقرار رکڻ ۾ مدد ڪري ٿي.مشيني استحڪام جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته ساخت ۽ ڪيميائي ترميمن کان پوءِ به، مجموعي طاقت خاص طور تي گهٽ نه ٿيندي.ان کان علاوه، هڪ ويٽرو تجربو جيڪو جراحي ماحول ۾ ميخانياتي دٻاء کي نقل ڪري ٿو اهو ثابت ڪرڻ لاء ڪيو ويو ته LOIS پلاسٽڪ سرجري دوران ٿيندڙ مختلف ميخانياتي دٻاء کي منهن ڏئي سگهي ٿو.آخرڪار، اسان استعمال ڪيو خرگوش جي بنياد تي vivo femoral fracture model، جنهن ثابت ڪيو ته LOIS وٽ اعليٰ اينٽي بيڪٽيريل ملڪيت ۽ بايو مطابقت آهي.ريڊيالوجيڪل ۽ هسٽولوجي نتيجن جي تصديق ڪئي وئي آهي ته مستحڪم لوبريڪنٽ رويي ۽ اينٽي بايو فولنگ خاصيتون 4 هفتن اندر امپلانٽيشن کان پوءِ هڏن جي شفا جي عمل ۾ دير ڪرڻ کان سواءِ اثرائتي اينٽي انفيڪشن ۽ مدافعتي فرار ڪارڪردگي حاصل ڪري سگهن ٿيون.
شڪل 1A ترقي يافته LOIS جو هڪ اسڪيمي ڊاگرام ڏيکاري ٿو، جيڪو خرگوش فيمورل فريڪچر ماڊل ۾ مائڪرو/نانو-اسڪيل ڍانچي سان لڳايو ويو آهي ته جيئن ان جي بهترين اينٽي بايولوجيڪل فولنگ ۽ اينٽي انفڪشن ملڪيتن جي تصديق ٿئي.هڪ بايوميميٽڪ طريقو استعمال ڪيو ويندو آهي پاڻيءَ جي برتن جي ٻوٽي جي مٿاڇري کي ٺهڪائڻ لاءِ، ۽ مٿاڇري جي مائيڪرو/نانو ڍانچي جي اندر هڪ لوبريڪنٽ پرت کي شامل ڪري بائيوفولنگ کي روڪڻ لاءِ.مٿاڇري کي لوبريڪنٽ سان لڳايو ويو آهي، حياتياتي مواد ۽ مٿاڇري جي وچ ۾ رابطي کي گھٽائي سگھي ٿو.تنهن ڪري، مٿاڇري تي مستحڪم ڪيميائي بانڊ جي ٺهڻ جي ڪري، ان کي شاندار antifouling ڪارڪردگي ۽ ڊگهي مدت جي استحڪام آهي.نتيجي طور، سڻڻ واري مٿاڇري جي اينٽي بايوفولنگ جا خاصيتون بايوميڊيڪل تحقيق ۾ مختلف عملي ايپليڪيشنن کي اجازت ڏين ٿيون.بهرحال، وسيع تحقيق ڪيئن ٿي سگهي ٿي ته هي خاص مٿاڇري جسم ۾ مداخلت ڪري ٿي.البومين ۽ بايوفيلم بيڪٽيريا استعمال ڪندي ويٽرو ۾ ننگي ذيلي ذخيري سان LOIS جو مقابلو ڪندي، LOIS جي غير چپچپا جي تصديق ڪري سگهجي ٿي (شڪل 1B).ان کان علاوه، مائل بيئر سبسٽرٽ ۽ LOIS سبسٽرٽ (Figure S1 ۽ Movie S1) تي پاڻي جي بوندن کي رولڻ سان، حياتياتي آلودگي جي ڪارڪردگي جو مظاهرو ڪري سگهجي ٿو.جيئن ته فلورسنس خوردبيني تصوير ۾ ڏيکاريل آهي، پروٽين ۽ بيڪٽيريا جي معطلي ۾ ڦهليل ذيلي ذخيري مٿاڇري تي وڏي مقدار ۾ حياتياتي مواد کي ظاهر ڪيو.تنهن هوندي به، ان جي شاندار مخالف بايوفولنگ ملڪيت جي ڪري، LOIS مشڪل سان ڪنهن به فلوروسينس کي ڏيکاري ٿو.ان جي اينٽي بايوفولنگ ۽ اينٽي انفڪشن خاصيتن جي تصديق ڪرڻ لاءِ، LOIS کي آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي مٿاڇري تي هڏن جي ٺهڻ (پليٽس ۽ اسڪرو) لاءِ لاڳو ڪيو ويو ۽ هڪ خرگوش فرڪچر ماڊل ۾ رکيو ويو.امپلانٽيشن کان اڳ، ننگي آرٿوپيڊڪ امپلانٽ ۽ LOIS کي 12 ڪلاڪن تائين بيڪٽيريا جي معطلي ۾ رکيو ويو.اڳ-انڪيوبيشن انهي ڳالهه کي يقيني بڻائي ٿي ته هڪ بايوفيلم ٺهيل آهي مقابلي لاءِ بي نقاب ٿيل امپلانٽ جي مٿاڇري تي.شڪل 1C فريڪچر سائيٽ جي تصوير ڏيکاري ٿو 4 هفتا بعد امپلانٽيشن.کاٻي پاسي، هڪ ننگي آرٿوپيڊڪ امپلانٽ سان گڏ هڪ خرگوش، امپلانٽ جي مٿاڇري تي بايو فلم جي ٺهڻ سبب سوزش جي سخت سطح ڏيکاري ٿي.سامهون نتيجو LOIS سان لڳل خرگوش ۾ ڏٺو ويو، اهو آهي، LOIS جي ڀرپاسي جي بافتن ۾ نه ته انفيڪشن جا نشان ظاهر ڪيا ويا ۽ نه ئي سوزش جا نشان.ان کان علاوه، آپٽيڪل تصوير کاٻي پاسي واري خرگوش جي سرجري واري سائيٽ کي ظاهر ٿيل امپلانٽ سان اشارو ڪري ٿي، اهو ظاهر ڪري ٿو ته بي نقاب ٿيل امپلانٽ جي مٿاڇري تي موجود ڪو به گهڻائي چپس موجود نه هئا LOIS جي مٿاڇري تي.اهو ڏيکاري ٿو ته LOIS ۾ ڊگهي مدت جي استحڪام آهي ۽ ان جي مخالف حياتياتي فولنگ ۽ مخالف آسنجن ملڪيت کي برقرار رکڻ جي صلاحيت آهي.
(الف) LOIS جو اسڪيميٽ ڊاگرام ۽ ان جي امپلانٽيشن هڪ خرگوش فيمورل فرائيچر ماڊل ۾.(ب) ننگي مٿاڇري تي پروٽين ۽ بيڪٽيريل بائيوفلم جي فلورسنس خوردبيني تصوير ۽ LOIS سبسٽرٽ.امپلانٽيشن کان 4 هفتا پوءِ، (سي) فريڪچر سائيٽ جي فوٽوگرافڪ تصوير ۽ (ڊي) هڪ ايڪسري تصوير (هڪ ڳاڙهي مستطيل سان نمايان ٿيل).تصوير جي مهرباني: ڪيومين چا، يونسئي يونيورسٽي.
جراثيم، بي نقاب ٿيل منفي طور تي لاڳو ٿيل خرگوش هڪ عام هڏن جي شفا جي عمل کي ظاهر ڪيو بغير ڪنهن سوزش يا انفيڪشن جي نشانين جي.ٻئي طرف، SHP امپلانٽس هڪ بيڪٽيريا معطلي ۾ اڳ ۾ پکڙيل آهن، ڀرپاسي جي بافتن تي انفيڪشن سان لاڳاپيل سوزش جي نمائش ڪن ٿا.اهو هڪ ڊگهي وقت تائين بيڪٽيريا جي آسن کي روڪڻ جي ناڪامي جي ڪري منسوب ڪري سگهجي ٿو (شڪل S2).اهو ثابت ڪرڻ لاءِ ته LOIS شفا جي عمل کي متاثر نٿو ڪري، پر امپلانٽيشن سان لاڳاپيل ممڪن انفيڪشن کي روڪي ٿو، فرڪچر سائيٽ تي بي نقاب مثبت ميٽرڪس ۽ LOIS جي ايڪس ري تصويرون جو مقابلو ڪيو ويو (شڪل 1D).بيئر مثبت امپلانٽ جي ايڪس ري تصوير مسلسل اوستيوليسس لائينز ڏيکاري ٿي، ظاهر ڪري ٿو ته هڏا مڪمل طور تي شفا نه هئي.اهو مشورو ڏئي ٿو ته هڏن جي بحالي واري عمل ۾ تمام گهڻي دير ٿي سگهي ٿي انفڪشن سان لاڳاپيل سوزش جي ڪري.ان جي برعڪس، اهو ظاهر ڪيو ويو آهي ته خرگوش جيڪي LOIS سان لاڳو ڪيا ويا آهن انهن کي شفا ڏني وئي هئي ۽ ڪنهن به واضح ڀڃڪڙي سائيٽ نه ڏيکاري.
طبي امپلانٽس کي ڊگھي مدت جي استحڪام ۽ ڪارڪردگي سان ترقي ڪرڻ لاء (بشمول بائيوفولنگ جي مزاحمت)، ڪيتريون ئي ڪوششون ڪيون ويون آهن.بهرحال، مختلف حياتياتي مادي جي موجودگي ۽ بافتن جي آسن جي متحرڪ انهن جي ڪلينڪ طور تي قابل اعتماد طريقن جي ترقي کي محدود ڪري ٿي.انهن خامين کي دور ڪرڻ لاءِ، اسان هڪ مائيڪرو/نانو ليئرڊ ڍانچي ۽ ڪيميائي طور تبديل ٿيل مٿاڇري تيار ڪئي آهي، جيڪا اعليٰ ڪيپيلري قوت ۽ ڪيميائي لاڳاپن جي ڪري بهتر ڪئي وئي آهي ته جيئن تمام گهڻي حد تائين نرم لوبريڪنٽ رکي سگهجي.شڪل 2A LOIS جي مجموعي پيداوار واري عمل کي ڏيکاري ٿو.پهريون، هڪ ميڊيڪل گريڊ اسٽينلیس سٹیل (SS) 304 سبسٽريٽ تيار ڪريو.ٻيو، مائڪرو/نانو ڍانچي ايس ايس سبسٽريٽ تي ٺهيل آهي ڪيميائي ايچنگ ذريعي هائڊرو فلورڪ ايسڊ (HF) حل استعمال ڪندي.ايس ايس جي سنکنرن جي مزاحمت کي بحال ڪرڻ لاء، هڪ نائٽرڪ ايسڊ (HNO3) حل (31) استعمال ڪيو ويندو آهي ايچ ٿيل سبسٽريٽ کي پروسيس ڪرڻ لاء.Passivation SS substrate جي سنکنرن جي مزاحمت کي وڌائي ٿو ۽ خاص طور تي سنکنرن جي عمل کي سست ڪري ٿو جيڪا LOIS جي مجموعي ڪارڪردگي کي گھٽائي سگھي ٿي.ان کان پوء، 1H، 1H، 2H، 2H-perfluorooctyltriethoxysilane (POTS) سان گڏ هڪ خود گڏ ٿيل monolayer (SAM) ٺاهيندي، مٿاڇري کي ڪيميائي طريقي سان تبديل ڪيو ويو آهي ته مٿاڇري جي وچ ۾ ڪيميائي رابطي کي بهتر ڪرڻ ۽ هموار سڻڪ جي لاڳاپي کي.مٿاڇري جي تبديليءَ سان ٺهيل مائڪرو/نانو-اسڪيل ٺهيل مٿاڇري جي مٿاڇري جي توانائي گھٽجي ٿي، جيڪا هموار سڻڪ جي مٿاڇري جي توانائي سان ملي ٿي.هي لوبريڪنٽ کي مڪمل طور تي ويٽ ٿيڻ جي اجازت ڏئي ٿو، ان ڪري مٿاڇري تي هڪ مستحڪم لوبريڪٽ پرت ٺاهي ٿي.تبديل ٿيل مٿاڇري کي وڌايو ويو هائيڊروفوبيسيٽي ڏيکاري ٿو.نتيجن مان ظاهر ٿئي ٿو ته ڦلڻ وارو لوبريڪٽ LOIS تي مستحڪم رويي جي نمائش ڪري ٿو اعلي ڪيميائي لاڳاپي ۽ ڪيپيلري قوت جي ڪري مائڪرو/نانو ڍانچي (32, 33).ايس ايس جي مٿاڇري تي نظرياتي تبديلين کان پوء مٿاڇري جي تبديلي ۽ لوبرڪ انجيڪشن جو اڀياس ڪيو ويو.مٿاڇري تي ٺهيل مائڪرو/نانو پرت وارو ڍانچو بصري تبديلين جو سبب بڻجي سگهي ٿو ۽ مٿاڇري کي اونداهو ڪري سگهي ٿو.اهو رجحان ٿلهي مٿاڇري تي وڌايل روشني ڦهلائڻ واري اثر سان منسوب ڪيو ويو آهي، جيڪو روشني جي ڇڪڻ واري ميڪانيزم (34) جي ڪري ڦهليل موٽڻ کي وڌائي ٿو.ان کان سواء، لوڻ واري انجڻ کان پوء، LOIS اونڌو ٿي ويندو آهي.لوڻ واري پرت سبب گهٽ روشنيءَ کي ذيلي ذخيري مان ظاهر ٿئي ٿو، ان ڪري LOIS کي اونداهو ڪري ٿو.