Bukaanka lagu sameeyo qalliinka lafaha lafaha, caabuqyada bakteeriyada iyo jawaabcelinta difaaca ee caabuqa ayaa had iyo jeer ahaa khataro nafta halis gelisa.Walxaha bayooloji ee caadiga ah waxay u nugul yihiin wasakheynta noolaha, taas oo keenta in bakteeriyadu soo gasho aagga dhaawacan oo ay keento caabuqa qalliinka kadib.Sidaa darteed, waxaa jira baahi degdeg ah oo loo baahan yahay in la sameeyo ka-hortagga caabuqa iyo dahaarka ka baxsanaya difaaca ee tallaalka lafaha.Halkan, waxaan ku soo saarnay tignoolajiyada wax ka beddelka dusha sare ee maqaar-galaha lafaha oo loo yaqaan Lubricated Orthopedic Implant Surface (LOIS), kaas oo ay dhiirigeliso dusha siman ee mashxadaha dhirta.LOIS waxay leedahay dareere waara oo xoog leh oo ka celinaya dareere kala duwan iyo walxaha noolaha (ay ku jiraan unugyo, borotiinno, kalsiyum iyo bakteeriyada).Intaa waxaa dheer, waxaan xaqiijinay adkeysiga farsamada ee ka dhanka ah xagashada iyo hagaajinta xoogga anagoo isku dayaya waxyeelada lama huraanka ah inta lagu jiro qalliinka in vitro.Qaabka jabka bararka ee dhuuxa lafta bakayle ayaa loo isticmaalay in si fiican loo daraaseeyo qolofta ka hortagga nafleyda iyo awoodda caabuqa ee LOIS.Waxaan qiyaasaynaa in LOIS, oo leh sifooyin-biofouling-ka-hortagga iyo cimri dhererka farsamada, ay tahay tallaabo hore loogu qaaday qalliinka lafaha ee aan caabuqa lahayn.
Maanta, sababtoo ah da'da guud, tirada bukaannada la ildaran cudurrada lafaha (sida jabka waayeelka, cudurrada wadajirka ah ee xumaada, iyo lafo-xanuun) ayaa aad u kordhay (1, 2).Sidaa darteed, hay'adaha caafimaadku waxay muhiimad weyn siiyaan qalliinka lafaha, oo ay ku jiraan lafaha lafaha ee boolal, saxannada, cidiyaha iyo kala-goysyada macmalka ah (3, 4).Si kastaba ha ahaatee, lafaha dhaqameed ee implants ayaa la sheegay inay u nugul yihiin ku-dhejinta bakteeriyada iyo samaynta biofilm, taas oo keeni karta caabuqa goobta qaliinka (SSI) qalitaanka ka dib (5, 6).Marka biofilm-ka lagu sameeyo dusha sare ee maqaar-galaha lafaha, ka saarista biofilm-ka ayaa noqonaysa mid aad u adag xitaa iyadoo la isticmaalayo qiyaaso badan oo antibiyootik ah.Sidaa darteed, waxay badanaa keentaa infekshannada qalliinka kadib (7, 8).Dhibaatooyinka kor ku xusan awgeed, daawaynta maqaar-galaha cudurka qaba waa in lagu daraa dib-u-shaqayn, oo ay ku jirto ka saarida dhammaan maqaar-galaha iyo unugyada ku xeeran;sidaas darteed, bukaanku wuxuu la kulmi doonaa xanuun daran iyo khataraha qaar (9, 10).
Si loo xalliyo qaar ka mid ah dhibaatooyinkan, lafaha lafaha-gashado-daawoyinka ayaa la sameeyay si looga hortago caabuqa iyadoo la tirtirayo bakteeriyada ku xiran dusha sare (11, 12).Si kastaba ha ahaatee, istaraatiijiyadu waxay weli muujineysaa xaddidaadyo dhowr ah.Waxaa la soo wariyay in muddada dheer ee la geliyo daroogooyinka-daawadu ay sababtay dhaawaca unugyada ku wareegsan oo ay sababtay barar, taas oo keeni karta necrosis (13, 14).Intaa waxaa dheer, dareerayaasha dabiiciga ah ee jiri kara ka dib habka wax soo saarka ee dawada ka bixisa lafaha lafaha, kuwaas oo ay si adag u mamnuucday Maamulka Cuntada iyo Dawooyinka ee Maraykanka, waxay u baahan yihiin tillaabooyin nadiifin oo dheeraad ah si ay u buuxiyaan heerarkooda (15).Maqaarka-daawadu waxay caqabad ku yihiin sii-deynta la kantaroolay ee dawooyinka, iyo culayska dawada xaddidan awgeed, codsiga muddada-dheer ee daawadu macquul maaha (16).
Istaraatiijiyad kale oo caadi ah ayaa ah in maqaar-galaha lagu dahaadho polymer-ka-hortagga ah si looga hortago arrinta noolaha iyo bakteeriyada inay ku dhegto dusha sare (17).Tusaale ahaan, polymers zwitterionic ayaa soo jiitay dareenka sababtoo ah sifooyinkooda aan dhejiska ahayn marka ay la xiriiraan borotiinka balaasmaha, unugyada, iyo bakteeriyada.Si kastaba ha ahaatee, waxay leedahay xaddidaadyo la xidhiidha xasilloonida muddada dheer iyo cimri dhererka farsamada, taas oo caqabad ku ah codsigeeda wax ku oolka ah ee lafaha lafaha, gaar ahaan sababtoo ah xoqitaanka farsamada inta lagu jiro hababka qalliinka (18, 19).Intaa waxaa dheer, iyada oo ay ugu wacan tahay bayoolajigeeda sare, baahida loo qabo qalliinka saarista, iyo nadiifinta dusha sare ee nadiifinta iyada oo loo marayo daxalka, lafaha lafaha oo ka samaysan walxaha biodegradable ayaa la isticmaalay (20, 21).Inta lagu jiro daxalka, isku xidhka kiimikaad ee u dhexeeya matrix polymer-ka waa la jejebiyaa oo laga go'ay dusha sare, iyo kuwa raacsani waxay nadiifiyaan dusha sare.Si kastaba ha ahaatee, wasakhaynta ka-hortagga noolaha ee nadiifinta dusha sare waxay waxtar u leedahay waqti gaaban.Intaa waxaa dheer, qalabka ugu badan ee la nuugi karo oo ay ku jiraan poly (lactic acid-glycolic acid copolymer) (PLGA), polylactic acid (PLA) iyo alloys-ku salaysan magnesium waxay mari doonaan biodegradation aan sinnayn iyo nabaad-guurka jirka, taas oo si xun u saameyn doonta xasilloonida farsamada.(laba iyo labaatan).Intaa waxaa dheer, jajabyada saxannada bayoolajiga ah ayaa siinaya meel ay bakteeriyadu ku dhejiso, taas oo kordhisa fursadda caabuqa mustaqbalka fog.Khatartan burburka farsamada iyo caabuqa ayaa xaddidaya codsiga dhabta ah ee qalliinka caagga ah (23).
Sagxadaha superhydrophobic (SHP) ee u ekeeya qaab dhismeedka kala sareynta caleemaha lotus waxay noqdeen xal macquul ah oogada wasakhda lidka ku ah (24, 25).Marka dusha sare ee SHP lagu geliyo dareere, goobooyin hawo ayaa ku xannibmi doona, si ay u sameeyaan jeebabka hawada kana hortagayaan ku dheggan bakteeriyada (26).Si kastaba ha ahaatee, daraasadihii ugu dambeeyay ayaa muujiyay in dusha sare ee SHP ay leedahay faa'iido darrooyin la xidhiidha cimri dhererka farsamada iyo xasilloonida muddada dheer, taas oo caqabad ku ah codsigeeda tallaalka caafimaadka.Waxaa intaa dheer, jeebabka hawadu way milmi doonaan oo lumin doonaan sifooyinkooda ka-hortagga wasakhda, sidaas awgeed waxay keenaysaa adhesion bakteeriyada ballaaran sababtoo ah dusha sare ee dusha sare ee SHP (27, 28).Dhawaan, Aizenberg iyo asxaabtiisu waxay soo bandhigeen hab cusub oo ah daahan ka-hortagga biofouling ee dusha sare iyagoo horumarinaya dusha siman oo ay dhiirigelisay warshadda Nepentes (29, 30).Dusha siman waxay muujinaysaa xasilloonida muddada dheer ee xaaladaha biyo-biyoodka, aad bay u dareere u tahay dareerayaasha noolaha, waxayna leedahay sifooyin is-dayactir ah.Si kastaba ha ahaatee, ma jirto hab lagu daboolo dahaarka maqaar-galaha caafimaad ee qaabaysan, mana la xaqiijinayo inuu taageero habka bogsashada unugyada dhaawacan ka dib marka la geliyo.