مائڪرو اسٽرڪچر/نانو اسٽريچر کي بهتر ڪرڻ لاءِ ننڍڙن ننڍڙن سلائيڊنگ اينگل (SA) کي ڏيکارڻ لاءِ اينٽي بائيو فولنگ ڪارڪردگي حاصل ڪرڻ لاءِ، اسڪيننگ اليڪٽران مائڪرو اسڪوپي (SEM) ۽ ايٽمي جوڙا استعمال ڪيا ويا مختلف HF ايچنگ جي وقتن کي انجام ڏيڻ لاءِ (0, 3).، 15 ۽ 60 منٽ) فورس مائڪرو اسڪوپ (AFM) (شڪل 2B).SEM ۽ AFM تصويرون ڏيکارين ٿيون ته ايچنگ جي ٿورڙي وقت کان پوءِ (اڇنگ جا 3 منٽ)، بيئر سبسٽريٽ اڻ برابر نانو-پيماني تي خرابي پيدا ڪئي آهي.مٿاڇري جي خرابيءَ ۾ تبديليءَ جي وقت سان تبديلي اچي ٿي (شڪل S3).وقت-مختلف وکر ڏيکاري ٿو ته مٿاڇري جي خرابي وڌندي رهي ٿي ۽ ايچنگ جي 15 منٽن تي ان جي چوٽي تي پهچي ٿي، ۽ ان کان پوء 30 منٽن جي ايڇنگ تي صرف ٿلهي جي قيمت ۾ ٿوري گهٽتائي ڏسڻ ۾ اچي ٿي.هن نقطي تي، نانو-سطح جي خرابي کي هٽايو ويندو آهي، جڏهن ته مائڪرو-سطح جي خرابي کي مضبوطيء سان ترقي ڪري ٿو، خرابي جي تبديلي کي وڌيڪ مستحڪم بڻائي ٿو.30 منٽن کان وڌيڪ ايچنگ ڪرڻ کان پوءِ، ٿڌ ۾ وڌيڪ اضافو ڏسڻ ۾ اچي ٿو، جنهن جي وضاحت هن ريت ڪئي وئي آهي: SS فولاد جو ٺهيل آهي، جنهن ۾ لوهه، ڪروميم، نڪيل، مولبيڊينم ۽ ٻيا ڪيترائي عنصر شامل آهن.انهن عنصرن ۾، لوهه، ڪروميم ۽ مولبيڊينم اهم ڪردار ادا ڪن ٿا مائڪرون/نانو-اسڪيل رَفنس (ايس ايس) تي HF ايچنگ ذريعي.corrosion جي شروعاتي مرحلن ۾، لوهه ۽ ڪروميم بنيادي طور تي corroded آهن ڇاڪاڻ ته molybdenum molibdenum کان وڌيڪ corrosion resistance آهي.جيئن جيئن ايچنگ اڳتي وڌندي آهي، تيئن ايچنگ جو حل مقامي اوور سيچريشن تائين پهچندو آهي، ايچنگ جي ڪري فلورائڊس ۽ آڪسائيڊس ٺاهيندا آهن.فلورائڊ ۽ آڪسائيڊ تيز ٿي وڃن ٿا ۽ آخرڪار مٿاڇري تي ٻيهر جمع ٿين ٿا، مائڪرن/نانو رينج (31) ۾ مٿاڇري جي خرابي پيدا ڪري ٿي.هي مائڪرو / نانو-سطح جي خرابي LOIS جي خود شفا جي ملڪيت ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿي.ٻٽي پيماني جي مٿاڇري تي هڪ هم وقت سازي اثر پيدا ڪري ٿي، وڏي پئماني تي ڪيپيلري قوت وڌائي ٿي.اهو رجحان سڻڪ کي اجازت ڏئي ٿو ته مٿاڇري کي مضبوط طور تي داخل ڪري ۽ خود شفا جي ملڪيت ۾ حصو ڏئي ٿو (35).ٿلهي جي ٺهڻ جو دارومدار انجڻ جي وقت تي آهي.ايچنگ جي 10 منٽن کان هيٺ، مٿاڇري تي صرف نانو-اسڪيل رَف (Rughness) هوندي آهي، جيڪا بائيوفولنگ جي مزاحمت (36) رکڻ لاءِ ڪافي لوبريڪنٽ رکڻ لاءِ ڪافي نه هوندي آهي.ٻئي طرف، جيڪڏهن نچڻ جو وقت 30 منٽن کان وڌيڪ آهي، ته لوهه ۽ ڪروميم جي ٻيهر جمع ٿيڻ سان ٺهيل نانو-اسڪيل ٿڌائي غائب ٿي ويندي، ۽ مولبيڊينم جي ڪري صرف مائڪرو-اسڪيل خرابي باقي رهندي.اوور ايچ ٿيل مٿاڇري ۾ نانو-اسڪيل جي خرابي نه هوندي آهي ۽ ٻن مرحلن جي خرابيءَ جو هم وقت سازي اثر وڃائي ويهندي آهي، جيڪا LOIS جي خود شفا جي خاصيتن کي منفي طور تي متاثر ڪري ٿي.SA ماپون مختلف ايچنگ جي وقتن سان سبسٽرن تي ڪيا ويا ته جيئن مخالف فاؤلنگ ڪارڪردگي ثابت ٿئي.مختلف قسم جا مائع چونڊيا ويا viscosity ۽ مٿاڇري جي توانائي جي بنياد تي، جن ۾ deionized (DI) پاڻي، رت، ethylene glycol (EG)، ethanol (EtOH) ۽ hexadecane (HD) (Figure S4).وقت-مختلف ايچنگ جو نمونو ڏيکاري ٿو ته مختلف مائعن لاءِ مختلف سطحي توانائي ۽ ويسڪوسيٽيز سان، 15 منٽن جي ايڇنگ کان پوءِ LOIS جو SA سڀ کان گهٽ آهي.ان ڪري، LOIS کي 15 منٽن لاءِ مائرن ۽ نانو-اسڪيل رَفنس ٺاهڻ لاءِ اُچارڻ لاءِ بهتر ڪيو ويو آهي، جيڪو لوبريڪنٽ جي استحڪام کي مؤثر طريقي سان برقرار رکڻ لاءِ موزون آهي ۽ بهترين اينٽي فولنگ ملڪيت.
(الف) LOIS جي چار-قدم جي پيداوار واري عمل جو اسڪيميٽ ڊراگرام.انسيٽ ڏيکاري ٿو SAM سبسٽٽ تي ٺهيل.(B) SEM ۽ AFM تصويرون، مختلف اينچنگ وقتن جي تحت سبسٽرٽ جي مائڪرو/نانو ڍانچي کي بهتر ڪرڻ لاءِ استعمال ٿينديون آهن.X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) اسپيڪٽرا جو (C) Cr2p ۽ (D) F1s کان پوءِ مٿاڇري جي گذرڻ ۽ SAM ڪوٽنگ.au، صوابديدي يونٽ.(E) نمائندي تصويرون پاڻيءَ جي بوندن تي ننگي، ڇيڙيل، SHP ۽ LOIS ذيلي ذخيري تي.(F) رابطي جي زاويه (CA) ۽ SA ماپ مائع جي مختلف سطحن جي تڪرار سان SHP ۽ LOIS تي.ڊيٽا کي بيان ڪيو ويو آهي مطلب ± SD.
ان کان پوء، مٿاڇري جي ڪيميائي خاصيتن ۾ تبديلي جي تصديق ڪرڻ لاء، ايڪس ري فوٽو اليڪٽران اسپيڪٽروڪوپي (XPS) استعمال ڪيو ويو ته هر سطح جي ڪوٽنگ کان پوء سبسٽٽ جي سطح جي ڪيميائي ساخت ۾ تبديلي جو مطالعو ڪرڻ لاء.شڪل 2C ڏيکاري ٿو XPS جي ماپ جا نتيجا HF ايچ ٿيل مٿاڇري ۽ HNO 3 علاج ٿيل مٿاڇري.587.3 ۽ 577.7 eV تي ٻه مکيه چوٽيون ڪروميم آڪسائيڊ پرت ۾ موجود Cr-O بانڊ ڏانهن منسوب ٿي سگهن ٿيون، جيڪو HF ايچ ٿيل سطح کان بنيادي فرق آهي.اهو بنيادي طور تي HNO3 ذريعي سطح تي لوهه ۽ ڪروميم فلورائيڊ جي استعمال جي ڪري آهي.HNO3-بنياد ايچنگ ڪروميم کي اجازت ڏئي ٿي ته مٿاڇري تي هڪ پاسو ويٽنگ آڪسائيڊ پرت ٺاهي، جيڪا ايچ ٿيل SS کي ٻيهر سنکنرن جي خلاف مزاحمتي بڻائي ٿي.شڪل 2D ۾، XPS اسپيڪٽرا حاصل ڪيا ويا ته تصديق ڪرڻ لاءِ ته فلورو ڪاربن تي ٻڌل سائلين SAM ڪوٽنگ کان پوءِ مٿاڇري تي ٺھيو ويو، جنھن ۾ EG، بلڊ ۽ EtOH لاءِ به انتهائي تيز مائع ڀڃڻ واري صلاحيت آھي.SAM ڪوٽنگ مڪمل ڪئي وئي آهي سلين فنڪشنل گروپن کي رد عمل ڪندي هائيڊروڪسيل گروپن سان پلازما علاج سان ٺهيل.نتيجي طور، CF2 ۽ CF3 چوٽي ۾ هڪ اهم اضافو ڏٺو ويو.286 ۽ 296 eV جي وچ ۾ پابند توانائي ظاهر ڪري ٿي ته ڪيميائي ترميمي ڪاميابي سان SAM ڪوٽنگ ذريعي مڪمل ڪئي وئي آهي.SHP ڏيکاري ٿو نسبتا وڏيون CF2 (290.1 ​​eV) ۽ CF3 (293.3 eV) چوٽيون، جيڪي مٿاڇري تي ٺهيل فلورو ڪاربن جي بنياد تي سلين جي سبب آهن.شڪل 2E ڏيکاري ٿو نمائندي آپٽيڪل تصويرن جي رابطي جي زاويه (CA) جي ماپن جي مختلف گروپن لاءِ deionized پاڻي جي ننگي، etched، SHP، ۽ LOIS سان رابطي ۾.اهي تصويرون ڏيکارين ٿيون ته ڪيميڪل ايچنگ ذريعي ٺهيل مائيڪرو/نانو ڍانچي جي ڪري ڇيڙيل مٿاڇري هائيڊروفيلڪ ٿي وڃي ٿي ته جيئن deionized پاڻي ڍانچي ۾ جذب ​​ٿئي.بهرحال، جڏهن سبسٽريٽ کي SAM سان گڏ ڪيو ويندو آهي، اهو سبسٽريٽ مضبوط پاڻي جي ڀڃڪڙي ڏيکاري ٿو، تنهنڪري هڪ مٿاڇري SHP ٺهيل آهي ۽ پاڻي ۽ مٿاڇري جي وچ ۾ رابطي واري علائقي ننڍڙو آهي.آخرڪار، CA ۾ گھٽتائي LOIS ۾ ڏٺو ويو، جنھن کي منسوب ڪري سگھجي ٿو سڻڪ جي دخول کي microstructure ۾، اھڙي طرح رابطي واري علائقي کي وڌايو.ثابت ڪرڻ لاءِ ته مٿاڇري ۾ بهترين مائع ڀڃڻ واري ۽ غير چپپڻ واري ملڪيت آهي، LOIS جو مقابلو ڪيو ويو SHP سبسٽرٽ سان CA ۽ SA کي ماپڻ سان مختلف مائع استعمال ڪندي (Figure 2F).مختلف قسم جا مائع چونڊيا ويا viscosity ۽ مٿاڇري جي توانائي جي بنياد تي، جن ۾ deionized پاڻي، رت، EG، EtOH ۽ HD (Figure S4).CA جي ماپ جا نتيجا ڏيکاريا وڃن ٿا ته جڏھن CA HD ڏانھن ھلندو آھي، CA جي گھٽتائي جي قيمت، جتي CA وٽ گھٽ سطحي توانائي آھي.ان کان سواء، مجموعي CA جو LOIS گهٽ آهي.بهرحال، SA ماپ مڪمل طور تي مختلف رجحان ڏيکاري ٿو.سواءِ آئنائيزڊ پاڻي جي، سڀ مائع SHP سبسٽريٽ تي چڙهڻ کان سواءِ لڳندا آهن.ٻئي طرف، LOIS هڪ تمام گهٽ SA ڏيکاري ٿو، جتي جڏهن سمورو مائع 10 ° کان 15 ° کان گهٽ هڪ زاويه تي ٿلهو آهي، سڀ مائع ڦري ويندا.اهو سختي سان ڏيکاري ٿو ته LOIS جي غير چپچپا SHP مٿاڇري کان بهتر آهي.ان کان علاوه، LOIS ڪوٽنگون پڻ مختلف قسم جي مواد تي لاڳو ٿين ٿيون، جن ۾ ٽائيٽينيم (Ti)، پوليفينلسلفون (PPSU)، پولي آڪسيميٿيلين (POM)، پوليٿر ايٿر ڪيٽون (PEEK) ۽ بايوابسوربل پوليمر (PLGA) شامل آهن، اهي امپلانٽيبل آرٿوپيڊڪ مواد آهن (شڪل) S5)).LOIS پاران علاج ڪيل مواد تي بوندن جون ترتيب وار تصويرون ظاهر ڪن ٿيون ته LOIS جي اينٽي بايو فولنگ ملڪيت سڀني ذيلي ذيلي ذخيري تي ساڳيا آهن.ان کان علاوه، CA ۽ SA جي ماپ جا نتيجا ڏيکاريا آھن ته LOIS جي غير چپچپا ملڪيت ٻين مواد تي لاڳو ڪري سگھجن ٿيون.
LOIS جي مخالف ڦڦڙن جي خاصيتن جي تصديق ڪرڻ لاء، مختلف قسم جا ذيلي ذخيرا (بشمول بيئر، ايچڊ، SHP ۽ LOIS) Pseudomonas aeruginosa ۽ MRSA سان گڏ ڪيا ويا.اهي ٻه بيڪرياريا نمائندي اسپتال بيڪرياريا جي طور تي چونڊيا ويا، جيڪي بايوفيلمز جي ٺهڻ جي ڪري سگھن ٿا، ايس ايس آئي (37).شڪل 3 (A ۽ B) ڏيکاري ٿو فلوروسينس خوردبيني تصويرن ۽ ڪالوني ٺاهڻ واري يونٽ (CFU) ماپ جا نتيجا جيڪي بيڪٽيريا جي معطلي ۾ پکڙيل ذيلي ذخيري ۾ مختصر مدت (12 ڪلاڪ) ۽ ڊگهي مدت (72 ڪلاڪ)، ترتيب سان.ٿوري وقت ۾، بيڪٽيريا ڪلستر ٺاهيندا ۽ سائيز ۾ وڌندا، پاڻ کي بلغم وانگر مادي سان ڍڪيندا ۽ انهن کي ختم ٿيڻ کان روڪيندا.بهرحال، 72-ڪلاڪن جي انڪيوبيشن دوران، بيڪٽيريا پختو ٿي ويندا ۽ وڌيڪ ڪالونيون يا ڪلستر ٺاهڻ لاءِ منتشر ٿيڻ آسان ٿي ويندا.تنهن ڪري، اهو سمجهي سگهجي ٿو ته 72-ڪلاڪ انڪوبيشن ڊگهي مدت آهي ۽ سطح تي مضبوط بايوفيلم ٺاهڻ لاء مناسب انڪوبيشن وقت آهي (38).ٿورڙي عرصي ۾، SHP جي مٿاڇري ۽ مٿاڇري ۾ بيڪٽيريل آسنجن جي نمائش ڪئي وئي، جيڪا بيئر سبسٽريٽ جي مقابلي ۾ 25٪ کان 50٪ تائين گھٽجي وئي.تنهن هوندي به، ان جي شاندار مخالف بايوفولنگ ڪارڪردگي ۽ استحڪام جي ڪري، LOIS مختصر ۽ ڊگهي مدت ۾ بيڪٽيريا بايوفلم آسنجن کي نه ڏيکاريو.اسڪيميٽ ڊاگرام (شڪل 3C) اينٽي بايولوجيڪل فولنگ ميڪانيزم جي وضاحت کي بيان ڪري ٿو ايچنگ حل، SHP ۽ LOIS.مفروضو اهو آهي ته هائيڊروفيلڪ ملڪيتن سان ٺهيل سبسٽريٽ جي مٿاڇري واري ايراضي بيئر سبسٽرٽ کان وڌيڪ هوندي.تنهن ڪري، وڌيڪ بيڪٽيريل آسنجن کي ڇڪيل سبسٽريٽ تي ٿيندي.بهرحال، ننگي سبسٽريٽ جي مقابلي ۾، ايچ ٿيل سبسٽريٽ جي سطح تي تمام گهٽ بايوفلم ٺهيل آهي.اهو ان ڪري جو پاڻي جا ماليڪيول مضبوطيءَ سان هائيڊروفيلڪ مٿاڇري سان جڙيل هوندا آهن ۽ پاڻيءَ لاءِ لوبريڪنٽ طور ڪم ڪندا آهن، اهڙيءَ طرح مختصر مدت ۾ بيڪٽيريا جي چپن ۾ مداخلت ڪندا آهن (39).تنهن هوندي به، پاڻيء جي انوولن جي پرت تمام پتلي آهي ۽ بيڪٽيريا معطلي ۾ گھلائي ٿي.تنهن ڪري، پاڻيء جي سالم پرت هڪ ڊگهي وقت تائين غائب ٿي وڃي ٿي، جنهن جي نتيجي ۾ وسيع بيڪٽيريا جي آسنجن ۽ ڦهلائڻ.SHP لاء، ان جي مختصر مدت جي غير ويٽنگ ملڪيت جي ڪري، بيڪٽيريا جي آسن کي روڪيو ويو آهي.گھٽ ٿيل بيڪٽيريا آسنجن کي منسوب ڪري سگھجي ٿو ايئر جي جبلن ۾ ڦاٿل پرت جي جوڙجڪ ۽ هيٺين سطح جي توانائي، ان ڪري بيڪٽيريا جي معطلي ۽ سطح جي وچ ۾ رابطي کي گھٽائي ٿي.بهرحال، SHP ۾ وسيع بيڪٽيريا آسنجن ڏٺو ويو آهي ڇاڪاڻ ته اهو هڪ ڊگهي وقت تائين ان جي مخالف فولنگ ملڪيت کي وڃائي ڇڏيو.اهو بنيادي طور تي هائڊروسٽٽڪ پريشر ۽ پاڻيء ۾ هوا جي ڦهلائڻ جي ڪري هوا جي جبلن جي غائب ٿيڻ جو سبب آهي.اهو بنيادي طور تي هوا جي جبلن جي غائب ٿيڻ جي ڪري آهي تحلیل ۽ پرت واري ڍانچي جيڪا آسنجن لاءِ وڏي مٿاڇري واري ايراضي فراهم ڪري ٿي (27, 40).انهن ٻن ذيلي ذخيرن جي برعڪس، جيڪي ڊگهي مدت جي استحڪام تي اهم اثر رکن ٿا، LOIS ۾ موجود لوبريڪيٽنگ لوبريڪنٽ کي مائڪرو/نانو ڍانچي ۾ داخل ڪيو ويندو آهي ۽ ڊگهي مدت ۾ به غائب نه ٿيندو.مائيڪرو/نانو ڍانچي سان ڀريل لوبريڪنٽ ڏاڍا مستحڪم هوندا آهن ۽ انهن جي اعلي ڪيميائي لاڳاپي جي ڪري مٿاڇري تي زور سان متوجه ٿيندا آهن، ان ڪري بيڪٽيريا کي گهڻي وقت تائين آسپاس روڪيندا آهن.شڪل S6 ڏيکاري ٿو هڪ عڪاسي ڪنفوڪل خوردبيني تصوير هڪ لوبريڪٽ-انفيوزڊ سبسٽرٽ جو فاسفيٽ بفر ٿيل سالين (PBS) ۾ غرق ٿيل آهي.مسلسل تصويرون ڏيکارين ٿيون ته 120 ڪلاڪن جي معمولي ڇڪتاڻ (120 rpm) کان پوءِ به، LOIS تي سڻڪ واري پرت بدليل رهي ٿي، جيڪا وهڪري جي حالتن هيٺ ڊگهي مدت جي استحڪام کي ظاهر ڪري ٿي.اهو فلورائن تي ٻڌل SAM ڪوٽنگ ۽ پرفلوورو ڪاربن تي ٻڌل لوبريڪنٽ جي وچ ۾ اعلي ڪيميائي لاڳاپي جي ڪري آهي، انهي ڪري ته هڪ مستحڪم لوبريڪٽ پرت ٺاهي سگهجي ٿي.تنهن ڪري، مخالف fouling ڪارڪردگي برقرار آهي.ان کان علاوه، ذيلي ذخيرو نمائندن پروٽينن (البومين ۽ فبرينوجن) جي خلاف آزمائي ڪئي وئي، جيڪي پلازما ۾ آهن، سيلز ويجھي مدافعتي ڪم سان لاڳاپيل آهن (ميڪروفيجز ۽ فبروبلاسٽ)، ۽ جيڪي هڏن جي ٺهڻ سان لاڳاپيل آهن.ڪلسيم جو مواد تمام گهڻو آهي.(شڪل 3D، 1 ۽ 2، ۽ شڪل S7) (41، 42).ان کان علاوه، فلورينس خوردبيني تصويرون fibrinogen، albumin ۽ calcium لاء Adhesion ٽيسٽ جي هر سبسٽريٽ گروپ جي مختلف آسنجن خاصيتون ڏيکاريا آهن (شڪل S8).هڏن جي ٺهڻ دوران، نئين ٺهيل هڏن ۽ ڪلسيم جي تہه آرٿوپيڊڪ امپلانٽ جي چوڌاري ٿي سگهي ٿي، جيڪا نه رڳو هٽائڻ ڏکيو بڻائي ٿي، پر ان کي هٽائڻ واري عمل دوران مريض کي غير متوقع نقصان پڻ پهچائي سگھي ٿو.تنهن ڪري، هڏن جي پليٽن ۽ اسڪرو تي ڪلسيم جي ذخيري جي گهٽ سطح آرٿوپيڊڪ سرجري لاءِ فائديمند آهي جنهن کي امپلانٽ هٽائڻ جي ضرورت آهي.فلورسنس جي شدت ۽ سيل جي ڳڻپ جي بنياد تي منسلڪ علائقي جي مقدار جي بنياد تي، اسان تصديق ڪئي ته LOIS ٻين ذيلي ذيلي ذيلي ذخيري جي مقابلي ۾ سڀني بايولوجيڪل مادي لاء بهترين اينٽي بايوفولنگ ملڪيت ڏيکاري ٿو.ان ويٽرو تجربن جي نتيجن موجب، اينٽي بايولوجيڪل فولنگ LOIS آرٿوپيڊڪ امپلانٽس تي لاڳو ڪري سگهجي ٿو، جيڪو نه صرف بايوفيلم بيڪٽيريا جي ڪري ٿيندڙ انفيڪشن کي روڪي سگهي ٿو، پر جسم جي فعال مدافعتي نظام جي ڪري پيدا ٿيندڙ سوزش کي به گهٽائي ٿو.
(الف) 12 ۽ 72 ڪلاڪن لاءِ Pseudomonas aeruginosa ۽ MRSA معطلي ۾ پکڙيل هر گروپ (ننگا، ڇت، SHP ۽ LOIS) جي فلورسنس خوردبيني تصويرون.(ب) هر گروپ جي مٿاڇري تي Pseudomonas aeruginosa ۽ MRSA جي پيروي ڪندڙ CFU جو تعداد.(سي) مختصر-مدت ۽ ڊگھي-مدت ايچنگ، SHP ۽ LOIS جي اينٽي بايولوجيڪل فولنگ ميڪانيزم جو اسڪيمي ڊاگرام.(ڊي) (1) فيبروبلاسٽس جو تعداد هر سبسٽريٽ ۽ فلورسنس خوردبيني تصويرن تي عمل ڪيو ويو سيلز جي بيئر ۽ LOIS تي عمل ڪيو ويو.(2) هڏن جي شفا جي عمل ۾ شامل مدافعتي سان لاڳاپيل پروٽين، البومين ۽ ڪيليسيم جو Adhesion ٽيسٽ (* P <0.05، ** P <0.01، *** P <0.001 ۽ **** P <0.0001).ns، اهم ناهي.