Halkan, waxaan ku soo bandhigeynaa dusha sare ee lafaha lafaha ee saliida leh (LOIS), dusha sare ee lafaha lafaha ee micro/nano-qaabaysan oo si adag loogu daro lakab khafiif ah oo khafiif ah si looga hortago in lala xiriiriyo qaliinka caagga ah Caabuqyada bakteeriyada, sida hagaajinta jabka.Sababtoo ah qaab-dhismeedka heerka-micro/nano-Fluorine-ku shaqeeyaa wuxuu si adag u hagaajiyaa saliidaha dhismaha, LOIS-ka la horumariyay waxay si buuxda u celin kartaa ku-dhejinta dareeraha kala duwan waxayna sii wadi kartaa waxqabadka ka-hortagga wasakhda muddo dheer.Dahaarka LOIS waxaa lagu dhejin karaa walxaha qaabab kala duwan leh oo loogu talagalay isku dhafka lafaha.Sifooyinka ugu wanaagsan ee lidka-biofouling ee LOIS ee lidka ku ah bakteeriyada biofilm [Pseudomonas aeruginosa iyo Staphylococcus aureus (MRSA) u adkaysta methicillin] iyo walxaha noolaha (unugyada, borotiinnada iyo kalsiyum) ayaa lagu xaqiijiyay gudaha vitro.Heerka xabagta ee ku dheggan ballaaran ee substrate-ka waa in ka yar 1%.Intaa waxaa dheer, xitaa ka dib marka culeyska farsamada sida xoqitaanka dusha sare uu dhaco, is-bogsiinta ay keento saliidaha gelaya waxay ka caawisaa ilaalinta sifooyinkeeda ka-hortagga wasakhda.Natiijooyinka tijaabada adkeysiga farsamada ayaa muujinaya in xitaa ka dib qaabeynta qaabdhismeedka iyo kiimikada, wadarta xoogga aan si weyn loo dhimi doonin.Intaa waxaa dheer, tijaabo in vitro ah oo u dhigma culeyska farsamada ee deegaanka qalliinka ayaa la sameeyay si loo caddeeyo in LOIS ay u adkeysan karto culeysyo farsamo oo kala duwan oo dhaca inta lagu jiro qalliinka caagga ah.Ugu dambayntii, waxaanu isticmaalnay qaab bakayle-ku-salaysan qaabka jabka femoral vivo, kaas oo caddeeyey in LOIS leeyahay sifooyin bakteeriyada ka-hortagga ah iyo biocompatibility.Natiijooyinka shucaaca iyo taariikhiga ah waxay xaqiijiyeen in habdhaqanka dufanka deggan iyo guryaha ka-hortagga-biofouling-ka 4 toddobaad gudahood ka dib markii la geliyo ay gaari karaan waxtarka ka-hortagga caabuqa iyo difaaca jirka iyada oo aan dib loo dhigin habka bogsashada lafaha.
Jaantuska 1A wuxuu muujinayaa jaantuska jaantuska LOIS-ga horumaray, kaas oo lagu dhex beeray qaab-dhismeedyada mikro/nano ee qaabka jabka femoral ee bakaylaha si loo xaqiijiyo caadooyinka xun-xun ee ka-hortagga bayooloji iyo ka-hortagga caabuqa.Habka biomimetic ayaa la sameeyaa si loogu ekaysiiyo dusha sare ee warshadda dheriga biyaha, iyo in laga hortago biofouling iyadoo lagu darayo lakabka saliidda gudaha qaab dhismeedka micro/nano ee dusha sare.Dusha lagu duray saliiduhu waxay yarayn kartaa xidhiidhka ka dhexeeya walxaha noolaha iyo dusha sare.Sidaa darteed, sababtoo ah samaynta curaarta kiimikada ee dusha sare, waxay leedahay wax-qabad heer sare ah oo ka hortag ah iyo xasillooni muddo dheer ah.Natiijo ahaan, sifooyinka anti-biofouling ee dusha dufanka ayaa u oggolaanaya codsiyo kala duwan oo wax ku ool ah oo ku saabsan cilmi-baarista biomedical.Si kastaba ha ahaatee, cilmi baaris ballaaran oo ku saabsan sida dushan gaarka ah ay ula falgalaan jirka weli lama dhammaystirin.Marka la barbar dhigo LOIS iyo substrates qaawan oo ku jira vitro iyadoo la isticmaalayo albumin iyo bakteeriyada biofilm, la'aanta LOIS waa la xaqiijin karaa (Jaantuska 1B).Intaa waxaa dheer, marka la rogo dhibcaha biyaha ee substrate-ka qaawan iyo qaybta LOIS (Jaantuska S1 iyo Filimka S1), waxqabadka wasakheynta noolaha ayaa la muujin karaa.Sida ka muuqata sawirka mikroskoob ee fluorescence, substrate-ka daboolan ee lagu beeray hakinta borotiinka iyo bakteeriyada ayaa muujiyay xaddi badan oo walxo bayooloji ah oo ku dheggan dusha sare.Si kastaba ha ahaatee, sababtoo ah sifooyinka wanaagsan ee anti-biofouling, LOIS si dhib leh uma soo bandhigto wax fluorescence ah.Si loo xaqiijiyo sifooyinka ka-hortagga-biofouling iyo ka-hortagga caabuqa, LOIS ayaa lagu dabaqay dusha sare ee lafaha lafaha loogu talagalay isku-dhafka lafaha (taaradaha iyo boolal) waxaana lagu dhejiyay qaabka jabka bakaylaha.Kahor intaan la tallaalin, maqaar-galaha lafaha qaawan iyo LOIS ayaa lagu tallaalay hakinta bakteeriyada muddo 12 saacadood ah.Ka-hortagga ka-hortagga wuxuu hubiyaa in biofilm uu ka sameysan yahay dusha sare ee maqaar-galaha bannaanka ah si loo barbardhigo.Jaantuska 1C waxa uu muujinayaa sawirka goobta jabka 4 usbuuc ka dib markii la geliyo.Dhinaca bidixda, bakayle leh lafaha lafaha qaawan ayaa muujiyay heer barar ah oo barar ah sababtoo ah samaynta biofilm ee dusha sare ee maqaar-galaha.Natiijada ka soo horjeeda ayaa lagu arkay bakaylaha lagu beeray LOIS, taas oo ah, unugyada ku hareeraysan LOIS ma muujin calaamado caabuq ama calaamado caabuq ah.Intaa waxaa dheer, sawirka indhaha ee bidixda wuxuu muujinayaa goobta qalliinka ee bakaylaha oo leh maqaar-galaha bannaanka ah, taas oo muujinaysa in aan lahayn dhejisyo badan oo ku yaal dusha sare ee maqaar-galaha bannaanka ah ee dusha sare ee LOIS.Tani waxay muujinaysaa in LOIS ay leedahay xasillooni muddo dheer ah oo ay leedahay awood ay ku ilaaliso waxyaabaha wasakhaysan ee bayoolojiga ah iyo kuwa ka hortagga adhesionka.
(A) Jaantuska jaantuska ee LOIS iyo ku dhejinta qaabka jabka femoral bakayle.(B) Sawirka microscopy fluorescence ee borotiinka iyo biofilm bakteeriyada ee dusha qaawan iyo substrate LOIS.4 usbuuc ka dib markii la geliyo, (C) sawir sawir ah oo goobta jaban iyo (D) sawirka raajada (oo ay iftiimisay leydi cas).Lahaanshaha sawirka: Kyomin Chae, Yonsei University.
Bakaylaha jeermis-dilaaca ah, ee si xun loo galiyay ayaa muujiyay habka bogsashada lafaha caadiga ah iyada oo aan lahayn wax calaamado ah caabuq ama caabuq.Dhanka kale, SHP implants oo horay loogu sii daayay joojinta bakteeriyada waxay muujinaysaa caabuqa la xiriira caabuqa unugyada ku xeeran.Tan waxaa loo aaneyn karaa awood la'aanteeda in ay joojiso adhesion bakteeriyada muddo dheer (Jaantus S2).Si loo caddeeyo in LOIS aysan saameyn ku yeelan habka bogsashada, laakiin waxay joojisaa infekshannada suurtagalka ah ee la xidhiidha tallaalka, sawirada raajada ee jaantuska wanaagsan ee la soo bandhigay iyo LOIS ee goobta jabka ayaa la barbardhigay (Jaantus 1D).Sawirka raajada ee maqaar-galaha togan ee qaawan ayaa muujiyay xariiqyo lafo-jileec oo joogto ah, taas oo muujinaysa in laftu aanay si buuxda u bogsan.Tani waxay soo jeedinaysaa in habka soo kabashada lafaha uu si weyn u daahi doono caabuqa la xiriira caabuqa.Taa lidkeeda, waxay muujisay in bakaylaha lagu dhex beeray LOIS ay bogsadeen oo aanay muujin goob jaban oo cad.