ناگزير مرڪوز دٻاء جي صورت ۾، ميخانياتي استحڪام هميشه antifouling coatings جي درخواست لاء بنيادي چئلينج رهيو آهي.روايتي مخالف سيوريج جيل طريقا پوليمر تي مبني آهن جن ۾ گهٽ پاڻي جي حل ۽ نازڪ آهي.تنهن ڪري، اهي عام طور تي بايوميڊيڪل ايپليڪيشنن ۾ ميڪيڪل دٻاء لاء حساس هوندا آهن.تنهن ڪري، ميڪاني طور تي پائيدار اينٽيفاؤلنگ ڪوٽنگ ايپليڪيشنن لاء هڪ چئلينج رهي ٿو جهڙوڪ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس (43، 44).شڪل 4A(1) آرٿوپيڊڪ امپلانٽس تي لاڳو ٿيل دٻاءُ جي ٻن مکيه قسمن کي ظاھر ڪري ٿو، بشمول اسڪريچنگ (شيئر اسٽريس) ۽ قوتن پاران پيدا ٿيل خراب ٿيل امپلانٽ جي نظري تصوير سان گڏ ڪمپريشن.مثال طور، جڏهن اسڪرو کي اسڪرو ڊرايور سان سخت ڪيو ويندو آهي، يا جڏهن سرجن هڏن جي پليٽ کي ٽوئيزر سان مضبوطيءَ سان پڪڙيندو آهي ۽ دٻاءُ واري قوت لاڳو ڪندو آهي، ته پلاسٽڪ جي هڏن جي پليٽ کي نقصان ٿيندو ۽ ميڪرو ۽ مائڪرو/نانو اسڪيل ٻنهي تي ڇڪجي ويندو (شڪل 4A، 2).اهو جانچڻ لاءِ ته ڇا ٺهيل LOIS پلاسٽڪ سرجري دوران انهن نقصانن کي برداشت ڪري سگهي ٿو، ننگي سبسٽريٽ جي سختي ۽ LOIS کي مائيڪرو/نانو اسڪيل تي مائيڪرو/نانو ڍانچي جي ميڪانياتي خاصيتن جو مطالعو ڪرڻ لاءِ نانو انڊينٽيشن ڪيو ويو اثر (شڪل 4B).اسڪيميٽ ڊراگرام LOIS جي مختلف خرابي واري رويي کي ڏيکاري ٿو ڇاڪاڻ ته مائڪرو / نانو ساخت جي موجودگي جي ڪري.نانو انڊينٽيشن جي نتيجن جي بنياد تي هڪ قوت-بي گھرڻ واري وکر ٺاهي وئي (شڪل 4C).نيري تصوير بيئر سبسٽرٽ جي نمائندگي ڪري ٿي، جيڪا صرف معمولي خرابي ڏيکاري ٿي، جيئن 0.26-μm جي وڌ ۾ وڌ انڊينٽيشن جي کوٽائي سان ڏٺو ويو آهي.ٻئي طرف، LOIS (لال وکر) ۾ مشاهدو نانو انڊنٽيشن فورس ۽ بي گھرڻ ۾ بتدريج اضافو ٿي سگھي ٿو گھٽ ميخانياتي ملڪيت جا نشان، نتيجي ۾ 1.61μm جي nanoindentation جي کوٽائي ۾.اهو ئي سبب آهي جو LOIS ۾ موجود مائڪرو/نانو ڍانچي نانو انڊينٽر جي ٽپ لاءِ تمام گهڻي ترقي واري جاءِ فراهم ڪري ٿي، تنهن ڪري ان جي خرابي بيئر سبسٽرٽ کان وڌيڪ آهي.Konsta-Gdoutos et al.(45) مڃي ٿو ته نانو اسٽريچرز جي موجودگيءَ جي ڪري، نانو انڊينٽيشن ۽ مائڪرو/نانو رَفَس اڻ ڳڻيا نانو انڊينٽيشن وڪڙن جي ڪري ٿي.ڇانو ٿيل علائقو نانو اسٽريچر سان منسوب غير منظم خرابي واري وکر سان ملندو آهي، جڏهن ته غير ڇانو ٿيل علائقو مائڪرو اسٽريچر ڏانهن منسوب ڪيو ويندو آهي.هي خرابي شايد هولڊنگ لوبريڪنٽ جي مائڪرو اسٽريچر/نانو اسٽريچر کي نقصان پهچائي ۽ ان جي اينٽي فولنگ ڪارڪردگي کي منفي طور تي متاثر ڪري.LOIS تي نقصان جي اثر جو مطالعو ڪرڻ لاء، پلاسٽڪ سرجري دوران جسم ۾ مائڪرو / نانو جوڙجڪ کي ناگزير نقصان نقل ڪيو ويو.رت ۽ پروٽين جي آسنجن ٽيسٽ کي استعمال ڪندي، ويٽرو کان پوءِ LOIS جي اينٽي بائيو فولنگ ملڪيت جي استحڪام کي طئي ڪري سگهجي ٿو (شڪل 4D).بصري تصويرن جو هڪ سلسلو ڏيکاري ٿو نقصان جيڪو هر سبسٽريٽ جي سوراخن جي ويجهو ٿيو.اينٽي بايوفولنگ ڪوٽنگ (شڪل 4E) تي ميخانياتي نقصان جي اثر کي ظاهر ڪرڻ لاءِ رت جي آسنجن ٽيسٽ ڪئي وئي.SHP وانگر، اينٽي فولنگ جا خاصيتون نقصان جي ڪري گم ٿي ويندا آهن، ۽ LOIS رت کي ڀڄڻ جي ڪري بهترين اينٽي فولنگ ملڪيتن کي ظاهر ڪري ٿو.اهو ئي سبب آهي، ڇاڪاڻ ته مٿاڇري جي توانائي ڪيپيلري ايڪشن جي ذريعي هلائي ويندي آهي جيڪا خراب ٿيل علائقي کي ڍڪيندي آهي، مائڪرو اسٽرڪچرڊ لوبريڪنٽ لوبريڪنٽ ۾ وهڪري اينٽي فولنگ ملڪيت کي بحال ڪري ٿي (35).ساڳيو رجحان البمين استعمال ڪندي پروٽين جي آسنجن ٽيسٽ ۾ ڏٺو ويو.خراب ٿيل علائقي ۾، SHP جي مٿاڇري تي پروٽين جي آسن کي وڏي پيماني تي مشاهدو ڪيو ويو آهي، ۽ ان جي ايراضيء جي ڪوريج کي ماپ ڪندي، ان کي ننگي سبسٽريٽ جي آسن جي سطح جي اڌ جي طور تي مقدار ۾ ڪري سگهجي ٿو.ٻئي طرف، LOIS پنهنجي اينٽي بايوفولنگ ملڪيتن کي بغير ڪنهن آسنجن (شڪل 4، F ۽ G) کي برقرار رکيو.ان کان علاوه، اسڪرو جي مٿاڇري اڪثر ڪري مضبوط ميڪيڪل دٻاء جي تابع آهي، جهڙوڪ سوراخ ڪرڻ، تنهنڪري اسان LOIS ڪوٽنگ جي قابليت جو اڀياس ڪيو ته ويٽرو ۾ اسڪرو تي برقرار رهي.شڪل 4H مختلف اسڪرو جون بصري تصويرون ڏيکاري ٿو، بشمول بيئر، SHP ۽ LOIS.ڳاڙھو مستطيل ھدف واري علائقي جي نمائندگي ڪري ٿو جتي ھڏن جي امپلانٽيشن دوران مضبوط ميڪانياتي دٻاءُ ٿئي ٿو.پليٽ جي پروٽين جي آسنجن ٽيسٽ وانگر، هڪ فلوروسينس خوردبيني استعمال ڪيو ويندو آهي پروٽين جي آسن جي تصوير ۽ ڪوريج واري علائقي کي ماپ ڪرڻ لاء LOIS ڪوٽنگ جي سالميت کي ثابت ڪرڻ لاء، جيتوڻيڪ مضبوط ميڪيڪل دٻاء جي تحت (شڪل 4، I ۽ J).LOIS-علاج ٿيل اسڪرو شاندار اينٽي فولنگ ڪارڪردگي ڏيکاري ٿو، ۽ تقريبن ڪو به پروٽين سطح تي نه لڳندو آهي.ٻئي طرف، ننگي اسڪرو ۽ SHP اسڪرو ۾ پروٽين جي آسنجن کي ڏٺو ويو، جتي SHP اسڪرو جي ايراضي ڪوريج ننگي اسڪرو جي هڪ ٽيون هئي.ان کان علاوه، آرٿوپيڊڪ امپلانٽ فڪسيشن لاءِ استعمال ڪيو وڃي ٿو ميڪانياتي طور تي مضبوط هجڻ گهرجي ته جيئن فريڪچر سائيٽ تي لاڳو ٿيل دٻاءُ کي منهن ڏئي، جيئن تصوير 4K ۾ ڏيکاريل آهي.تنهن ڪري، ميخانياتي ملڪيت تي ڪيميائي تبديليء جي اثر کي طئي ڪرڻ لاء هڪ موڙيندڙ امتحان ڪيو ويو.ان کان علاوه، اهو ڪيو ويندو آهي امپلانٽ مان مقرر ٿيل دٻاء کي برقرار رکڻ لاء.عمودي ميخانياتي قوت لاڳو ڪريو جيستائين امپلانٽ مڪمل طور تي فولڊ نه ٿي وڃي ۽ هڪ دٻاء وارو وکر حاصل ڪيو وڃي (شڪل 4L، 1).نوجوان جي ماڊلس ۽ لچڪدار طاقت سميت ٻه ملڪيتون بيئر ۽ LOIS سبسٽرن جي وچ ۾ انهن جي ميخانياتي طاقت جي اشارن جي طور تي مقابلو ڪيو ويو (شڪل 4L، 2 ۽ 3).نوجوان جي ماڊيولس مشيني تبديلين کي منهن ڏيڻ جي مواد جي صلاحيت کي ظاهر ڪري ٿو.هر سبسٽريٽ جو نوجوان ماڊلس 41.48±1.01 ۽ 40.06±0.96 GPa آهي، ترتيب سان؛ڏٺو ويو فرق اٽڪل 3.4٪ آهي.ان کان علاوه، اهو ٻڌايو ويو آهي ته موڙيندڙ طاقت، جيڪا مواد جي سختي کي طئي ڪري ٿي، 102.34 ± 1.51 GPa بيئر سبسٽٽ لاء ۽ 96.99 ± 0.86 GPa SHP لاء.بيئر سبسٽريٽ تقريبن 5.3٪ وڌيڪ آهي.ميڪانياتي ملڪيتن ۾ معمولي گھٽتائي شايد نشان جي اثر جي ڪري ٿي سگھي ٿي.نشان جي اثر ۾، مائڪرو / نانو جي خرابي شايد نشان جي هڪ سيٽ جي طور تي ڪم ڪري سگهي ٿي، مقامي دٻاء جي ڪنسنٽريشن جي ڪري ۽ امپلانٽ جي ميخانياتي ملڪيت کي متاثر ڪري ٿو (46).بهرحال، ان حقيقت جي بنياد تي ته انساني ڪارٽيڪل هڏن جي سختي 7.4 ۽ 31.6 GPa جي وچ ۾ ڄاڻايل آهي، ۽ ماپيل LOIS ماڊلس انساني ڪارٽيڪل هڏن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ آهي (47)، LOIS فرڪچر ۽ ان جي مجموعي کي سپورٽ ڪرڻ لاء ڪافي آهي. مشيني خاصيتون گهٽ ۾ گهٽ سطح جي تبديليءَ سان متاثر ٿين ٿيون.
(الف) (1) آپريشن دوران آرٿوپيڊڪ امپلانٽ تي لاڳو ڪيل مشيني دٻاءُ، ۽ (2) خراب ٿيل آرٿوپيڊڪ امپلانٽ جي آپٽيڪل تصوير.(ب) ننگي مٿاڇري تي نانو-مڪنيڪل پراپرٽيز جي ماپ جو اسڪيماتي ڊراگرام نانو انڊينٽيشن ۽ LOIS ذريعي.(سي) ننگي مٿاڇري ۽ LOIS جي نانو انڊنٽيشن فورس-ڊسپليمينٽ وکر.(ڊي) ان ويٽرو تجربن کان پوءِ، مختلف قسم جي آرٿوپيڊڪ پليٽن جي آپٽيڪل تصويرن کي نقل ڪريو (نقصان ٿيل علائقو ڳاڙهي مستطيل سان نمايان ٿيل آهي) آپريشن دوران پيدا ٿيندڙ مشيني دٻاءُ کي نقل ڪرڻ لاءِ.(اي) رت جي آسنجن ٽيسٽ ۽ (F) خراب ٿيل آرٿوپيڊڪ پليٽ گروپ جي پروٽين آسنجن ٽيسٽ.(G) پليٽ تي لڳل پروٽين جي علائقي جي ڪوريج کي ماپ ڪريو.(H) ان ويٽرو تجربي کان پوءِ آرٿوپيڊڪ اسڪرو جي مختلف قسمن جون بصري تصويرون.(I) مختلف ڪوٽنگن جي سالميت جو مطالعو ڪرڻ لاءِ پروٽين ايڊيشن ٽيسٽ.(ج) اسڪرو تي عمل ڪندڙ پروٽين جي علائقي جي ڪوريج کي ماپ ڪريو.(K) خرگوش جي حرڪت جو مقصد ڀريل هڏن تي هڪ مقرر دٻاء پيدا ڪرڻ آهي.(L) (1) موڙيندڙ ٽيسٽ جا نتيجا ۽ بصري تصويرون اڳ ۽ موڙي کان پوءِ.فرق (2) نوجوان جي ماڊلس ۽ (3) بيئر امپلانٽ ۽ SHP جي وچ ۾ موڙيندڙ طاقت.ڊيٽا بيان ڪيا ويا آهن مطلب ± SD (*P <0.05، **P <0.01، ***P <0.001 ۽ ****P <0.0001).تصوير جي مهرباني: ڪيومين چا، يونسئي يونيورسٽي.