Si loo horumariyo beeralayda caafimaadka leh xasilloonida iyo shaqeynta muddada dheer (oo ay ku jiraan iska caabinta biofouling), dadaallo badan ayaa la sameeyay.Si kastaba ha ahaatee, joogitaanka walxo bayooloji oo kala duwan iyo dhaqdhaqaaqyada adhesion nudaha ayaa xaddidaya horumarinta hababkooda caafimaad ahaan lagu kalsoonaan karo.Si aan uga gudubno cilladahaas, waxaan sameynay qaab-dhismeed lakabka yar/nano ah iyo dusha kiimikaad wax laga beddelay, kaas oo la hagaajiyay sababtoo ah xoogga sare ee xididdada iyo isku xirnaanta kiimikaad si loo ilaaliyo saliidda ugu fudud ilaa xadka ugu badan.Jaantuska 2A wuxuu muujinayaa habka guud ee wax soo saarka LOIS.Marka hore, diyaari birta aan dawliga lahayn (SS) 304 substrate.Marka labaad, qaab-dhismeedka micro/nano ayaa lagu sameeyay substrate-ka SS iyadoo la isticmaalayo etching kiimikaad iyadoo la isticmaalayo xalalka hydrofluoric acid (HF).Si loo soo celiyo iska caabbinta daxalka ee SS, nitric acid (HNO3) xal (31) ayaa loo isticmaalaa in lagu farsameeyo substrate-ka xardhan.Passivation waxay kor u qaadaysaa iska caabbinta daxalka ee substrate-ka SS waxayna si weyn hoos ugu dhigtaa habka daxalka kaas oo yarayn kara waxqabadka guud ee LOIS.Dabadeed, adoo samaynaya monolayer (SAM) oo isku xidhan oo leh 1H, 1H, 2H, 2H-perfluorooctyltriethoxysilane (POTS), dusha sare ayaa kiimiko ahaan wax laga beddelay si loo hagaajiyo isdhexgalka kiimikaad ee u dhexeeya dusha sare iyo Affinity dufanka siman.Wax ka beddelka dusha sare wuxuu si weyn u yareynayaa tamarta dusha sare ee dusha qaabaysan ee mikro/nano-cabbir la sameeyay, kaas oo u dhigma tamarta dusha sare ee saliidda siman.Tani waxay u oggolaanaysaa saliidda in si buuxda loo qoyo, taas oo samaynaysa lakab saliideed oo deggan oo dusha sare ah.Dusha la bedelay waxa ay muujinaysaa hydrophobicity la xoojiyay.Natiijooyinku waxay muujinayaan in saliidda sibidhka ahi ay muujiso dabeecad deggan LOIS sababtoo ah xidhiidhka kiimikaad ee sarreeya iyo xoogga xididka ee ay sababtay qaab-dhismeedka micro/nano (32, 33).Isbeddellada indhaha ee dusha sare ee SS ka dib beddelka dusha sare iyo duritaanka saliidaha ayaa la darsay.Qaab dhismeedka lakabka yar/nano ee ka sameysan dusha sare wuxuu sababi karaa isbeddelo muuqaal ah wuxuuna mugdi gelin karaa dusha sare.Dhacdadan waxaa loo aaneynayaa saamaynta fidinta iftiinka ee kor loo qaaday ee dusha sare ee qallafsan, taas oo kordhisa milicsiga fidinta ee ay keento habka dabinnada iftiinka (34).Intaa waxaa dheer, ka dib marka saliidda lagu duro, LOIS ayaa noqonaysa madow.Lakabka saliidayntu wuxuu keenaa iftiin yar oo ka soo ifbaxa substrate-ka, taas oo mugdi gelinaysa LOIS.Si loo wanaajiyo qaab-dhismeedka yar-yar ee nanostructure si loo muujiyo xagasha silbashada ugu yar (SA) si loo gaaro waxqabadka anti-biofouling, iskaanka mikroskoobyada elektarooniga ah (SEM) iyo lammaane atomic ayaa loo adeegsaday si loo sameeyo waqtiyo kala duwan oo HF etching ah (0, 3)., 15 iyo 60 daqiiqo) Xooga Microscope (AFM) (Jaantuska 2B).Sawirada SEM iyo AFM waxay muujinayaan in ka dib wakhti gaaban oo xoqid ah (3 daqiiqo ee etching), substrate-ka qaawan ayaa sameeyay qallafsanaan nano-qiyaas ah.Qalafsanaanta dusha sare waxay isbedeshaa wakhtiga etching (Jaantuska S3).Qalooca waqtiga-kala duwan wuxuu muujinayaa in qalooca dusha sare uu sii socdo inuu kordho oo gaaro heerka ugu sarreeya 15 daqiiqo ee etching, ka dibna kaliya wax yar oo hoos u dhaca qiimaha qallafsanaanta ayaa lagu arkay 30 daqiiqo oo xoqid ah.Halkaa marka ay marayso, qallafsanaanta heerka nano waa la tirtiray, halka qallafsanaanta heerka-yar uu si xoog leh u kobcayo, taas oo ka dhigaysa qallafsanaanta isbeddelka mid deggan.Ka dib markii la xoqay in ka badan 30 daqiiqo, koror dheeraad ah oo qallafsanaanta ayaa la arkayaa, taas oo si faahfaahsan loogu sharraxay sida soo socota: SS wuxuu ka kooban yahay bir, oo lagu daray walxo ay ka mid yihiin birta, chromium, nikkel, molybdenum iyo walxo kale oo badan.Waxyaabahaas ka mid ah, birta, chromium iyo molybdenum waxay door muhiim ah ka ciyaaraan samaynta qallafsanaanta mikron/nano ee SS ee HF etching.Marxaladda hore ee daxalka, birta iyo chromium inta badan waa daxal sababtoo ah molybdenum waxay leedahay iska caabbinta daxalka ka sarreeya molybdenum.Marka uu ciribku sii socdo, xalka etching wuxuu gaaraa dheregsanaanta maxalliga ah, samaynta fluoride iyo oksaydhyada ay keento etching.Fluoride iyo oksaydhku way soo da'aan oo aakhirka dib bay u kaydiyaan dusha sare, samaynta qallafsanaanta dusha sare ee cabbirka micron/nano (31).Heerkan hoose/nano qallafsanaantu waxa ay door muhiim ah ka ciyaartaa sifooyinka is-bogsiinta ee LOIS.Dusha laba-geesoodka ah waxay soo saartaa saameyn isku-dhafan, oo si weyn u kordhinaysa xoogga xididdada.Dhacdadani waxay u oggolaanaysaa saliidaha inuu si deggan u galo dusha oo ka qaybqaato guryaha is-bogsiinta (35).Samaynta qallafsanaantu waxay kuxirantahay waqtiga etching.In ka yar 10 daqiiqo ee etching, dusha sare ka kooban yahay oo kaliya nano- qallafsanaan, taas oo aan ku filnayn si ay u qabtaan saliid ku filan si ay u leeyihiin caabbinta biofouling (36).Dhanka kale, haddii wakhtiga etching ka badan yahay 30 daqiiqo, qallafsanaanta nano-scale ee ay sameeyeen dib u habeynta birta iyo chromium way baaba'ayaan, oo kaliya qallafsanaanta cabbirka yar ayaa ku hadhi doona molybdenum awgeed.Dusha sare ee aadka u xardhan ayaa ka maqan qallafsanaanta nano-cabbirka waxayna luminaysaa saameynta isku-dhafka ah ee qallafsanaanta laba-geesoodka ah, taas oo si xun u saameeya sifooyinka is-bogsiinta ee LOIS.Cabbiraadaha SA ayaa lagu sameeyay substrates leh waqtiyo kala duwan si loo caddeeyo waxqabadka ka-hortagga wasakhda.Noocyo kala duwan oo dareere ah ayaa lagu doortay iyadoo lagu saleynayo viscosity iyo tamarta dusha sare, oo ay ku jiraan biyaha deionized (DI), dhiig, ethylene glycol (EG), ethanol (EtOH) iyo hexadecane (HD) (Jaantuska S4).Qaabka isbarbar-dhigga ee waqtiga-kala duwan wuxuu muujinayaa in dareerayaasha kala duwan ee leh tamar dusha sare leh iyo viscosities, SA ee LOIS ka dib 15 daqiiqo ee xoqidda ayaa ah kan ugu hooseeya.Sidaa darteed, LOIS waxaa loo habeeyay in lagu dhajiyo 15 daqiiqo si loo sameeyo mikron iyo nano-cabbir, taas oo ku habboon in si wax ku ool ah loo ilaaliyo adkeysiga saliidaha iyo sifooyinka wanaagsan ee ka-hortagga wasakhda.
(A) Jaantuska jaantuska ee habka wax soo saarka afarta-tallaabo ee LOIS.Gelinku wuxuu muujinayaa SAM-ka lagu sameeyay substrate-ka.(B) Sawirada SEM iyo AFM, oo loo isticmaalo in lagu wanaajiyo qaab dhismeedka micro/nano ee substrate hoos yimaada waqtiyo kala duwan.X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) spectra (C) Cr2p iyo (D) F1s ka dib passivation dusha iyo daahan SAM.au, unug aan sabab lahayn.(E) Sawirada matalayaasha dhibcaha biyaha ee qaawan, xardhan, SHP iyo LOIS substrates.(F) Xagalka xidhiidhka (CA) iyo cabbirka SA ee dareerayaasha leh xiisadaha dusha kala duwan ee SHP iyo LOIS.Xogta waxaa lagu muujiyey celcelis ahaan ± SD.
Kadib, si loo xaqiijiyo isbeddelka sifooyinka kiimikada ee dusha sare, X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) ayaa loo isticmaalay in lagu barto isbeddelka kiimikada ee dusha sare ee substrate ka dib daahan kasta oo dusha sare ah.Jaantuska 2C waxa uu muujinayaa natiijooyinka cabbiraadda XPS ee dusha sare ee HF etched iyo HNO 3 oogada la daweeyay.Labada ugu sarreeya ee ugu sarreeya ee 587.3 iyo 577.7 eV waxaa loo aaneyn karaa dammaanadda Cr-O ee ka jira lakabka chromium oxide, taas oo ah farqiga ugu weyn ee ka soo baxa HF etched.Tani waxay inta badan sabab u tahay isticmaalka birta iyo chromium fluoride ee dusha sare ee HNO3.Etching-ku-saleysan ee HNO3 waxa ay u ogolaataa chromium in uu sameeyo lakab oksaydh ah oo marag-mareen ah oogada, kaas oo ka dhigaya SS-ga xardhan mar kale adkaysi u leh daxalka.Jaantuska 2D, XPS spectra ayaa la helay si loo xaqiijiyo in silane ku salaysan fluorocarbon laga sameeyay dusha sare ka dib dahaadhka SAM, kaas oo leh dareere aad u sarreeya xitaa EG, dhiiga iyo EtOH.Dahaarka SAM waxaa lagu dhammeeyaa falcelinta kooxaha silane functional group oo leh kooxo hydroxyl ah oo lagu sameeyay daaweynta balaasmaha.Natiijo ahaan, koror weyn oo CF2 iyo CF3 ayaa la arkay.Tamarta isku xidhan ee u dhaxaysa 286 iyo 296 eV waxay tusinaysaa in wax ka beddelka kiimikaad uu si guul leh u dhammaystiray daaha SAM.SHP waxay muujinaysaa CF2 (290.1 ​​eV) iyo CF3 (293.3 eV) ugu sarreeya, kuwaas oo ay sababto silane ku salaysan fluorocarbon oo ka sameysan dusha sare.Jaantuska 2E waxa uu tusayaa sawirada indhaha ee xagal xidhiidhka (CA) ee kooxaha kala duwan ee biyaha deionized ee xidhiidhka qaawan, xardhan, SHP, iyo LOIS.Sawiradani waxay muujinayaan in dusha sare ee xardhan uu noqdo haurofile sababtoo ah qaab-dhismeedka micro/nano ee ay samaysay etching kiimikaad si biyaha deionized ay u nuugaan dhismaha.Si kastaba ha noqotee, marka substrate-ka lagu daboolo SAM, substrate-ku wuxuu soo bandhigayaa biyo-celin xooggan, sidaas darteed dusha sare ee SHP ayaa la sameeyay iyo meesha xiriirka u dhexeeya biyaha iyo dusha sare waa yar yahay.Ugu dambeyntii, hoos u dhac ku yimid CA ayaa lagu arkay LOIS, taas oo loo aaneyn karo gelitaanka saliidaha ee qaab-dhismeedka yar yar, taas oo kordhinaysa goobta xiriirka.Si loo caddeeyo in dusha sare uu leeyahay dareere aad u fiican oo iska caabin ah iyo sifooyin aan dhejis ahayn, LOIS ayaa la barbar dhigay substrate-ka SHP iyadoo la cabbirayo CA iyo SA iyadoo la isticmaalayo dareere kala duwan (Jaantuska 2F).Noocyo kala duwan oo dareere ah ayaa lagu doortay iyadoo lagu salaynayo viscosity iyo tamar dusha sare, oo ay ku jiraan biyaha deionized, dhiiga, EG, EtOH iyo HD (Jaantuska S4).Natiijooyinka cabbiraadda CA waxay muujinayaan in marka CA u janjeerto HD, qiimaha dhimista CA, halkaasoo CA ay leedahay tamarta dusha ugu hooseysa.Intaa waxaa dheer, LOIS-ga guud ee CA waa mid hooseeya.Si kastaba ha noqotee, cabirka SA wuxuu muujinayaa dhacdo gabi ahaanba ka duwan.Marka laga reebo biyaha ionized, dhammaan dareerayaasha waxay ku dheggan yihiin substrate-ka SHP iyaga oo aan simbiriirixan.Dhanka kale, LOIS waxay muujinaysaa SA aad u hooseeya, halkaas oo marka dhammaan dareeraha la leexiyo xagal ka hooseeya 10 ° ilaa 15 °, dhammaan dareeraha ayaa soo rogi doona.Tani waxay si xoog leh u muujinaysaa in aan-ku-dhejin la'aanta LOIS ay ka fiican tahay kan dusha SHP.Intaa waxaa dheer, daahan LOIS ayaa sidoo kale lagu dabaqaa noocyo kala duwan oo qalab ah, oo ay ku jiraan titanium (Ti), polyphenylsulfone (PPSU), polyoxymethylene (POM), polyether ether ketone (PEEK) iyo polymers bioabsorbable (PLGA), Waxay yihiin qalab lafaha la rakibo (Jaantus). S5)).Sawirada isku xigxiga ee dhibcaha dhibcaha ee walxaha ay daweysay LOIS waxay muujinayaan in sifooyinka lidka-biofouling ee LOIS ay isku mid yihiin dhammaan substrate-yada.Intaa waxaa dheer, natiijooyinka cabbiraadda CA iyo SA waxay muujinayaan in sifooyinka aan dhejiska ahayn ee LOIS lagu dabaqi karo qalab kale.