ڪلينڪل حالتن ۾، حياتياتي مواد ۽ زخم جي سائيٽن سان اڪثر بيڪٽيريا جو رابطو بالغ، بالغ بايوفيلمس (48).تنهن ڪري، بيمارين جي ڪنٽرول ۽ روڪٿام لاء آمريڪي مرڪز جو اندازو لڳايو ويو آهي ته 65٪ سڀني انساني انفيڪشن جو تعلق بايوفيلم سان آهي (49).انهي صورت ۾، اهو ضروري آهي ته هڪ vivo تجرباتي ڊيزائن مهيا ڪري جيڪا امپلانٽ جي مٿاڇري تي مسلسل بايوفيلم ٺهڻ مهيا ڪري ٿي.تنهن ڪري، اسان هڪ rabbit femoral fracture ماڊل تيار ڪيو جنهن ۾ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس هڪ بيڪٽيريل معطلي ۾ اڳ ۾ پکڙيل هئا ۽ پوءِ خرگوش جي فيمرز ۾ امپلانٽ ڪيو ويو ته جيئن vivo ۾ LOIS جي مخالف فاؤلنگ ملڪيت جو مطالعو ڪيو وڃي.ھيٺين ٽن اھم حقيقتن جي ڪري، بيڪٽيريا انفيڪشن بڪٽريريا معطلي جي سڌي انجيڪشن جي بجاءِ اڳ ڪلچر جي ڪري پيدا ٿين ٿا: (i) خرگوش جو مدافعتي نظام قدرتي طور تي انسانن جي مقابلي ۾ مضبوط آھي.تنهن ڪري، بيڪٽيريا جي معطلي ۽ پلانڪٽونڪ بيڪٽيريا جي انجڻ ممڪن آهي، اهو بائيو فلمن جي ٺهڻ تي ڪو اثر ناهي.(Ii) Planktonic بيڪٽيريا اينٽي بايوٽيڪٽس لاءِ وڌيڪ حساس هوندا آهن، ۽ اينٽي بايوٽڪ دوائون عام طور تي سرجري کان پوءِ استعمال ٿينديون آهن؛آخرڪار، (iii) پلاڪٽنڪ بيڪٽيريا معطل ٿي سگھي ٿو جانور جي جسم جي رطوبت (50).امپلانٽ کي بيڪٽيريا جي معطلي ۾ اڳي ڪلچر ڪرڻ سان، اسان بون جي شفا جي عمل تي بيڪٽيريا انفيڪشن ۽ فارين باڊي ريڪشن (FBR) جي نقصانڪار اثرن جو چڱيءَ طرح مطالعو ڪري سگھون ٿا.خرگوش کي امپلانٽيشن کان 4 هفتا پوءِ قربان ڪيو ويو، ڇاڪاڻ ته هڏن جي شفا جي عمل لاءِ ضروري osseointegration 4 هفتن اندر مڪمل ٿي ويندو.ان کان پوء، امپلانٽس کي خرابي جي مطالعي لاء خرابي مان ڪڍيو ويو.شڪل 5A بيڪٽيريا جي ڦهلائڻ واري ميڪانيزم کي ڏيکاري ٿو.متاثر ٿيل آرٿوپيڊڪ امپلانٽ جسم ۾ متعارف ڪرايو ويندو آهي.بيڪٽيريا جي معطلي ۾ اڳ-انڪيوبيشن جي نتيجي ۾، ننگي امپلانٽس سان لڳل ڇهن خرگوش مان ڇهه متاثر ٿيا، جڏهن ته LOIS-علاج ٿيل امپلانٽس سان لڳل خرگوش مان ڪو به متاثر نه ٿيو.بيڪٽيريل انفڪشن ٽن مرحلن ۾ اڳتي وڌندا آهن، جن ۾ واڌ، پختگي ۽ تڪرار شامل آهن (51).پهرين، جڙيل بيڪٽيريا ٻيهر پيدا ڪن ٿا ۽ سطح تي وڌندا آهن، ۽ پوء بيڪٽيريا هڪ بايو فلم ٺاهيندا آهن جڏهن اهي ايڪسٽرا سيلولر پوليمر (اي پي ايس)، امائلوڊ ۽ ايڪسٽرا سيلولر ڊي اين اي خارج ڪندا آهن.بايوفيلم نه رڳو اينٽي بايوٽيڪٽس جي دخول سان مداخلت ڪري ٿو، پر اينٽي بايوٽڪ-ڊيگريجنگ اينزائمز (جهڙوڪ β-lactamase) (52) جي جمع کي پڻ فروغ ڏئي ٿو.آخرڪار، بايوفيلم بالغ بيڪرياريا کي ڀرپاسي جي بافتن ۾ پکڙيل آهي.تنهن ڪري، انفيڪشن ٿئي ٿي.ان کان علاوه، جڏهن هڪ غير ملڪي جسم جسم ۾ داخل ٿئي ٿو، هڪ انفيڪشن جيڪو مضبوط مدافعتي ردعمل سبب ڪري سگهي ٿو سخت سوزش، درد، ۽ مدافعتي گھٽتائي جو سبب بڻائيندو.شڪل 5B هڪ آرٿوپيڊڪ امپلانٽ جي داخل ٿيڻ جي ڪري ايف بي آر جو هڪ جائزو پيش ڪري ٿو، بلڪه بيڪٽيريا انفيڪشن جي ڪري مدافعتي ردعمل جي ڀيٽ ۾.مدافعتي نظام داخل ٿيل امپلانٽ کي غير ملڪي جسم جي طور تي تسليم ڪري ٿو، ۽ پوء سيلز ۽ بافتن کي غير ملڪي جسم کي ڍڪڻ لاء رد عمل ڪرڻ جو سبب بڻائيندو آهي (53).ايف بي آر جي شروعاتي ڏينهن ۾، آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي مٿاڇري تي هڪ سپلائي ميٽرڪس ٺاهي وئي، جنهن جي نتيجي ۾ فائبرنجن جي جذب جي نتيجي ۾.جذب ٿيل فائبرنجن وري هڪ انتهائي گھڻ فائبرن نيٽ ورڪ ٺاهي ٿو، جيڪو ليوڪوائيٽس جي منسلڪ کي وڌايو (54).هڪ دفعو فائبرن جو نيٽ ورڪ ٺهي ٿو، نيوٽروفيلس جي انفلٽريشن جي ڪري شديد سوزش ٿيندي.ھن مرحلي ۾، مختلف قسم جي سائٽوڪائنز جھڙوڪ tumor necrosis factor-α (TNF-α)، interleukin-4 (IL-4) ۽ IL-β ڇڏيا ويندا آھن، ۽ monocytes امپلانٽيشن سائيٽ ۾ داخل ٿيڻ شروع ڪندا آھن ۽ وشال خاني ۾ فرق ڪرڻ شروع ڪندا آھن.فيج (41، 55، 56).ايف بي آر کي گهٽائڻ هميشه هڪ چئلينج رهيو آهي ڇاڪاڻ ته گهڻو ڪري ايف بي آر شديد ۽ دائمي سوزش جو سبب بڻجي سگهي ٿو، جيڪو موتمار پيچيدگين جو سبب بڻجي سگهي ٿو.بيئر امپلانٽ ۽ LOIS جي ڀرپاسي جي بافتن ۾ بيڪٽيريا انفيڪشن جي اثر جو جائزو وٺڻ لاءِ، هيماتڪسيلين ۽ ايسوسين (H&E) ۽ ميسن ٽرڪروم (MT) داغ استعمال ڪيا ويا.ننگي ذيلي ذخيري سان لڳل خرگوش لاءِ، سخت بيڪٽيريل انفيڪشن وڌي ويا، ۽ H&E ٽشو سلائيڊ واضح طور تي سوزش جي ڪري ڦڦڙن ۽ نڪروسس کي ظاهر ڪيو.ٻئي طرف، انتهائي مضبوط اينٽي بايوفولنگ مٿاڇري LOIS بيڪٽيريا جي آسن کي روڪيندي آهي، تنهنڪري اهو انفيڪشن جا نشان نه ڏيکاريندو آهي ۽ سوزش کي گهٽائيندو آهي (شڪل 5C).ايم ٽي داغ جا نتيجا ساڳيا رجحان ڏيکاريا.بهرحال، MT جي داغدار LOIS سان لڳل خرگوش ۾ پڻ edema ڏيکاريا آهن، ظاهر ڪن ٿا ته وصولي ٿيڻ واري آهي (Figure 5D).مدافعتي ردعمل جي درجي جو مطالعو ڪرڻ لاء، مدافعتي ردعمل سان لاڳاپيل cytokines TNF-α ۽ IL-6 استعمال ڪندي immunohistochemical (IHC) داغ ڪيو ويو.هڪ ننگي ناڪاري امپلانٽ جيڪا بيڪٽيريا جي سامهون نه هئي ان جي مقابلي ۾ هڪ LOIS سان ڪئي وئي جيڪا بيڪٽيريا جي سامهون هئي پر بيڪٽيريا انفيڪشن جي غير موجودگي ۾ شفا جي عمل جو مطالعو ڪرڻ لاءِ متاثر نه ٿيو.شڪل 5E IHC سلائڊ جي هڪ نظرياتي تصوير ڏيکاري ٿو جيڪا TNF-α کي ظاهر ڪري ٿي.ڳاڙهو علائقو مدافعتي ردعمل جي نمائندگي ڪري ٿو، اشارو ڪري ٿو ته LOIS ۾ مدافعتي ردعمل ٿورڙي گھٽجي وئي آھي.ان کان علاوه، LOIS ۾ IL-6 جو اظهار sterile ننگي (شڪل 5F) جي منفي اظهار کان خاص طور تي گهٽ هو.cytokine جو اظهار مقدار مطابق ڪيو ويو اينٽي باڊي جي داغ واري علائقي کي ماپڻ سان سائٽوڪائن سان لاڳاپيل (شڪل 5G).منفي امپلانٽس جي سامهون آيل خرگوش جي مقابلي ۾، LOIS سان لڳل خرگوش جي اظهار جي سطح گهٽ هئي، هڪ بامعني فرق ڏيکاريندي.سائٽوڪائن جي اظهار ۾ گهٽتائي ظاهر ڪري ٿي ته LOIS جي ڊگھي مدت، مستحڪم مخالف ڦڦڙن جا خاصيتون نه رڳو بیکٹريريل انفيڪشن جي روڪٿام سان لاڳاپيل آهن، پر ايف بي آر جي گهٽتائي سان پڻ، جيڪا ميڪروفيجز جي ذيلي ذخيري تي عمل ڪندي آهي (53، 57، 58).تنهن ڪري، LOIS جي مدافعتي چوري جي ملڪيت جي ڪري گھٽ مدافعتي ردعمل امپلانٽيشن کان پوء ضمني اثرات کي حل ڪري سگھن ٿا، جهڙوڪ پلاسٽڪ سرجري کان پوء وڌيڪ مدافعتي ردعمل.
(الف) بايوفيلم ٺهڻ جي ميکانيزم جو هڪ اسڪيمي ڊاگرام ۽ هڪ متاثر ٿيل آرٿوپيڊڪ امپلانٽ جي مٿاڇري تي پکڙيل آهي.eDNA، extracellular DNA.(ب) آرٿوپيڊڪ امپلانٽ داخل ڪرڻ کان پوء مدافعتي ردعمل جو اسڪيمياتي ڊراگرام.(C) H&E اسٽيننگ ۽ (D) بيئر مثبت ۽ LOIS سان آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي ڀرپاسي واري ٽشوز جي MT داغ.IHC مدافعتي سان لاڳاپيل سائٽوڪائنز (E) TNF-α ۽ (F) IL-6 ننگي-منفي ۽ LOIS-امپلانٽ ٿيل خرگوش جون داغ تصويرون آهن.(G) علائقي جي ڪوريج جي ماپ (** P <0.01) ذريعي سائيٽوڪائن جي اظهار جي مقدار.
LOIS جي حياتياتي مطابقت ۽ هڏن جي شفا جي عمل تي ان جو اثر وييو ۾ تشخيصي اميجنگ [x-ray ۽ micro-computed tomography (CT)] ۽ osteoclast IHC استعمال ڪندي جانچيو ويو.شڪل 6A ڏيکاري ٿو هڏن جي شفا جي عمل کي ٽن مختلف مرحلن ۾ شامل آهي: سوزش، مرمت، ۽ ٻيهر ٺاهڻ.جڏهن فريڪچر ٿئي ٿو، سوزائتي سيلز ۽ فبروبلاسٽ ڀڃي هڏن ۾ داخل ٿي ويندا آهن ۽ ويسولر ٽشو ۾ وڌڻ شروع ڪندا آهن.مرمت جي مرحلي دوران، ويسڪولر ٽشو جي واڌ ويجهڙائي واري سائيٽ جي ويجهو پکڙيل آهي.ويسڪولر ٽشو نئين هڏن جي ٺهڻ لاء غذائي مواد فراهم ڪري ٿو، جنهن کي ڪالس سڏيو ويندو آهي.هڏن جي شفا جي عمل جو آخري مرحلو ريموڊنگ اسٽيج آهي، جنهن ۾ ڪالس جي سائيز کي عام هڏن جي سائيز تائين گھٽايو ويندو آهي جنهن جي مدد سان چالو ٿيل اوستيوڪلاسٽس (59) جي سطح ۾ اضافو ٿيندو آهي.فرائيچر سائيٽ جي ٽن-dimensional (3D) بحالي کي مائڪرو-سي ٽي اسڪين استعمال ڪندي ڪيو ويو ته هر گروپ ۾ ڪالس ٺهڻ جي سطح ۾ اختلافن جو مشاهدو ڪرڻ لاءِ.ڦاٽل هڏن جي چوڌاري ڪالس جي ٿلهي کي ڏسڻ لاءِ فيمر جي ڪراس سيڪشن کي ڏسو (شڪل 6، بي ۽ سي).ايڪس ريز پڻ استعمال ڪيا ويا سڀني گروپن جي فريڪچر سائيٽن کي جانچڻ لاءِ هر هفتي هر گروپ ۾ مختلف هڏن جي بحالي واري عمل کي ڏسڻ لاءِ (شڪل S9).ڪالس ۽ بالغ هڏا نيري / سائي ۽ هٿي دوري ۾ ڏيکاريا ويا آهن.اڪثر نرم بافتن کي فلٽر ڪيو ويندو آهي اڳئين حد سان.نيوڊ مثبت ۽ SHP فرائيچر سائيٽ جي چوڌاري ڪالس جي ننڍڙي مقدار جي ٺهڻ جي تصديق ڪئي.ٻئي طرف، LOIS جي بي نقاب منفي ۽ فريڪچر سائيٽ ٿلهي ڪالس سان گھريل آهن.مائيڪرو-سي ٽي تصويرون ڏيکاريو ته ڪالس جي ٺهڻ ۾ بيڪٽيريا انفيڪشن ۽ انفيڪشن سان لاڳاپيل سوزش ۾ رڪاوٽ هئي.اهو ئي سبب آهي جو مدافعتي نظام هڏن جي بحالي جي بجاءِ انفيڪشن سان لاڳاپيل سوزش جي ڪري سيپٽڪ زخمن جي شفا کي ترجيح ڏئي ٿو (60).IHC ۽ Tartrate-resistant Acid Phosphatase (TRAP) جي داغ کي osteoclast سرگرمي ۽ هڏن جي بحالي (Figure 6D) (61) کي ڏسڻ لاءِ ڪيو ويو.ننگي مثبت ۽ SHP ۾ صرف چند چالو اوستيوڪلاسٽس داغدار جامني مليا.ٻئي طرف، LOIS جي ننگي مثبت ۽ بالغ هڏن جي ويجهو ڪيترن ئي چالو اوستيوڪلاسٽس کي ڏٺو ويو.اهو رجحان ظاهر ڪري ٿو ته اوستيوڪلاسٽس جي موجودگي ۾، فريڪچر سائيٽ جي چوڌاري ڪالس هڪ پرتشدد ريموڊلنگ جي عمل مان گذري رهيو آهي (62).ڪالس جي هڏن جي مقدار ۽ اوستيوڪلاسٽ ايڪسپريس ايريا کي ماپ ڪيو ويو ته سڀني گروپن ۾ فريڪچر سائيٽ جي چوڌاري ڪالس ٺهڻ جي سطح کي موازنہ ڪرڻ لاء، جيئن ته مائڪرو-سي ٽي اسڪين ۽ IHC نتيجا (شڪل 6E، 1 ۽ 2).جيئن توقع ڪئي وئي، LOIS ۾ ننگي منفي ۽ ڪالس ٺاھڻ ٻين گروپن جي ڀيٽ ۾ خاص طور تي مٿاھين ھئا، اھو اشارو ڪيو ويو آھي ته مثبت ھڏا ريموڊنگنگ واقع ٿي (63).شڪل S10 سرجري سائيٽ جي آپٽيڪل تصوير ڏيکاري ٿي، اسڪرو جي ويجهو گڏ ڪيل ٽشو جو MT داغ جو نتيجو، ۽ TRAP داغ جو نتيجو اسڪرو-بون انٽرفيس کي نمايان ڪري ٿو.ننگي ذيلي ذخيري ۾، مضبوط ڪالس ۽ فبروسس ٺهڻ جو مشاهدو ڪيو ويو، جڏهن ته LOIS-علاج ٿيل امپلانٽ هڪ نسبتا اڻڄاتل سطح ڏيکاري ٿي.اهڙي طرح، ننگي منفيات جي مقابلي ۾، LOIS سان لڳل خرگوش ۾ هيٺين فبروسس ڏٺو ويو، جيئن سفيد تير طرفان اشارو ڪيو ويو آهي.ان کان علاوه، فرم edema (نيرو تير) LOIS جي مدافعتي چوري جي خاصيتن کي منسوب ڪري سگهجي ٿو، ان ڪري شديد سوزش کي گھٽائي ٿو.امپلانٽ جي چوڌاري غير لٺ واري مٿاڇري ۽ گھٽيل فبروسس جو مشورو ڏئي ٿو ته هٽائڻ وارو عمل آسان آهي، جيڪو عام طور تي ٻين ڀڃڻ يا سوزش جي نتيجي ۾.اسڪرو هٽائڻ کان پوءِ هڏن جي شفا جي عمل جو جائزو ورتو ويو اوستيوڪلاسٽ سرگرمي طرفان اسڪرو هڏن جي انٽرفيس تي.ٻئي ننگي هڏا ۽ LOIS امپلانٽ انٽرفيس اوستيوڪلاسٽ جي ساڳي سطح کي جذب ڪري ٿو وڌيڪ هڏن جي شفا لاءِ، اهو ظاهر ڪري ٿو ته LOIS ڪوٽنگ جو هڏن جي شفا يا مدافعتي ردعمل تي ڪو به منفي اثر ناهي.انهي ڳالهه جي تصديق ڪرڻ لاءِ ته LOIS تي ڪيل سطح جي تبديلي هڏن جي شفا جي عمل ۾ مداخلت نه ڪندي آهي، ايڪس ري امتحان استعمال ڪيو ويو ته خرگوش جي هڏن جي شفا کي بي نقاب منفي آئنز ۽ LOIS امپلانٽيشن جي 6 هفتن سان مقابلو ڪرڻ لاءِ (شڪل 6F).نتيجن مان ظاهر ٿيو ته غير متاثر ٿيل نانگ مثبت گروپ جي مقابلي ۾، LOIS هڪ ئي درجي جي هڏن جي شفا ڏيکاري ٿي، ۽ ٻنهي گروهن ۾ فريڪچر (مسلسل اوستيوولوز لائن) جا واضح نشان نه هئا.