Si loo xaqiijiyo sifooyinka ka-hortagga wasakhda ee LOIS, noocyo kala duwan oo substrates ah (ay ku jiraan bare, etched, SHP iyo LOIS) ayaa lagu darey Pseudomonas aeruginosa iyo MRSA.Labadan bakteeriya ayaa loo doortay inay noqdaan bakteeriyada isbitaalka, taas oo u horseedi karta sameynta biofilms, taasoo keenta SSI (37).Jaantuska 3 (A iyo B) waxay muujinayaan sawirada mikroskoob ee fluorescence iyo unugga samaynta gumaysiga (CFU) natiijooyinka cabbiraadda substrates ee ku dhex jira hakinta bakteeriyada muddada gaaban (12 saacadood) iyo muddada dheer (72 saacadood), siday u kala horreeyaan.Muddo gaaban gudaheed, bakteeriyadu waxay samaysmi doontaa rucubyo waxayna kori doontaa xajmigeeda, waxayna isku dabooshaa walxo xab-xab ah oo kale ah waxayna ka hortagaysaa in meesha laga saaro.Si kastaba ha ahaatee, muddada 72-saac ee soo-baxa, bakteeriyadu way qaan-gaadhi doontaa oo way fududaan doontaa inay kala firdhiso si ay u samaysato guumooyin badan ama kooxo badan.Sidaa darteed, waxaa loo tixgelin karaa in 72-saac ku-meel-gaar ah ay tahay waqti dheer oo ay tahay wakhtiga ku habboon ee ku habboon si loo sameeyo biofilm xooggan oo dusha sare ah (38).Muddo gaaban gudaheed, dusha sare ee xardhan iyo dusha sare ee SHP waxay soo bandhigeen adhesion bakteeriyada, taas oo hoos u dhigtay 25% ilaa 50% marka loo eego substrate-ka qaawan.Si kastaba ha ahaatee, iyada oo ay ugu wacan tahay waxqabadkeeda wanaagsan ee ka-hortagga-biofouling iyo xasilloonida, LOIS ma muujin bakteeriyadu ku dhegganaanta biofilm muddada gaaban iyo muddada dheer.Jaantuska jaantuska (Jaantuska 3C) wuxuu qeexayaa sharraxaadda habka wasakhaynta nafleyda ee ka hortagga etching xalinta, SHP iyo LOIS.Male-awaalku waa in substrate-ka xardhan ee leh sifooyinka hydrophilic uu yeelan doono meel ka weyn kan substrate-ka qaawan.Sidaa darteed, ku-dhejinta bakteeriyada badan ayaa ku dhici doonta substrate-ka la xoqay.Si kastaba ha ahaatee, marka la barbardhigo substrate-ka qaawan, substrate-ka xardhan ayaa si aad ah uga yar biofilm-ka laga sameeyay dusha sare.Tani waa sababta oo ah unugyada biyuhu waxay si adag ugu xidhaan dusha sare ee hydrophilic waxayna u dhaqmaan sidii saliidaha biyaha, sidaas darteed waxay farageliyaan ku-xidhka bakteeriyada muddada gaaban (39).Si kastaba ha ahaatee, lakabka unugyada biyuhu aad bay u dhuuban yihiin waxayna ku milmaan hakinta bakteeriyada.Sidaa darteed, lakabka molecular biyuhu wuu baaba'aa muddo dheer, taas oo horseedaysa ku dheggan bakteeriyada ballaaran iyo kororka.SHP, sababtuna tahay astaamaheeda aan qoyanayn muddada-gaaban, ku-dhejinta bakteeriyada waa la xannibay.Ku-dhejinta bakteeriyada ee hooseysa waxaa loo aaneyn karaa jeebabka hawada ee ku xayiran qaabka lakabka ah iyo tamarta hoose ee dusha sare, taas oo yareyneysa xiriirka ka dhexeeya joojinta bakteeriyada iyo dusha sare.Si kastaba ha ahaatee, ku-dhejinta bakteeriyada ballaaran ayaa lagu arkay SHP sababtoo ah waxay lumisay hantideeda ka-hortagga wasakhda muddo dheer.Tani waxay inta badan sabab u tahay luminta jeebabka hawada sababtoo ah cadaadiska hydrostatic iyo milanka hawada ee biyaha.Tani waxay inta badan sabab u tahay luminta jeebabka hawada sababtoo ah kala diri iyo qaab dhismeedka lakabka ah ee bixiya aag ballaaran oo ku dheggan (27, 40).Si ka duwan labadan substrates ee saamaynta muhiimka ah ku leh xasilloonida muddada-dheer, saliidda saliidda leh ee ku jirta LOIS ayaa lagu duraa qaab-dhismeedka micro/nano mana lumin doono xitaa muddada dheer.Saliidaha ay ka buuxaan qaababka yaryar/nano aad ayey u deggan yihiin oo si xoog leh ayey u soo jiidanayaan dusha sare sababtoo ah isku xirnaanta kiimikaad ee sarreeya, taas oo ka hortagaysa ku-dhejinta bakteeriyada muddo dheer.Jaantuska S6 waxa uu tusinayaa sawirka mikroskoob ee konfocal ee substrate-ka-sufan ee lagu dhex shubay cusbada fosfooraska buffered (PBS).Sawirada joogtada ah waxay muujinayaan in xitaa 120 saacadood oo gariir yar ka dib (120 rpm), lakabka dufanka leh ee LOIS ayaa weli ah mid aan isbeddelin, taas oo muujinaysa xasilloonida muddada dheer ee xaaladaha socodka.Tan waxa u sabab ah xidhiidhka sare ee kiimikaad ee u dhexeeya daahanka SAM-ku-salaysan ee fluorine iyo saliidda perfluorocarbon-ku-salaysan, si lakabka saliidda deggan loo sameeyo.Sidaa darteed, waxqabadka ka-hortagga wasakhda waa la ilaaliyaa.Intaa waxaa dheer, substrate-ka waxaa lagu tijaabiyay borotiinka matalayaasha ah (albumin iyo fibrinogen), kuwaas oo ku jira plasma, unugyo si dhow ula xiriira shaqada difaaca (macrophages iyo fibroblasts), iyo kuwa la xidhiidha lafaha lafaha.Waxa ku jira kaalshiyamku aad buu u sarreeyaa.(Jaantuska 3D, 1 iyo 2, iyo sawirka S7) (41, 42).Intaa waxaa dheer, sawirada mikroskoob ee fluorescence ee baaritaanka adhesion ee fibrinogen, albumin iyo calcium waxay muujiyeen sifooyinka adhesion ee kala duwan ee koox kasta oo substrate ah (Jaantus S8).Inta lagu jiro samaynta lafaha, lakabyada cusub ee lafaha iyo kaalshiyamku waxay ku hareeraysan yihiin maqaar-galaha lafaha, taas oo aan kaliya ka dhigin ka saarida mid adag, laakiin sidoo kale waxay keeni kartaa waxyeelo lama filaan ah bukaanka inta lagu jiro habka saarista.Sidaa darteed, heerarka hoose ee kaydka calcium ee taarikada lafaha iyo birta ayaa faa'iido u leh qalliinka lafaha oo u baahan ka saarista maqaar-galaha.Iyada oo ku saleysan cabbiraadda aagga ku lifaaqan ee ku saleysan xoogga fluorescence iyo tirada unugyada, waxaan xaqiijinnay in LOIS ay muujineyso sifooyin anti-biofouling heer sare ah ee dhammaan walxaha noolaha marka la barbar dhigo substrates kale.Sida laga soo xigtay natiijooyinka tijaabooyinka in vitro, anti-biological fouling LOIS waxaa lagu dabaqi karaa maqaar-galaha lafaha, taas oo aan joojin karin oo kaliya caabuqyada ay keento bakteeriyada biofilm, laakiin sidoo kale waxay yareysaa bararka ay keento habka difaaca firfircoon ee jirka.
(A) Sawirada mikroskoob ee fluorescence ee koox kasta (qaawan, xardhan, SHP iyo LOIS) oo lagu beeray Pseudomonas aeruginosa iyo ganaaxyada MRSA 12 iyo 72 saacadood.(B) Tirada ku dheggan CFU ee Pseudomonas aeruginosa iyo MRSA ee dusha koox kasta.(C) Jaantuska jaantuska habka wasakhaynta noolaha ee waqti-gaaban iyo muddada-dheer, SHP iyo LOIS.(D) (1) Tirada fibroblasts ee ku dheggan substrate-ka kasta iyo sawirada mikroskoob ee fluorescence ee unugyadu waxay ku dheggan yihiin bannaanka iyo LOIS.(2) Tijaabada xajinta ee borotiinnada la xiriira difaaca jirka, albumin iyo calcium ee ku lug leh habka bogsashada lafaha (* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001 iyo **** P <0.0001).ns, muhiim ma aha.
Marka laga hadlayo culaysyo xoog leh oo aan laga maarmi karin, adkaysiga farsamada ayaa had iyo jeer ahaa caqabadda ugu weyn ee adeegsiga dahaarka lidka ku ah.Hababka dhaqameed ee ka-hortagga bullaacadaha jeelku waxay ku saleysan yihiin polymers-ka leh milanka biyaha hooseeya iyo jilicsanaanta.Sidaa darteed, waxay inta badan u nugul yihiin cadaadiska farsamada ee codsiyada biomedical.Sidaa darteed, dahaarka ka-hortagga ka-hortagga ah ee makaanikada ah ayaa weli caqabad ku ah codsiyada sida lafaha lafaha (43, 44).Jaantuska 4A(1) waxa uu muujinayaa labada nooc ee walbahaarka ugu waaweyn ee lagu dabaqo maqaar-galaha lafaha, oo ay ku jiraan xagashada (stress xiirid) iyo isku-buufin leh sawirka indhaha ee maqaar-galaha dhaawacan ee ay soo saarto xoogga.Tusaale ahaan, marka furaha lagu adkeeyo kaashawiito, ama marka dhakhtarka qalliinka uu si adag u qabto saxanadda lafta maroojisyada oo uu isticmaalo xoog cadaadis, saxanka lafaha caaga ah ayaa dhaawacmi doona oo la xoqi doona labadaba miisaanka makro iyo micro/nano (Jaantuska 4A, 2)Si loo tijaabiyo in LOIS-soo-saarka ay u adkeysan karto waxyeeladan inta lagu jiro qalliinka caagga ah, nanoindentation ayaa la sameeyay si loo barbardhigo adkaanta substrate-ka qaawan iyo LOIS ee miisaanka micro/nano si loo barto sifooyinka farsamada ee saameynta qaabdhismeedka micro/nano (Jaantuska 4B).Jaantusku wuxuu muujinayaa hab-dhaqanka qallafsanaanta ee LOIS sababtoo ah joogitaanka qaab-dhismeedyada yaryar/nano.Qalooca bara-kaca xoogga ah ayaa la sawiray iyadoo lagu salaynayo natiijooyinka nanoindentation (Jaantuska 4C).Sawirka buluuga ah wuxuu u taagan yahay substrate-ka qaawan, kaas oo tusinaya qallooc yar, sida lagu arkay qotodheerta ugu sarreysa ee 0.26-μm.Dhanka kale, kororka tartiib tartiib ah ee xoogga nanoindentation iyo barokaca lagu arkay LOIS (qalooca guduudan) ayaa laga yaabaa inay muujiso calaamadaha sifooyinka farsamaysan ee la dhimay, taasoo keentay qoto dheer nanoindentation ee 1.61μm.Tani waa sababta oo ah qaab-dhismeedka micro/nano ee ku jira LOIS wuxuu bixiyaa meel horu-mar qoto dheer oo cidhifka nanoindenter ah, sidaa darteed qallafsanaantiisu wuu ka weyn yahay kan substrate-ka qaawan.Konsta-Gdoutos iyo al.(45) waxay aaminsan tahay in ay sabab u tahay joogitaanka nanostructures, nanoindentation iyo micro/nano qallafsanaan u horseedaan qalooca nanoindentation aan joogto ahayn.Meesha hadhsan waxay u dhigantaa qalooca qallooca aan caadiga ahayn ee loo aaneynayo nanostructure, halka aagga aan hadh lahayn loo nisbeeyo qaab-dhismeed yar.Qallafsanaantani waxa ay dhaawici kartaa qaab-dhismeed-yareedka/nanostructure-ka saliidda haynta oo si xun u saamayso waxqabadkeeda ka-hortagga wasakhda.Si loo daraaseeyo waxyeelada ay u leedahay LOIS, waxyeelada lama huraanka ah ee dhismayaasha yaryar/nano ayaa lagu soo celceliyay jirka inta lagu jiro qaliinka balaastikada.Adigoo isticmaalaya tijaabooyinka ku dheggan dhiiga iyo borotiinka, xasiloonida guryaha anti-biofouling ee LOIS ka dib in vitro ayaa la go'aamin karaa (Jaantuska 4D).Sawirro muuqaal ah oo taxane ah ayaa muujinaya burburka ka dhacay meel u dhow godadka substrate kasta.Tijaabada xajinta dhiigga ayaa la sameeyay si loo muujiyo saamaynta dhaawaca farsamada ee daahan ka-hortagga-biofouling (Jaantus 4E).Sida SHP, guryaha ka-hortagga wasakhda waxay luminayaan burbur dartiis, LOIS-na waxay soo bandhigtaa sifooyin-ka-hortagga wasakhda oo aad u wanaagsan iyadoo dib u celinaysa dhiigga.Tani waa sababta oo ah, sababtoo ah tamarta dusha sare waxaa hogaaminaya ficilka xididada ee daboolaya aagga dhaawacan, socodka ku jira saliidaha jilicsan ee qaab-dhismeedku wuxuu dib u soo celinayaa sifooyinka ka-hortagga wasakhda (35).Isbeddel la mid ah ayaa lagu arkay baaritaanka adhesion borotiinka iyadoo la adeegsanayo albumin.Aagga dhaawacan, ku-dhejinta borotiinka dusha sare ee SHP ayaa si weyn loo arkaa, iyadoo la cabbirayo daboolka aagga, waxaa lagu qiyaasi karaa kala badh heerka adhesion ee substrate qaawan.Dhanka kale, LOIS waxay ilaalisay astaamaheeda anti-biofouling iyada oo aan keenin adhesion (Jaantus 4, F iyo G).Intaa waxaa dheer, dusha sare ee muraayadda ayaa inta badan la kulma cadaadis farsamo oo xoog leh, sida qodista, sidaas darteed waxaan barannay awoodda daaha LOIS si ay ugu sii jirto qulqulka in vitro.Jaantuska 4H waxa uu tusinayaa sawirada indhaha ee boolal kala duwan, oo ay ku jiraan qaawan, SHP iyo LOIS.Laydiga cas wuxuu u taagan yahay meesha la beegsanayo halkaasoo culeyska farsamo ee xoogga leh uu dhaco inta lagu jiro abuurka lafaha.Si la mid ah baaritaanka adhesion borotiinka ee saxanka, mikroskoob fluorescence ayaa loo isticmaalaa in lagu sawiro adhesion borotiinka oo lagu cabbiro aagga daboolka si loo caddeeyo daacadnimada dahaadhka LOIS, xitaa marka lagu jiro cadaadis farsamo oo xooggan (Jaantus 4, I iyo J).Kaashashka-LoIS-daaweeyay waxay soo bandhigaan waxqabad aad u fiican oo ka-hortagga wasakhda, ku dhawaadna ma jiro borotiin ku dheggan dusha sare.Dhanka kale, adhesion borotiinka ayaa lagu arkay boolal qaawan iyo sharoobada SHP, halkaas oo daboolka aagga boolal SHP uu ahaa saddex meelood meel ka mid ah boolal qaawan.Intaa waxaa dheer, maqaar-galaha lafaha ee loo isticmaalo hagaajinta waa inuu noqdaa mid si farsamaysan u xoogan si uu u adkeeyo cadaadiska lagu dhejiyo goobta jaban, sida ku cad Jaantus 4K.Sidaa darteed, imtixaan foorarsi ah ayaa la sameeyay si loo go'aamiyo saameynta wax ka beddelka kiimikada ee sifooyinka farsamada.Intaa waxaa dheer, tan waxaa loo sameeyaa si loo ilaaliyo cadaadiska go'an ee ka yimaada maqaar-galaha.Codso xoog farsamo oo toosan ilaa maqaar-galaha uu si buuxda u laalaaban yahay lagana helayo qalooca cadaadiska cadaadiska (Jaantuska 4L, 1).Laba sifo oo ay ku jiraan modules-ka da'da yar iyo xoogga dabacsanaanta ayaa la barbardhigay inta u dhaxaysa substrate-yada qaawan iyo LOIS si ay u muujiyaan awoodooda makaanikada (Jaantus 4L, 2 iyo 3).Module-ka dhallintu waxa uu tilmaamayaa awoodda shay u adkeysan karo isbeddellada farsamada.Qaabka dhallinta ee substrate kasta waa 41.48±1.01 iyo 40.06±0.96 GPA, siday u kala horreeyaan;Farqiga la arkay waa qiyaastii 3.4%.Intaa waxaa dheer, waxaa la sheegay in xoogga foorarsiga, kaas oo go'aaminaya adkaanta walxaha, waa 102.34 ± 1.51 GPa ee substrate qaawan iyo 96.99 ± 0.86 GPa ee SHP.Substrate-ka qaawan ayaa qiyaastii 5.3% ka sarreeya.Hoos-u-dhac yar oo ku yimaadda guryaha farsamaysan waxa laga yaabaa inay sababto saamaynta darajada.Saamaynta cirifka, qallafsanaanta micro/nano waxay u dhaqmi kartaa sidii jaanisyo go'an, taasoo horseedaysa isku-ururinta walaaca maxalliga ah oo saameeya sifooyinka farsamada ee maqaar-galaha (46).Si kastaba ha ahaatee, iyadoo lagu saleynayo xaqiiqda ah in qallafsanaanta lafaha kortikal ee bini'aadamka lagu soo warramey inay u dhexeeyaan 7.4 iyo 31.6 GPa, iyo qiyaasta LOIS modules waxay ka badan tahay lafaha kortikal ee bini'aadamka (47), LOIS waa ku filan tahay inay taageerto jabka iyo guud ahaan sifooyinka farsamada ayaa si yar u saameeya wax ka beddelka dusha sare.