(الف) فريڪچر کان پوءِ هڏن جي شفا جي عمل جو اسڪيميٽڪ ڊراگرام.(ب) هر سطحي گروپ جي ڪالس ٺهڻ جي درجي ۾ فرق ۽ (سي) فرائيچر سائيٽ جي ڪراس-سيڪشنل تصوير.(D) TRAP staining to visualize osteoclast activity and bone resorption.TRAP سرگرمي جي بنياد تي، ڪارٽيڪل هڏن جي خارجي ڪالس جي ٺهڻ کي مقداري طور تي تجزيو ڪيو ويو (E) (1) مائڪرو-سي ٽي ۽ (2) اوستيوڪلاسٽ سرگرمي.(F) امپلانٽيشن کان 6 هفتا پوءِ، ظاهر ٿيل ناڪاري (ڳاڙهي ڊيش ٿيل مستطيل سان نمايان ٿيل) ۽ LOIS (نيري ڊيش ٿيل مستطيل سان نمايان ٿيل) جي ڀڃيل هڏن جون ايڪسري تصويرون.شمارياتي تجزيي مختلف قسم جي هڪ طرفي تجزيي (ANOVA) ذريعي ڪئي وئي.* پي <0.05.** پي <0.01.
مختصر ۾، LOIS هڪ نئين قسم جي اينٽي بيڪٽيريل انفيڪشن جي حڪمت عملي ۽ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس لاءِ مدافعتي فرار ڪوٽنگ فراهم ڪري ٿي.SHP فنڪشنلائيزيشن سان روايتي آرٿوپيڊڪ امپلانٽس مختصر مدت جي اينٽي بايوفولنگ ملڪيتن جي نمائش ڪن ٿا، پر انهن جي ملڪيت کي ڊگهي وقت تائين برقرار نه رکي سگهيا آهن.ذيلي ذخيري جي سپر هائيڊروفوبيسيٽي بيڪٽيريا ۽ سبسٽريٽ جي وچ ۾ هوائي بلبلن کي ڇڪيندي آهي، جنهن سان هوائي پاڪيٽ ٺاهيندي آهي، ان ڪري بيڪٽيريا جي انفيڪشن کي روڪيندي آهي.تنهن هوندي به، هوا جي ڦهلائڻ جي ڪري، اهي هوائي جيب آسانيء سان ختم ٿي ويا آهن.ٻئي طرف، LOIS چڱي طرح ثابت ڪيو آهي ته بايوفلم سان لاڳاپيل انفيڪشن کي روڪڻ جي صلاحيت.تنهن ڪري، پرت واري مائڪرو/نانو ساخت جي مٿاڇري ۾ داخل ٿيل لوبرينٽ پرت جي مخالف رد ڪرڻ واري ملڪيت جي ڪري، انفيڪشن سان لاڳاپيل سوزش کي روڪي سگهجي ٿو.SEM، AFM، XPS ۽ CA جي ماپن سميت مختلف خاصيتن جا طريقا LOIS جي پيداوار جي حالتن کي بهتر ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيا ويندا آهن.ان کان علاوه، LOIS پڻ لاڳو ڪري سگھجي ٿو مختلف حياتياتي مواد تي عام طور تي استعمال ٿيل آرٿوپيڊڪ فيڪسيشن سامان، جهڙوڪ PLGA، Ti، PE، POM ۽ PPSU.ان کان پوء، LOIS کي ويٽرو ۾ آزمائيو ويو ته ان جي بايوفولنگ مخالف ملڪيت کي ثابت ڪرڻ لاء بيڪٽيريا ۽ حياتياتي مواد جي خلاف مدافعتي ردعمل سان لاڳاپيل.نتيجن مان ظاهر ٿئي ٿو ته ان ۾ بيئر امپلانٽ جي مقابلي ۾ بهترين اينٽي بيڪٽيريل ۽ اينٽي بائيو فولنگ اثرات آهن.ان کان علاوه، LOIS ميڪانياتي طاقت کي لاڳو ڪرڻ کان پوء به ميخانياتي طاقت ڏيکاري ٿو، جيڪو پلاسٽڪ سرجري ۾ ناگزير آهي.مائيڪرو/نانو ڍانچي جي مٿاڇري تي سڻڪ جي خود شفا جي ملڪيت جي ڪري، LOIS ڪاميابيءَ سان پنهنجي اينٽي بايولوجيڪل فولنگ پراپرٽيز کي برقرار رکيو.vivo ۾ LOIS جي biocompatibility ۽ antibacterial خاصيتن جو مطالعو ڪرڻ لاءِ، LOIS کي 4 هفتن لاءِ خرگوش فيمر ۾ لڳايو ويو.LOIS سان لڳل خرگوش ۾ ڪوبه بيڪٽيريل انفيڪشن نه ڏٺو ويو.ان کان علاوه، IHC جي استعمال مقامي مدافعتي ردعمل جي گھٽ سطح جو مظاهرو ڪيو، اشارو ڪيو ته LOIS هڏن جي شفا جي عمل کي روڪي نه ٿو.LOIS بهترين اينٽي بيڪٽيريل ۽ مدافعتي چوري جي خاصيتن کي ظاهر ڪري ٿو، ۽ ثابت ڪيو ويو آهي ته مؤثر طريقي سان بايوفيلم ٺهڻ کان اڳ ۽ آرٿوپيڊڪ سرجري دوران، خاص طور تي هڏن جي جوڙجڪ لاء.هڪ خرگوش هڏن جي ميرو جي سوزش واري عورتن جي فرائيچر ماڊل کي استعمال ڪندي، هڏن جي شفا جي عمل تي بائيوفلم سان لاڳاپيل انفيڪشن جو اثر اڳ-انڪابيل امپلانٽس پاران متاثر ڪيو ويو.مستقبل جي مطالعي جي طور تي، هڪ نئين ان وييو ماڊل جي ضرورت آهي امڪاني انفيڪشن جو مطالعو ڪرڻ لاءِ امپلانٽيشن کان پوءِ مڪمل طور تي سمجھڻ ۽ روڪڻ لاءِ بايوفلم سان لاڳاپيل انفيڪشن کي پوري شفا جي عمل دوران.ان کان سواء، osteoinduction اڃا تائين LOIS سان انضمام ۾ هڪ حل ٿيل چئلينج آهي.وڌيڪ تحقيق جي ضرورت آهي osteoinductive سيلز جي چونڊ آسن کي گڏ ڪرڻ يا LOIS سان ٻيهر پيدا ٿيندڙ دوائن کي چئلينج کي منهن ڏيڻ لاءِ.مجموعي طور تي، LOIS هڪ واعدو ڪندڙ آرٿوپيڊڪ امپلانٽ ڪوٽنگ جي نمائندگي ڪري ٿو مشيني مضبوطي ۽ شاندار اينٽي بايو فولنگ ملڪيت سان، جيڪا ايس ايس آئي ۽ مدافعتي ضمني اثرات کي گھٽائي سگھي ٿي.
15mm x 15mm x 1mm 304 SS سبسٽريٽ (Dong Kang M-Tech Co., Korea) کي 15 منٽن لاءِ ڌوئي ايسٽون، EtOH ۽ DI پاڻيءَ ۾ آلودگي ختم ڪرڻ لاءِ.مٿاڇري تي مائيڪرو/نانو-سطح جي ڍانچي ٺاهڻ لاءِ، صاف ڪيل سبسٽريٽ کي 48% کان 51% HF محلول (DUKSAN Corp.، South Korea) ۾ 50 °C تي ٻوڙيو وڃي ٿو.ايچنگ جو وقت 0 کان 60 منٽن تائين مختلف آهي.ان کان پوء، ايچ ٿيل سبسٽريٽ کي ڊيونائيز ٿيل پاڻي سان صاف ڪيو ويو ۽ 65٪ HNO3 (Korea DUKSAN Corp.) حل ۾ 50 ° C تي 30 منٽن تائين رکيل آهي ته جيئن سطح تي ڪروميم آڪسائيڊ پاسوائيشن پرت ٺاهيو وڃي.پاسو ٿيڻ کان پوءِ، ذيلي ذخيري کي ڊيونائيزڊ پاڻيءَ سان ڌويو ويندو آهي ۽ خشڪ ڪيو ويندو آهي ته جيئن پرت واري ڍانچي سان سبسٽرٽ حاصل ڪجي.اڳيون، ذيلي ذخيرو آڪسيجن پلازما (100 W، 3 منٽ) جي سامهون ڪيو ويو، ۽ فوري طور تي 8.88 ايم ايم پوٽس (سگما-الڊريچ، جرمني) جي حل ۾ ٽوليوين ۾ ڪمري جي حرارت تي 12 ڪلاڪن تائين وسايو ويو.ان کان پوء، POTS سان گڏ ٿيل سبسٽريٽ EtOH سان صاف ڪيو ويو، ۽ 150 ° C تي 2 ڪلاڪن لاء اينيل ڪيو ويو ھڪڙو گھڻا POTS SAM حاصل ڪرڻ لاء.SAM جي ڪوٽنگ کان پوءِ، 20 μm/cm 2 جي لوڊ ڪرڻ واري مقدار سان پرفلووروپوليٿر لوبريڪنٽ (Krytox 101; DuPont, USA) لاڳو ڪري سبسٽرٽ تي هڪ لوبريڪنٽ جو پرت ٺاهيو ويو. استعمال ڪرڻ کان اڳ، 0.2 مائڪرون فلٽر ذريعي لوبريڪنٽ کي فلٽر ڪريو.15 منٽن لاء 45 ° زاوي تي ٽائل ڪندي اضافي سڻڪ کي هٽايو.304 SS (لاڪنگ پليٽ ۽ ڪارٽيڪل لاڪنگ اسڪرو؛ ڊانگ ڪانگ M-Tech Co.، Korea) مان ٺهيل آرٿوپيڊڪ امپلانٽس لاءِ ساڳيو ئي پيداواري طريقو استعمال ڪيو ويو.سڀ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس تيار ڪيا ويا آهن ته جيئن خرگوش فيمر جي جاميٽري کي پورو ڪري.
سبسٽريٽ ۽ آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي سطح جي مورفولوجي جو معائنو ڪيو ويو فيلڊ اخراج SEM (معائنو F50، FEI، USA) ۽ AFM (XE-100، پارڪ سسٽم، ڏکڻ ڪوريا).مٿاڇري جي خرابي (Ra، Rq) ماپي ويندي آهي 20 μm جي علائقي کي 20 μm (n = 4) سان ضرب ڪندي.هڪ XPS (PHI 5000 VersaProbe, ULVAC PHI, Japan) سسٽم هڪ Al Kα X-ray ماخذ سان ليس آهي 100μm2 جي اسپاٽ سائيز سان سطح جي ڪيميائي ساخت جو تجزيو ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو.هڪ CA ماپڻ وارو نظام هڪ متحرڪ تصويري ڪيپچر ڪئميرا سان ليس (SmartDrop، FEMTOBIOMED، ڏکڻ ڪوريا) مائع CA ۽ SA کي ماپڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو.هر ماپ لاءِ، 6 کان 10 μl قطرا (ڊيونائيزڊ پاڻي، گهوڙي جو رت، EG، 30٪ ايٿانول، ۽ HD) مٿاڇري تي رکيا ويندا آهن CA کي ماپڻ لاءِ.جڏهن ذيلي ذخيري جو مائل زاويه 2°/s (n = 4) جي رفتار سان وڌي ٿو، SA ماپي ويندي آهي جڏهن قطرو پوي ٿو.