(A) Jaantuska jaantuska (1) culayska farsamo ee lagu rakibay maqaar-galaha lafaha inta lagu jiro hawlgalka, iyo (2) sawirka indhaha ee maqaar-galaha lafaha dhaawacan.(B) Jaantuska naqshadaynta guryaha nano-farsamo ee cabbiraadda nanoindentation iyo LOIS ee dusha qaawan.(C) Qalooca bara-kaca nanoindentation ee dusha qaawan iyo LOIS.(D) Ka dib tijaabooyinka in vitro, ku ekaysii sawirada indhaha ee noocyada kala duwan ee taarikada lafaha (meesha dhaawacantay waxaa lagu muujiyay leydi cas) si aad u ekaysiiso culeyska farsamada ee sababay inta lagu jiro hawlgalka.(E) Tijaabada ku dheggan dhiiga iyo (F) tijaabada adhesion borotiinka ee kooxda saxanka lafaha dhaawacan.(G) Cabbir daboolka aagga borotiinka ku dheggan saxanka.(H) Sawirada indhaha ee noocyada kala duwan ee boolal lafaha ka dib tijaabada in vitro.(I) Tijaabada ku dheggan borotiinka si loo barto daacadnimada dahaarka kala duwan.(J) Cabbir daboolka aagga borotiinka ee ku dheggan furka.(K) Dhaqdhaqaaqa bakaylaha waxaa loogu talagalay in lagu abuuro cadaadis go'an oo ku saabsan lafta jaban.(L) (1) Laabi natiijooyinka tijaabada iyo sawirada indhaha ka hor iyo ka dib foorarsiga.Farqiga u dhexeeya (2) Module-ka da'da yar iyo (3) xoogga foorarsiga ee u dhexeeya maqaar-galaha qaawan iyo SHP.Xogta waxaa lagu muujiyey celcelis ahaan ± SD (* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001 iyo **** P<0.0001).Lahaanshaha sawirka: Kyomin Chae, Yonsei University.
Xaaladaha kiliinikada, inta badan taabashada bakteeriyada ee alaabta noolaha iyo goobaha boogta waxay ka timaadaa baaluq, baaluq biofilms (48).Sidaa darteed, xarumaha Maraykanka ee Xakamaynta iyo Kahortagga Cudurku waxay ku qiyaaseen in 65% dhammaan caabuqyada bini'aadamka ay la xiriiraan biofilms (49).Xaaladdan oo kale, waa lagama maarmaan in la bixiyo naqshad tijaabo ah oo in vivo ah oo bixisa samaynta biofilm joogto ah oo ku yaal dusha sare ee maqaar-galaha.Sidaa daraadeed, waxaanu soo saarnay qaabka jabka bakaylaha ee bakaylaha kaas oo maqaaradaha lafaha hore loogu sii daayay joojinta bakteeriyada ka dibna lagu dhejiyay femurs bakayle si loo barto sifooyinka lidka ku ah ee LOIS ee vivo.Saddexda xaqiiqo ee muhiimka ah ee soo socda awgood, infekshannada bakteeriyada waxaa keena dhaqan hore halkii ay si toos ah ugu duri lahaayeen joojinta bakteeriyada: (i) Nidaamka difaaca ee bakaylaha ayaa si dabiici ah uga xoog badan kan aadanaha;Sidaa darteed, duritaannada joojinta bakteeriyada iyo bakteeriyada planktonic waa suurtagal Wax saameyn ah kuma laha sameynta biofilms.(Ii) Bakteeriyada Planktonic aad bay ugu nugul tahay antibiyootiga, antibiyootigana waxaa badanaa la isticmaalaa qalitaanka ka dib;ugu dambeyntii, (iii) joojinta bakteeriyada planktonic waxaa lagu qasi karaa dareeraha jidhka xayawaanka (50).Marka hore loo dhaqan gelinayo maqaar-galaha joojinta bakteeriyada ka hor intaan la tallaalin, waxaan si fiican u baran karnaa saameynta waxyeellada leh ee caabuqa bakteeriyada iyo falcelinta jirka shisheeye (FBR) ee habka bogsashada lafaha.Bakaylaha waxaa la sadqeeyay 4 usbuuc ka dib markii la geliyey, sababtoo ah lafo-dhexgalka lagama maarmaanka u ah habka bogsashada lafaha ayaa lagu dhamayn doonaa 4 toddobaad gudahood.Ka dib, maqaar-galaha ayaa laga saaray bakaylaha si loo eego daraasadaha hoose.Jaantuska 5A wuxuu muujinayaa habka fidinta bakteeriyada.Maqaar-galaha lafaha ee cudurka qaba ayaa la geliyaa jirka.Natiijada ka-hortagga ka-hortagga joojinta bakteeriyada, lix ka mid ah lixdii bakayle ee lagu rakibay maqaar-galaha qaawan ayaa cudurka qaaday, halka mid ka mid ah bakaylaha lagu tallaalay LOIS-lagu daweeyay uusan cudurka qaadin.Caabuqyada bakteeriyada waxay ku socdaan saddex tallaabo, oo ay ku jiraan korriin, korriin iyo kala firdhisanaan (51).Marka hore, bakteeriyada ku dheggan ayaa taran oo korkeeda korkeeda, ka dibna bakteeriyadu waxay samaysaa biofilm marka ay soo saarto polymer-ka ka baxsan (EPS), amyloid iyo DNA-ga ka baxsan.Biofilm ma aha oo kaliya faragelinta gelitaanka antibiyootiga, laakiin sidoo kale waxay kor u qaadaa ururinta antibiyootigga-xumeeya enzymes (sida β-lactamase) (52).Ugu dambeyntii, biofilm-ku wuxuu ku faafiyaa bakteeriyada qaangaarka ah unugyada ku wareegsan.Sidaa darteed, infekshanku wuu dhacaa.Intaa waxaa dheer, marka jirka shisheeye uu galo jirka, caabuqa keeni kara jawaab celin difaac adag wuxuu keeni karaa barar daran, xanuun, iyo hoos u dhac difaac.Jaantuska 5B waxa uu bixiyaa dulmar ku saabsan FBR oo ay sababtay galinta lafaha lafaha, halkii ay ka ahaan lahayd jawaabta difaaca ee ay keento caabuqa bakteeriyada.Nidaamka difaaca jirka waxa uu u aqoonsanayaa maqaar-galaha la geliyo inuu yahay jidh shisheeye, ka dibna wuxuu keenaa unugyada iyo unugyadu inay ka falceliyaan si ay u daboolaan jidhka shisheeye (53).Maalmihii hore ee FBR, matrix sahay ah ayaa lagu sameeyay dusha sare ee lafaha lafaha, taas oo keentay adsorption of fibrinogen.Fibrinogen-ka la isku dhejiyay ayaa markaa sameeya shabakad fibrin oo cufan, taas oo kor u qaadaysa ku-xidhka leukocytes (54).Marka la sameeyo shabakada fibrin, barar ba'an ayaa dhici doona sababtoo ah dhexgelinta neutrophils.Tallaabadan, noocyo kala duwan oo cytokines ah sida buro necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-4 (IL-4) iyo IL-β ayaa la sii daayaa, monocytes waxay bilaabaan inay galaan goobta tallaalka oo ay u kala saaraan unugyo waaweyn.Bogga (41, 55, 56).Yaraynta FBR waxay had iyo jeer ahayd caqabad sababtoo ah FBR-da xad-dhaafka ah waxay sababi kartaa barar ba'an iyo mid dabadheeraad ah, taas oo u horseedi karta dhibaatooyin dilaa ah.Si loo qiimeeyo saamaynta caabuqa bakteeriyada ee unugyada ku xeeran maqaar-galaha qaawan iyo LOIS, waxaa la isticmaalay midabaynta hematoxylin iyo eosin (H&E) iyo Masson trichrome (MT).Bakaylaha lagu rakibay substrate qaawan, caabuqyada bakteeriyadu aad bay u soo baxeen, iyo sawirada unugyada H&E waxay si cad u muujiyeen naaxyo iyo necrosis uu sababo caabuq.Dhanka kale, dusha sare ee ka-hortagga-biofouling ee aadka u xooggan ee LOIS wuxuu joojiyaa adhesion bakteeriyada, sidaas darteed ma muujineyso calaamado caabuq ah waxayna yareysaa bararka (Jaantuska 5C).Natiijooyinka midabaynta MT waxay muujiyeen isbeddel la mid ah.Si kastaba ha ahaatee, midabaynta MT waxay sidoo kale muujisay bararka bakaylaha lagu beeray LOIS, taas oo muujinaysa in soo kabashada ay ku dhowdahay inay dhacdo (Jaantus 5D).Si loo barto heerka jawaab celinta difaaca jirka, midabaynta immunohistochemical (IHC) ayaa la sameeyay iyadoo la adeegsanayo cytokines TNF-a iyo IL-6 oo la xidhiidha jawaab-celinta difaaca.Qalab taban oo qaawan oo aan bakteeriyada la kulmin ayaa la barbar dhigay LOIS oo ay la kulantay bakteeriyada laakiin aan cudurka qabin si loo barto habka bogsashada iyada oo ay maqan tahay caabuqa bakteeriyada.Jaantuska 5E waxa uu tusinayaa sawirka indhaha ee duleelka IHC ee muujinaya TNF-a.Meesha bunnigu waxay u taagan tahay jawaab celinta difaaca, taas oo muujinaysa in jawaabta difaaca ee LOIS ay yara yaraatay.Intaa waxaa dheer, muujinta IL-6 ee LOIS aad ayey uga yar tahay muujinta taban ee qaawan ee nadiifka ah (Jaantuska 5F).Muujinta cytokine waxaa lagu qiyaasey iyadoo la cabbirayo aagga wasakheynta unugyada difaaca ee u dhiganta cytokine (Jaantus 5G).Marka la barbar dhigo bakaylaha soo bandhigay ma-gacyada taban, heerarka muujinta bakaylaha ee lagu rakibay LOIS way hooseeyaan, oo muujinaya farqi macno leh.Hoos-u-dhaca muujinta cytokine waxay muujinaysaa in muddada-dheer, guryaha xasilloonida ee ka-hortagga wasakhda ee LOIS aysan la xiriirin oo keliya joojinta caabuqyada bakteeriyada, laakiin sidoo kale hoos u dhaca FBR, taas oo ay keentay macrophages ku dheggan substrate (53, 57, 58).Sidaa daraadeed, jawaab celinta difaaca ee hoos u dhacday sababtoo ah sifooyinka difaaca jirka ee LOIS ayaa laga yaabaa inay xalliyaan dhibaatooyinka soo raaca ka dib markii la geliyo, sida jawaab celinta difaaca jirka ee xad-dhaafka ah ka dib qalliin caag ah.