Pseudomonas aeruginosa [American Type Culture Collection (ATCC) 27853] ۽ MRSA (ATCC 25923) ATCC (Manassas, Virginia, USA) کان خريد ڪيا ويا، ۽ اسٽاڪ ڪلچر -80 ° C تي برقرار رکيو ويو.استعمال ڪرڻ کان اڳ، منجمد ڪلچر کي 18 ڪلاڪن تائين 37 درجا سينٽيگريڊ تي ٽريپسن-پگھل سويابين برٿ (ڪومڊ، ڪوريا) ۾ لڳايو ويو ۽ پوءِ ان کي چالو ڪرڻ لاءِ ٻه ڀيرا منتقل ڪيو ويو.انڪيوبيشن کان پوءِ، ڪلچر کي 10,000 rpm تي 10 منٽن لاءِ 4°C تي سينٽرفيوج ڪيو ويو ۽ PBS (pH 7.3) محلول سان ٻه ڀيرا ڌويو ويو.مرڪزي ڪلچر کي پوءِ بلڊ آگر پليٽس (BAP) تي ذيلي ڪلچر ڪيو ويندو آهي.MRSA ۽ Pseudomonas aeruginosa رات جو تيار ڪيا ويا ۽ لوريا-برٽاني برٿ ۾ ڪلچر ڪيا ويا.انوکولم ۾ Pseudomonas aeruginosa ۽ MRSA جو ڪنسنٽريشن مقداري طور تي Agar تي سيريل dilutions ۾ معطلي جي CFU پاران طئي ڪيو ويو.پوءِ، بيڪٽيريا ڪنسنٽريشن کي 0.5 McFarland معيار تي ترتيب ڏيو، جيڪو 108 CFU/ml جي برابر آهي.ان کان پوء ڪم ڪندڙ بيڪٽيريا معطلي کي 100 ڀيرا 106 CFU/ml تائين گھٽايو.antibacterial adhesion خاصيتن کي جانچڻ لاءِ، استعمال ڪرڻ کان اڳ 121 ° C تي 15 منٽ لاءِ سبسٽريٽ کي جراثيم ڪيو ويو.ان کان پوءِ ذيلي ذخيري کي 25 مليل بيڪٽيريل معطلي ۾ منتقل ڪيو ويو ۽ 12 ۽ 72 ڪلاڪن لاءِ زوردار ڇڪڻ (200 rpm) سان 37 ° C تي انڪيوبيو ويو.انڪيوبيشن کان پوءِ، هر سبسٽريٽ کي انڪيوبيٽر مان هٽايو ويو ۽ 3 ڀيرا پي بي ايس سان ڌويو ويو ته جيئن سطح تي ڪنهن به سچل بيڪٽيريا کي هٽايو وڃي.ذيلي ذخيري تي بايوفيلم کي ڏسڻ لاء، بايو فلم کي ميٿانول سان مقرر ڪيو ويو ۽ 1 ml ڪريميڊين نارنجي سان 2 منٽن لاء داغ ڪيو ويو.ان کان پوء هڪ فلوروسينس خوردبيني (BX51TR، اولمپس، جاپان) استعمال ڪيو ويو داغ ٿيل بايوفيلم جون تصويرون وٺڻ لاء.ذيلي ذخيري تي بايوفيلم جي مقدار کي ترتيب ڏيڻ لاء، منسلڪ سيلز کي بيڊ وورٽيڪس طريقي سان سبسٽٽ کان الڳ ڪيو ويو، جيڪو ڳنڍيل بيڪرياريا کي ختم ڪرڻ لاء سڀ کان وڌيڪ مناسب طريقو سمجهيو ويندو هو (n = 4).جراثيم کان بچاء واري قوتن کي استعمال ڪندي، ترقي جي وچولي مان سبسٽريٽ کي هٽايو ۽ اضافي مائع کي هٽائڻ لاء چڱي طرح پليٽ تي ٽيپ ڪريو.بيزاري سان جڙيل سيلز کي جراثيم ڪش PBS سان ٻه ڀيرا ڌوئڻ سان هٽايو ويو.هر ذيلي ذخيري کي پوءِ هڪ جراثيم کان پاڪ ٽيسٽ ٽيوب ۾ منتقل ڪيو ويو جنهن ۾ 9 ml 0.1% پروٽين اي پي ٽي سالين (PSW) ۽ 2 g جو 20 کان 25 sterile شيشي جي موتي (0.4 کان 0.5 ملي ميٽر قطر).ان کان پوءِ 3 منٽن لاءِ وورٽيڪس ڪيو ويو ته جيئن سيلز کي نموني مان ڌار ڪيو وڃي.vortexing کان پوء، معطلي کي ترتيب سان 10-گنا 0.1٪ PSW سان ٺهرايو ويو، ۽ پوء BAP تي 0.1 ml هر ڊيليشن جو انوول ڪيو ويو.24 ڪلاڪ انڪيوبيشن کان پوءِ 37 ° C تي، CFU کي دستي طور شمار ڪيو ويو.
سيلز لاء، ماؤس فبروبلاسٽس NIH/3T3 (CRL-1658؛ آمريڪي ATCC) ۽ ماؤس ميڪروفيجز RAW 264.7 (TIB-71؛ آمريڪي ATCC) استعمال ڪيا ويا.Dulbecco جي تبديل ٿيل ايگل ميڊيم (DMEM; LM001-05, Welgene, Korea) کي ڪلچر ماؤس فبرو بلاسٽس استعمال ڪريو ۽ 10% calf serum (S103-01, Welgene) ۽ 1% penicillin-streptomycin (PS ; LS20202-Welgene) 10% فيٽل بووائن سيرم (S001-01، Welgene) ۽ 1% PS سان گڏ ماؤس ميڪروفيجز کي ڪلچر ڪرڻ لاءِ DMEM استعمال ڪريو، ۽ 105 سيلز/cm2 تي سيلز کي لڳايو. سيلز کي رات جو 37 ° C ۽ 5٪ CO2 تي لڳايو ويو، سيلز کي 20 منٽن لاء 4٪ paraformaldehyde سان لڳايو ويو ۽ 0.5٪ Triton X Incubate ۾ 5 منٽ لاء 50nM tetraminethyl ۾ وجهي ڇڏيو 37 ° C تي 30 منٽن لاء، 4′،6-diamino-2-phenylindole (H-1200, Vector Laboratories, UK) VECTASHIELD فڪسيشن ميڊيم (n = 4 في سيل) سان استعمال ڪريو , fluorescein, fluorescein isothiocyanate-albumin (A9771, Sigma-Aldrich, Germany) and human plasma The Alexa Fluor 488-conjugated fibrinogen (F13191, Invitrogen, USA) PBS (10 mM, p.4).البمن ۽ فبرينوجن جي ڪنسنٽريشن 1 ۽ 150 μg/ml، ترتيب سان.Substrate کان پوء پروٽين جي حل ۾ وجھڻ کان اڳ، انهن کي PBS سان ڌوء ته مٿاڇري کي ريهائيڊريٽ ڪرڻ لاء.ان کان پوءِ سڀني ذيلي ذخيرن کي ڇھ سھڻي پليٽ ۾ وجھو جنھن ۾ پروٽين جو محلول ھو ۽ 37 ڊگري سينٽي گريڊ تي 30 ۽ 90 منٽن لاءِ انڪيوبيٽ ڪريو.انڪيوبيشن کان پوءِ، ذيلي ذخيري کي پروٽين جي محلول مان هٽايو ويو، PBS سان 3 ڀيرا آسانيءَ سان ڌويو ويو، ۽ 4٪ paraformaldehyde سان مقرر ڪيو ويو (n = 4 هر پروٽين لاءِ).ڪيلشيم لاءِ، سوڊيم ڪلورائڊ (0.21 ايم) ۽ پوٽاشيم فاسفيٽ (3.77 ايم ايم) ) ڊيونائيز ٿيل پاڻي ۾ ملائي وئي.حل جي پي ايڇ کي 2.0 ۾ هائڊروچورائڊ حل (1M) شامل ڪندي ترتيب ڏني وئي.ان کان پوء ڪلسيم کلورائڊ (5.62 ايم ايم) حل ۾ ڦهليل هئي.1M tris (hydroxymethyl)-امينو ميٿين کي شامل ڪرڻ سان حل جي پي ايڇ کي 7.4 تائين ترتيب ڏئي ٿو.1.5× ڪلسيم فاسفيٽ جي محلول سان ڀريل ڇهين پليٽ ۾ سڀني ذيلي ذخيرن کي وجھو ۽ 30 منٽن کان پوءِ محلول مان ڪڍي ڇڏيو.داغ لاءِ 2 گرام اليزارين ريڊ ايس (CI 58005) 100 ملي ليٽر ڊيونائيزڊ پاڻي سان ملايو.ان کان پوءِ پي ايڇ کي 4 ڪرڻ لاءِ 10% امونيم هائيڊروڪسائيڊ استعمال ڪريو. 5 منٽن لاءِ اليزارين ريڊ محلول سان سبسٽريٽ کي رنگيو، ۽ پوءِ اضافي رنگ ۽ داغ کي هٽائي ڇڏيو.ڇڪڻ واري عمل کان پوء، سبسٽٽ کي هٽايو.مواد کي ڊيهائيڊريٽ ڪيو وڃي ٿو، پوءِ 5 منٽن لاءِ ايسٽون ۾ وجھو، پوءِ 5 منٽن لاءِ ايسٽون-xylene (1:1) محلول ۾ وجھو، ۽ آخر ۾ xylene (n = 4) سان ڌويو وڃي.فلورسنس خوردبيني (Axio Imager) × 10 ۽ × 20 مقصدي لينس سان استعمال ڪيو ويندو آهي..A2m، Zeiss، جرمني) تصويرون سڀ سبسٽريٽ.ImageJ/FIJI (https://imagej.nih.gov/ij/) استعمال ڪيو ويو چار مختلف امڪاني علائقن جي هر گروپ تي حياتياتي مواد جي آسنجن ڊيٽا کي مقدار ڏيڻ لاء.سڀني تصويرن کي بائنري تصويرن ۾ تبديل ڪريو مقرر ٿيل حدن سان گڏ سبسٽريٽ جي مقابلي لاءِ.
هڪ Zeiss LSM 700 confocal خوردبيني استعمال ڪيو ويو ته لوبريڪٽ پرت جي استحڪام کي مانيٽر ڪرڻ لاء PBS ۾ موٽڻ واري موڊ ۾.فلورائن تي ٻڌل SAM-coated شيشي جو نمونو هڪ انجيل ٿيل لوبريڪٽنگ پرت سان گڏ پي بي ايس حل ۾ وسريو ويو، ۽ هڪ آربيٽل شيڪر (SHO-1D؛ ڊيهان سائنسي، ڏکڻ ڪوريا) کي هلڪي ٿڌڻ واري حالتن ۾ (120 rpm) استعمال ڪندي آزمايو ويو.پوءِ نمونو وٺو ۽ موٽندڙ روشني جي نقصان کي ماپ ڪري سڻڀ جي نقصان جي نگراني ڪريو.fluorescence تصويرن کي ريفريڪشن موڊ ۾ حاصل ڪرڻ لاءِ، نموني کي 633 nm ليزر سان لڳايو ويندو آهي ۽ پوءِ گڏ ڪيو ويندو آهي، ڇاڪاڻ ته روشني واپس نموني مان ظاهر ٿيندي.نموني ماپ ڪيا ويا 0، 30، 60، ۽ 120 ڪلاڪ جي وقت جي وقفن تي.
آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي نانوميڪنيڪل خاصيتن تي سطح جي تبديلي جي عمل جي اثر کي طئي ڪرڻ لاءِ، هڪ نانو انڊينٽر (TI 950 TriboIndenter, Hysitron, USA) ٽن رخا پرامڊ جي شڪل واري برڪووچ هيرن جي ٽپ سان ليس نانو انڊينڊيون کي ماپڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو.چوٽي لوڊ 10 mN آهي ۽ ايراضي 100μmx 100μm آهي.سڀني ماپن لاء، لوڊ ڪرڻ ۽ ان لوڊ ڪرڻ جو وقت 10 s آهي، ۽ چوٽي انڊينٽيشن لوڊ هيٺ رکڻ جو وقت 2 s آهي.پنج مختلف هنڌن کان ماپون وٺو ۽ اوسط وٺو.لوڊ جي هيٺان مشيني طاقت جي ڪارڪردگي جو جائزو وٺڻ لاءِ، يونيورسل ٽيسٽنگ مشين (Instron 5966, Instron, USA) استعمال ڪندي هڪ ٽرانسورس ٽي پوائنٽ موڙيندڙ ٽيسٽ ڪيو ويو.وڌايل لوڊ سان 10 N/s جي مسلسل شرح تي سبسٽريٽ کي دٻايو ويندو آهي.Bluehill يونيورسل سافٽ ويئر پروگرام (n = 3) استعمال ڪيو ويو لچڪدار ماڊيولس ۽ وڌ ۾ وڌ compressive دٻاء جي حساب سان.
آپريشن جي عمل کي ترتيب ڏيڻ ۽ آپريشن دوران لاڳاپيل ميڪانياتي نقصان کي ترتيب ڏيڻ لاء، آپريشن جي عمل کي ويٽرو ۾ ڪيو ويو.قتل ٿيل نيوزي لينڊ جي اڇي خرگوش مان فيمر گڏ ڪيا ويا.فيمر کي صاف ڪيو ويو ۽ 1 هفتي لاء 4٪ paraformaldehyde ۾ مقرر ڪيو ويو.جيئن جانورن جي تجربي واري طريقي ۾ بيان ڪيو ويو آهي، مقرر ٿيل فيمر جراحي طور تي آپريشن ڪيو ويو.آپريشن کان پوء، آرٿوپيڊڪ امپلانٽ رت ۾ 10 s تائين (گھوڙي جي رت، KISAN، ڪوريا) ۾ وسريو ويو ته تصديق ڪرڻ لاء ته ڇا رت جي آسنشن ميڪيڪل زخم کان پوء لاڳو ڪيو ويو (n = 3).
مجموعي طور تي 24 مرد نيوزي لينڊ اڇا خرگوش (وزن 3.0 کان 3.5 ڪلوگرام، سراسري عمر 6 مهينا) بي ترتيب طور تي چار گروپن ۾ ورهايل هئا: ننگي منفي، ننگي مثبت، SHP ۽ LOIS.جانورن ۾ شامل سڀئي طريقا ادارن جي جانورن جي سنڀال ۽ استعمال ڪميٽي (IACUC منظور ٿيل، KOREA-2017-0159) جي اخلاقي معيارن جي مطابق ڪيا ويا.آرٿوپيڊڪ امپلانٽ هڪ لاڪنگ پليٽ تي مشتمل هوندو آهي جنهن ۾ پنج سوراخ (ڊگھائي 41 ملي ميٽر، ويڪر 7 ملي ميٽر ۽ ٿولهه 2 ملي ميٽر) ۽ فرائيچر فيڪسيشن لاءِ ڪارٽيڪل لاڪنگ اسڪرو (ڊگھائي 12 ملي ميٽر، قطر 2.7 ملي ميٽر) هوندي آهي.انهن پليٽن ۽ پيچرن کان سواءِ جيڪي بيئر-منفي گروپ ۾ استعمال ڪيا ويا، سڀئي پليٽون ۽ اسڪرو MRSA معطلي (106 CFU/ml) ۾ 12 ڪلاڪن لاءِ رکيا ويا.ننگي-منفي گروپ (n = 6) کي ننگي مٿاڇري جي امپلانٽس سان علاج ڪيو ويو بغير بيڪٽيريل معطلي جي نمائش، انفيڪشن لاء منفي ڪنٽرول جي طور تي.بيئر مثبت گروپ (n = 6) کي علاج ڪيو ويو هڪ ننگي سطح جي امپلانٽ سان بيڪٽيريا کي ظاهر ڪيو ويو جيئن انفيڪشن لاءِ مثبت ڪنٽرول.SHP گروپ (n = 6) علاج ڪيو ويو بیکٹريريل طور تي بي نقاب ٿيل SHP امپلانٽس سان.آخرڪار، LOIS گروپ کي علاج ڪيو ويو بیکٹريريل-بي نقاب ٿيل LOIS امپلانٽس (n = 6).سڀني جانورن کي پنجري ۾ رکيو ويندو آهي، ۽ گهڻو کاڌو ۽ پاڻي مهيا ڪيو ويندو آهي.آپريشن کان اڳ، خرگوش 12 ڪلاڪن لاء روزو رکيو ويو.جانورن کي intramuscular انجيڪشن ذريعي xylazine (5mg/kg) ۽ intravenous injection of paclitaxel (3mg/kg) شامل ڪرڻ لاءِ بيشمار ڪيو ويو.ان کان پوء، 2٪ isoflurane ۽ 50٪ کان 70٪ طبي آڪسيجن (فلو جي شرح 2 L/min) تنفس جي سرشتي جي ذريعي انسٿيسيا کي برقرار رکڻ لاء.اهو هڪ سڌي طريقي سان ورهاڱي واري فيمر جي ذريعي لڳايو ويو آهي.وار ختم ڪرڻ ۽ چمڙي جي پوويڊون-آئوڊائن ڊس انفڪشن ڪرڻ کان پوءِ، کاٻي وچ واري ڀوري جي ٻاهرئين پاسي اٽڪل 6 سينٽي ڊگهو هڪ چيرا ٺاهيو ويو.فيمر کي ڍڪڻ واري عضلات جي وچ ۾ خال کي کولڻ سان، فيمر مڪمل طور تي بي نقاب ٿي ويندو آهي.پليٽ کي عورت جي شافٽ جي سامهون رکو ۽ ان کي چار اسڪرو سان درست ڪريو.ٺاھڻ کان پوء، ھڪڙي آري بليڊ (1 ملي ميٽر ٿلهي) استعمال ڪريو مصنوعي طور تي ٻئي سوراخ ۽ چوٿين سوراخ جي وچ واري علائقي ۾ فريڪچر ٺاھيو.آپريشن جي آخر ۾، زخم لوڻ سان ڌوئي ويو ۽ سيون سان بند ڪيو ويو.هر خرگوش کي انروفلڪساسين (5 mg/kg) هڪ ٽيون لوڻ ۾ ملايو ويو، ان جي ذري هيٺان انجيڪشن ڪئي وئي.سڀني جانورن (0، 7، 14، 21، 28، ۽ 42 ڏينهن) ۾ هڏن جي اوسٽوٽومي جي تصديق ڪرڻ لاءِ فيمر جا پوسٽ آپريٽو ايڪس ري ڪڍيا ويا.deep anesthesia کان پوءِ، سڀني جانورن کي 28 ۽ 42 ڏينهن تي Intravenous KCl (2 mmol/kg) ذريعي ماريو ويو.عمل ڪرڻ کان پوء، هڏن جي شفا جي عمل ۽ چئن گروپن جي وچ ۾ نئين هڏن جي ٺهڻ جو مشاهدو ڪرڻ ۽ موازنہ ڪرڻ لاء مائڪرو-سي ٽي ذريعي فيمر کي اسڪين ڪيو ويو.
عمل ڪرڻ کان پوء، نرم بافتون جيڪي آرٿوپيڊڪ امپلانٽس سان سڌو سنئون رابطي ۾ هئا گڏ ڪيا ويا.ٽشو کي رات جو 10٪ غير جانبدار بفر ٿيل فارملين ۾ مقرر ڪيو ويو ۽ پوءِ EtOH ۾ پاڻي جي کوٽ ڪئي وئي.dehydrated tissue paraffin ۾ شامل ڪيو ويو ۽ هڪ microtome (400CS؛ EXAKT، جرمني) استعمال ڪندي 40 μm جي ٿولهه تي سيڪشن ڪيو ويو.انفڪشن کي ڏسڻ لاءِ، ايڇ اينڊ اي اسٽيننگ ۽ ايم ٽي اسٽيننگ ڪيا ويا.ميزبان جي جواب کي جانچڻ لاءِ، سيڪشن ٿيل ٽشو کي خرگوش مخالف TNF-α پرائمري اينٽي باڊي (AB6671, Abcam, USA) ۽ خرگوش مخالف IL-6 (AB6672; Abcam, USA) سان لڳايو ويو ۽ پوءِ هارسريڊش سان علاج ڪيو ويو.آڪسائيڊس.avidin-biotin ڪمپليڪس (ABC) اسٽيننگ سسٽم کي سيڪشن تي لاڳو ڪريو ٺاهيندڙن جي هدايتن مطابق.براؤن ردعمل جي پيداوار جي طور تي ظاهر ٿيڻ لاء، 3,3-diaminobenzidine سڀني حصن ۾ استعمال ڪيو ويو.هڪ ڊجيٽل سلائڊ اسڪينر (Pannoramic 250 Flash III، 3DHISTECH، Hungary) استعمال ڪيو ويو سڀني سلائسن کي ڏسڻ لاءِ، ۽ هر گروپ ۾ گهٽ ۾ گهٽ چار ذيلي ذخيرا ImageJ سافٽ ويئر پاران تجزيو ڪيو ويو.
ايڪس ري تصويرون سڀني جانورن ۾ سرجري کان پوء ورتيون ويون ۽ هر هفتي فرائيچر جي شفا جي نگراني ڪرڻ لاء (n = 6 في گروپ).عمل ڪرڻ کان پوء، اعلي ريزوليوشن مائڪرو-سي ٽي استعمال ڪيو ويو جيڪو شفا ڏيڻ کان پوء فيمر جي چوڌاري ڪالس جي ٺهڻ جي حساب سان.حاصل ڪيل فيمر کي صاف ڪيو ويو، 4٪ paraformaldehyde ۾ 3 ڏينهن تائين مقرر ڪيو ويو، ۽ 75٪ ايٿانول ۾ ڊيهائيڊريٽ ڪيو ويو.هڏن جي هڏن کي پوءِ مائڪرو-CT (SkyScan 1173, Brooke Micro-CT, Kandy, Belgium) استعمال ڪندي اسڪين ڪيو ويو ته جيئن هڏن جي نموني جون 3D ووڪسل تصويرون (2240×2240 پکسلز) پيدا ڪيون وڃن.سگنل شور کي گهٽائڻ لاءِ 1.0 mm Al فلٽر استعمال ڪريو ۽ سڀني اسڪين تي اعليٰ ريزوليوشن لاڳو ڪريو (E = 133 kVp، I = 60 μA، انضمام وقت = 500 ms).Nrecon سافٽ ويئر (نسخ 1.6.9.8، Bruker microCT، Kontich، Belgium) حاصل ڪيل 2D پس منظر پروجئشن مان اسڪين ٿيل نموني جو 3D حجم پيدا ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو.تجزيي لاءِ، 3D تعمير ٿيل تصوير فرڪچر سائيٽ جي مطابق 10mm × 10mm × 10mm ڪيوبز ۾ ورهايل آهي.cortical هڏا کان ٻاهر callus حساب.DataViewer (نسخ 1.5.1.2؛ Bruker microCT، Kontich، Belgium) سافٽ ويئر استعمال ڪيو ويو ڊجيٽل طور تي اسڪين ٿيل هڏن جي مقدار کي ريڊائريڪٽ ڪرڻ لاءِ، ۽ CT-Analyzer (ورژن 1.14.4.1؛ Bruker microCT، Kontich، Belgium) سافٽ ويئر استعمال ڪيو ويو تجزيو لاءِ.بالغ هڏن ۽ ڪالس ۾ لاڳاپا ايڪس-ري جذب جي گنجائش انهن جي کثافت جي لحاظ کان فرق آهي، ۽ پوء ڪالس جي مقدار کي مقدار ۾ ڪيو ويندو آهي (n = 4).ان ڳالهه جي تصديق ڪرڻ لاءِ ته LOIS جي حياتياتي مطابقت هڏن جي شفا جي عمل ۾ دير نه ڪندي، اضافي ايڪس-ري ۽ مائڪرو-سي ٽي تجزيا ٻن خرگوش ۾ ڪيا ويا: ننگي-منفي ۽ LOIS گروپ.ٻنهي گروهن کي ڇهين هفتي ۾ قتل ڪيو ويو.
قرباني ڪيل جانورن مان ڦڦڙن کي گڏ ڪيو ويو ۽ 4٪ paraformaldehyde ۾ 3 ڏينهن تائين مقرر ڪيو ويو.آرٿوپيڊڪ امپلانٽ کي پوء احتياط سان فيمر مان هٽايو ويندو آهي.0.5 M EDTA (EC-900، National Diagnostics Corporation) استعمال ڪندي 21 ڏينهن تائين فيمر کي ختم ڪيو ويو.پوءِ ڊيڪالسيفائيڊ فيمر کي EtOH ۾ ٻوڙيو ويو ته جيئن ان کي ڊيهائيڊريٽ ڪيو وڃي.dehydrated femur کي xylene ۾ هٽايو ويو ۽ پيرافين ۾ شامل ڪيو ويو.ان کان پوء نموني کي 3 μm جي ٿلهي سان هڪ خودڪار روٽري مائڪروٽوم (Leica RM2255، Leica Biosystems، جرمني) سان ڪٽيو ويو.TRAP staining (F6760, Sigma-Aldrich, Germany) لاءِ، سيڪشن ٿيل نمونن کي 1 ڪلاڪ لاءِ 37 ° C تي TRAP ريجينٽ ۾ ڊيپرافينائيز، ريهائيڊريٽ ۽ انڪيوب ڪيو ويو.تصويرن کي سلائڊ اسڪينر استعمال ڪندي حاصل ڪيو ويو (Pannoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Hungary) ۽ داغ واري علائقي جي علائقي جي ڪوريج کي ماپ ڪري مقدار جي مطابق.هر تجربي ۾، هر گروپ ۾ گهٽ ۾ گهٽ چار ذيلي ذخيري جو تجزيو ڪيو ويو ImageJ سافٽ ويئر پاران.
شمارياتي اهميت جو تجزيو GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., USA) استعمال ڪندي ڪيو ويو.غير جوڙيل ٽي ٽيسٽ ۽ ويرينس جو هڪ طرفي تجزيو (ANOVA) استعمال ڪيو ويو تشخيص گروپن جي وچ ۾ فرق کي جانچڻ لاءِ.اھميت جي سطح ھيٺ ڏنل شڪل ۾ ڏيکاريل آھي: *P <0.05، **P <0.01، ***P <0.001 ۽ ****P <0.0001؛NS، ڪو خاص فرق ناهي.
هن آرٽيڪل لاءِ اضافي مواد لاءِ، مهرباني ڪري ڏسو http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/44/eabb0025/DC1
هي هڪ کليل رسائي آرٽيڪل آهي ورهايو ويو Creative Commons Attribution-Non-commercial License جي شرطن جي تحت، جيڪو ڪنهن به وچولي ۾ استعمال، ورڇ ۽ ٻيهر پيدا ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿو، جيستائين استعمال تجارتي فائدي لاءِ نه آهي ۽ بنياد اهو آهي ته اصل ڪم صحيح آهي.حوالو.
نوٽ: اسان صرف توهان کان پڇون ٿا ته هڪ اي ميل پتو مهيا ڪريو ته جيئن توهان صفحي ڏانهن سفارش ڪندڙ شخص کي خبر آهي ته توهان چاهيو ٿا ته اهي اي ميل ڏسڻ ۽ اي ميل اسپام نه آهي.اسان ڪنهن به اي ميل پتي تي قبضو نه ڪنداسين.
هي سوال استعمال ڪيو ويندو آهي جانچڻ لاءِ ته ڇا توهان هڪ انساني دورو ڪندڙ آهيو ۽ خودڪار اسپام موڪلڻ کي روڪڻ لاءِ.
Choe Kyung Min, Oh Young Jang, Park Jun Joon, Lee Jin Hyuk, Kim Hyun Cheol, Lee Kyung Moon, Lee Chang Kyu, Lee Yeon Taek, Lee Sun-uck, Jeong Morui
آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي اينٽي بيڪٽيريل ۽ مدافعتي فرار جي کوٽ انفيڪشن جي ڪري انفيڪشن ۽ مدافعتي ردعمل کي گهٽائي سگهن ٿيون.
Choe Kyung Min, Oh Young Jang, Park Jun Joon, Lee Jin Hyuk, Kim Hyun Cheol, Lee Kyung Moon, Lee Chang Kyu, Lee Yeon Taek, Lee Sun-uck, Jeong Morui
آرٿوپيڊڪ امپلانٽس جي اينٽي بيڪٽيريل ۽ مدافعتي فرار جي کوٽ انفيڪشن جي ڪري انفيڪشن ۽ مدافعتي ردعمل کي گهٽائي سگهن ٿيون.
©2021 آمريڪن ايسوسيئيشن فار دي ايڊوانسمينٽ آف سائنس.سڀ حق محفوظ آهن.AAAS HINARI، AGORA، OARE، CHORUS، CLOCKSS، CrossRef ۽ COUNTER جو شريڪ آھي.سائنس ايڊوانسز ISSN 2375-2548.


پوسٽ ٽائيم: مارچ-15-2021
WhatsApp آن لائن چيٽ!