(A) Jaantus naqshadeedka habka samaynta biofilimka oo ku faafaya korka maqaar-galaha lafaha cudurka qaba.eDNA, DNA-da unugyada ka baxsan.(B) Jaantus shaxeedka jawaabta difaaca ka dib galinta lafaha.(C) Midabaynta H&E iyo (D) MT oo midabaynta unugyada ku xeeran beeralayda lafaha oo leh togan iyo LOIS.IHC ee cytokines-ka difaaca jirka (E) TNF-a iyo (F) IL-6 waa sawiro wasakhaysan oo qaawan oo taban iyo bakaylaha LOIS-ku beeray.(G) Qiyaasta muujinta cytokine iyadoo la eegayo cabbirka daboolka aagga (** P <0.01).
La qabsiga noole ee LOIS iyo saamaynta ay ku leedahay habka bogsashada lafaha ayaa lagu baadhay vivo iyadoo la adeegsanayo sawir-baadhista [raajada iyo sawir-qaadista-yar-yar (CT)] iyo osteoclast IHC.Jaantuska 6A wuxuu muujinayaa habka bogsashada lafaha ee ku lug leh saddex marxaladood oo kala duwan: caabuq, hagaajin, iyo dib u habeyn.Marka uu jabku dhaco, unugyada bararka iyo fibroblasts waxay geli doonaan lafta jaban waxayna bilaabaan inay koraan unugyada xididdada dhiigga.Inta lagu jiro marxaladda dayactirka, qulqulka unugyada xididada xididada ayaa ku faafa meel u dhow goobta jabka.Unugyada xididada xididku waxay bixiyaan nafaqo si ay u samaysmaan lafo cusub, taas oo loo yaqaan callus.Marxaladda ugu dambeysa ee habka bogsashada lafaha waa marxaladda dib-u-qaabaynta, taas oo xajmiga callus la dhimay xajmiga lafaha caadiga ah iyadoo la kaashanayo korodhka heerka osteoclasts firfircoon (59).Dib-u-dhiska saddex-geesoodka ah (3D) ee goobta jabka ayaa lagu sameeyay iyadoo la adeegsanayo baarista-yar-CT-ga si loo ilaaliyo kala duwanaanshaha heerka sameynta callus ee koox kasta.U fiirso qaybta iskutallaabta ee femur si aad u fiirsato dhumucda callus ee ku wareegsan lafta jaban (Jaantuska 6, B iyo C).Raajooyinka ayaa sidoo kale loo isticmaalay in lagu baaro goobaha jabka ee kooxaha oo dhan toddobaad kasta si loo ilaaliyo hababka kala duwan ee dib u soo kabashada lafaha ee koox kasta (Jaantus S9).Calus iyo lafaha bislaaday ayaa lagu muujiyay buluug/cagaar iyo fool maroodi, siday u kala horreeyaan.Inta badan nudaha jilicsan waxa lagu sifeeyaa xad hore loo sii diyaariyey.Qaawan togan iyo SHP waxay xaqiijiyeen samaynta qadar yar oo callus agagaarka goobta jabka.Dhanka kale, tabanta soo shaac baxday ee LOIS iyo goobta jaban waxaa ku hareeraysan callus qaro weyn.Sawirada Micro-CT waxay muujiyeen in samaynta callus ay caqabad ku tahay caabuqa bakteeriyada iyo caabuqa la xiriira caabuqa.Tani waa sababta oo ah habka difaaca jirka ayaa mudnaanta siinaya bogsashada dhaawacyada septica ee uu keeno caabuqa la xiriira caabuqa, halkii laga soo kaban lahaa lafaha (60).IHC iyo Acid Phosphatase (TRAP) midabaynta u adkaysta ayaa la sameeyay si loo eego dhaqdhaqaaqa osteoclast iyo dib u soo celinta lafaha (Jaantus 6D) (61).Kaliya dhowr osteoclasts firfircoon oo leh midab guduudan ayaa laga helay waxyaabo qaawan iyo SHP.Dhanka kale, osteoclasts badan oo firfircoon ayaa lagu arkay meel u dhow lafaha qaawan ee togan iyo qaangaarka ee LOIS.Dhacdadani waxay muujinaysaa in joogitaanka osteoclasts, callus agagaarka goobta jaban uu marayo habka dib u habeynta rabshadaha (62).Mugga lafaha iyo osteoclast osteoclast ee callus ayaa la qiyaasay si loo barbardhigo heerka samaynta callus ee agagaarka goobta jaban ee dhammaan kooxaha, si loo qiyaaso baaritaanka micro-CT iyo natiijooyinka IHC (Jaantus 6E, 1 iyo 2).Sidii la filayey, tabashooyinka qaawan iyo samaynta callus ee LOIS ayaa aad uga sarreeyay kooxaha kale, taas oo muujinaysa in dib-u-qaabaynta lafaha togan ay dhacday (63).Jaantuska S10 wuxuu muujinayaa sawirka indhaha ee goobta qalliinka, natiijada midabaynta MT ee unugyada laga soo ururiyey furka agtiisa, iyo natiijada midabaynta TRAP oo muujinaysa is-dhexgalka lafaha.Substrate-ka qaawan, samaynta callus iyo fibrosis xoog leh ayaa lagu arkay, halka maqaar-galaha LOIS-la daweeyay uu muujiyay dusha aan ilaa xad la hayn.Sidoo kale, marka la barbar dhigo tabashooyinka qaawan, fibrosis hoose ayaa lagu arkay bakaylaha lagu beeray LOIS, sida ay muujinayaan fallaadhaha cadcad.Intaa waxaa dheer, bararka adag (falaarta buluuga ah) waxaa loo aaneyn karaa sifooyinka difaaca jirka ee LOIS, taas oo yareyneysa bararka daran.Dusha aan dhegta lahayn ee ku wareegsan maqaar-galaha iyo fibrosis-ka oo yaraada waxay soo jeedinayaan in habka ka saarista uu sahlan yahay, taas oo badanaa keenta jajabyo kale ama caabuq.Habka bogsashada lafaha ka dib ka saarista muraayadda waxaa lagu qiimeeyay dhaqdhaqaaqa osteoclast ee isdhexgalka lafaha-lafaha.Lafaha qaawan iyo LOIS-ku-dhexgelinta labadaba waxay nuugeen heerar isku mid ah osteoclasts si ay u sii bogsadaan lafaha, taas oo muujinaysa in daahan LOIS uusan saameyn xun ku yeelan bogsashada lafaha ama jawaabta difaaca.Si loo xaqiijiyo in wax ka beddelka dusha sare ee lagu sameeyay LOIS uusan faragelin habka bogsashada lafaha, raajada raajada ayaa loo isticmaalay in lagu barbardhigo bogsashada lafaha ee bakaylaha leh ions taban oo muuqda iyo toddobaadyada 6 ee tallaalka LOIS (Jaantus 6F).Natiijooyinku waxay muujiyeen in marka la barbardhigo kooxda togan ee qaawan ee aan cudurka lahayn, LOIS waxay muujisay isla heerka bogsashada lafaha, mana jiraan calaamado muuqda oo jaban (khadka osteolysis joogto ah) ee labada kooxood.
(A) Jaantuska jaantuska habka bogsashada lafaha ka dib jabka.(B) Farqiga u dhexeeya heerka samaynta callus ee koox kasta oo dusha sare ah iyo (C) sawirka qaybta jajabka ee goobta jaban.(D) Dabin midabaynta si loo arko dhaqdhaqaaqa osteoclasst iyo dib u soo noqoshada lafaha.Iyada oo ku saleysan waxqabadka TRAP, samaynta callus dibadda ee lafaha kortikal ayaa tiro ahaan lagu falanqeeyay (E) (1) micro-CT iyo (2) dhaqdhaqaaqa osteoclast.(F) 6 usbuuc ka dib markii la geliyo, sawirada raajada ee lafta jaban ee taban ee soo shaac baxday (oo ay iftiimisay leydiga daatay ee cas) iyo LOIS (oo ay iftiimisay leydiga buluuga ah ee dhirican).Falanqaynta tirakoobka waxaa lagu sameeyay falanqaynta kala duwanaanshaha hal-jidka ah (ANOVA).P <0.05.** P <0.01.
Marka la soo koobo, LOIS waxa ay bixisa nooc cusub oo ah istaraatijiyad caabuqa bakteeriyada iyo dahaarka difaaca difaaca ee beer-lafaha.Lafaha caadiga ah ee implants oo leh shaqeynta SHP waxay muujinayaan guryaha lidka-biofouling-ka muddada-gaaban, laakiin ma sii haysan karaan hantidooda muddo dheer.Substrate-ka superhydrophobia waxay dabinaysaa xumbo hawada u dhaxaysa bakteeriyada iyo substrate-ka, taasoo ka dhigaysa jeebabka hawada, si ay uga hortagto caabuqa bakteeriyada.Si kastaba ha ahaatee, fidinta hawada awgeed, jeebabkan hawada ayaa si fudud looga saarayaa.Dhanka kale, LOIS waxay si fiican u cadeeysay awoodda ay uga hortagto caabuqyada la xiriira biofilm.Sidaa darteed, sababtoo ah sifooyinka diidmada diidmada ee lakabka saliidaha ee lagu duray dusha sare ee qaabdhismeedka micro/nano, caabuqa la xiriira caabuqa ayaa laga hortagi karaa.Sifooyin kala duwan oo ay ku jiraan SEM, AFM, XPS iyo cabbirada CA ayaa loo isticmaalaa si loo wanaajiyo xaaladaha wax soo saarka LOIS.Intaa waxaa dheer, LOIS sidoo kale waxaa lagu dabaqi karaa agabyo kala duwan oo bayooloji ah oo caadi ahaan loo isticmaalo qalabka hagaajinta lafaha, sida PLGA, Ti, PE, POM iyo PPSU.Kadib, LOIS waxaa lagu tijaabiyay gudaha vitro si loo caddeeyo sifooyinkeeda anti-biofouling ka dhanka ah bakteeriyada iyo walxaha bayoolojiga ah ee la xiriira jawaabta difaaca.Natiijooyinku waxay muujinayaan in ay leedahay bakteeriyada iyo saamaynta anti-biofouling aad u fiican marka loo eego maqaar-galaha qaawan.Intaa waxaa dheer, LOIS waxay muujinaysaa xoogga farsamada xitaa ka dib marka la isticmaalo cadaadiska farsamada, taas oo aan laga maarmi karin qalliinka caagga ah.Sababo la xiriira sifooyinka is-bogsiinta ee saliidaha ee dusha sare ee qaab-dhismeedka micro/nano, LOIS waxay si guul leh u ilaalisay sifooyinkeeda wasakheynta nafleyda.Si loo barto bayoolajiyada iyo sifooyinka bakteeriyada ee LOIS in vivo, LOIS waxaa lagu dhex beeray femur bakayle ilaa 4 toddobaad.Wax bakteeriyo ah laguma arag bakaylaha lagu beeray LOIS.Intaa waxaa dheer, isticmaalka IHC waxay muujisay hoos u dhac ku yimaada jawaabta difaaca deegaanka, taas oo muujinaysa in LOIS aanu joojinayn habka bogsashada lafaha.LOIS waxay soo bandhigtaa sifooyin bakteeriyada iyo difaaca jirka oo aad u fiican, waxaana la caddeeyey inay si wax ku ool ah uga hortagto samaynta biofilm ka hor iyo inta lagu jiro qalliinka lafaha, gaar ahaan isku-dhafka lafaha.Adigoo isticmaalaya qaabka jabka bararka ee dhuuxa lafta bakayle, saamaynta caabuqyada biofilm-ku-xiran ee habka bogsashada lafaha ee ay keentay maqaar-galaha horay loo sii daayay ayaa si qoto dheer loo darsay.Daraasad mustaqbalka ah, nooc cusub oo vivo ah ayaa loo baahan yahay si loo barto caabuqyada suurtagalka ah ka dib marka la geliyo si buuxda loo fahmo loogana hortago infekshannada la xiriira biofilm inta lagu jiro dhammaan habka bogsashada.Intaa waxaa dheer, osteoinduction weli waa caqabad aan la xallin oo ku saabsan la-qabsiga LOIS.Cilmi-baaris dheeraad ah ayaa loo baahan yahay si loo isku daro ku-dhejinta xulashada unugyada osteoinductive ama daawada dib u soo kabashada ee LOIS si looga gudbo caqabada.Guud ahaan, LOIS waxa ay matalaysaa dahaarka lafaha lafaha oo rajo leh oo leh awood farsamo iyo sifooyin ka-hortagga biofouling oo aad u wanaagsan, taas oo yarayn karta SSI iyo waxyeellooyinka difaaca.
Ku dhaq 15mm x 15mm x 1mm 304 SS substrate (Dong Kang M-Tech Co., Korea) gudaha acetone, EtOH iyo DI biyaha 15 daqiiqo si aad uga saarto wasakhda.Si loo sameeyo qaab-dhismeed heer-yar/nano ah oo dusha sare ah, substrate-ka la nadiifiyay waxaa lagu dhex milmay 48% ilaa 51% HF (DUKSAN Corp., South Korea) at 50°C.Wakhtiga engegashadu waa kala duwan yahay 0 ilaa 60 daqiiqo.Dabadeed, substrate-ka xardhan ayaa lagu nadiifiyey biyo fuuqbaxay waxaana la galiyey 65% ​​HNO3 (Korea DUKSAN Corp.) xal 50°C ah 30 daqiiqo si loo sameeyo lakabka passivation chromium oxide ee dusha sare.Ka bacdi ka dib, substrate-ka waxaa lagu dhaqaa biyo deionized oo la qalajiyey si loo helo substrate leh qaab dhismeed.Marka xigta, substrate-ka ayaa lagu soo bandhigay balaasmaha oksijiinta (100 W, 3 daqiiqo), isla markiiba waxaa lagu dhex milmay 8.88 mM POTS (Sigma-Aldrich, Germany) ee toluene heerkulka qolka 12 saacadood.Ka dib, substrate-ka lagu dahaadhay POTS ayaa lagu nadiifiyay EtOH, waxaana lagu dhajiyay 150 ° C ilaa 2 saacadood si loo helo SAM POTS cufan.Dahaarka SAM ka dib, lakabka saliidda ayaa lagu sameeyay substrate-ka iyadoo la adeegsanayo lubricant perfluoropolyether (Krytox 101; DuPont, USA) oo leh mugga loading 20 μm / cm 2. Kahor intaan la isticmaalin, ku miir saliidda iyada oo loo marayo shaandhada 0.2 micron.Ka saar saliidaha xad-dhaafka ah adigoo u janjeera xagal 45° 15 daqiiqo.Isla nidaamka wax soo saarka ayaa loo isticmaalay maqaar-galaha lafaha oo laga sameeyay 304 SS (saxadda qufulka iyo furka qufulka kortikal; Dong Kang M-Tech Co., Korea).Dhammaan qalabka lafaha lafaha waxaa loogu talagalay inay ku habboonaadaan joomatari femur bakayle.
Qaab-dhismeedka dusha sare ee substrate-ka iyo lafaha lafaha ayaa lagu kormeeray qiiqa goobta SEM (Baaritaanka F50, FEI, USA) iyo AFM (XE-100, Park Systems, South Korea).Qalafsanaanta dusha sare (Ra, Rq) waxaa lagu cabbiraa iyadoo lagu dhufto bedka 20 μm 20 μm (n=4).Nidaamka XPS (PHI 5000 VersaProbe, ULVAC PHI, Japan) oo ku qalabaysan isha Al Kα X-ray oo cabirkeedu yahay 100μm2 ayaa loo isticmaalay in lagu falanqeeyo ka kooban kiimikaad oogada.Nidaamka cabbiraadda CA ee ku qalabaysan kamarad sawir qaade firfircoon (SmartDrop, FEMTOBIOMED, ​​South Korea) ayaa loo isticmaalay in lagu cabbiro dareeraha CA iyo SA.Cabbir kasta, 6 ilaa 10 μl oo dhibco ah (biyo fuuqsaday, dhiigga faraska, EG, 30% ethanol, iyo HD) ayaa la dhigayaa dusha sare si loo cabbiro CA.Marka xagasha u janjeerta substrate-ku uu ku kordho xawaare dhan 2°/s (n = 4), SA waxa la cabbiraa marka uu dhibicda hoos u dhaco.
Pseudomonas aeruginosa [Aruurinta Dhaqanka Nooca Ameerikaanka (ATCC) 27853] iyo MRSA (ATCC 25923) ayaa laga soo iibsaday ATCC (Manassas, Virginia, USA), dhaqanka saamiyada waxaa lagu hayaa -80 ° C.Kahor inta aan la isticmaalin, dhaqanka barafaysan waxaa lagu dhex milmay maraq soybean ah oo trypsin-ku dhalaalay (Komed, Korea) at 37°C ilaa 18 saacadood ka dibna laba jeer ayaa la wareejiyay si loo dhaqaajiyo.Ka dib markii la isku dhejiyay, dhaqanka waxaa lagu xareeyay 10,000 rpm 10 daqiiqo at 4°C waxaana lagu maydhay laba jeer xal PBS (pH 7.3).Dhaqanka centrifuged-ka ah ayaa markaa hoos loo dhigaa taarikada agar ee dhiigga (BAP).MRSA iyo Pseudomonas aeruginosa ayaa la diyaariyey habeen waxaana lagu beeray maraq Luria-Bertani.Isku-duubnaanta Pseudomonas aeruginosa iyo MRSA ee ku jira xiniinyaha waxaa qiyaas ahaan go'aamiyay CFU ee hakinta isku-dhafka isku-dhafka ah ee agar.Ka dib, ku hagaaji fiirsashada bakteeriyada ilaa 0.5 McFarland heerka, taas oo u dhiganta 108 CFU/ml.Ka dibna ku milo hakinta bakteeriyada shaqaynaysa 100 jeer ilaa 106 CFU/ml.Si loo tijaabiyo adhesion-ka bakteeriyada, substrate-ka ayaa lagu jeermiyeeyay 121°C 15 daqiiqo kahor intaan la isticmaalin.Substrate-ka ayaa markaa loo wareejiyay 25 ml oo hakinta bakteeriyada waxaana lagu beeray 37°C iyadoo la ruxruxo xoog leh (200 rpm) 12 iyo 72 saacadood.Ka dib marka la suubiyo, substrate kasta ayaa laga soo saaray kubatarka waxaana lagu maydhay 3 jeer PBS si looga saaro bakteeriya kasta oo sabaynaysa oogada.Si loo eego biofilimka substrate-ka, biofilm-ka waxaa lagu hagaajiyay methanol waxaana lagu walaaqay 1 ml oo orange Crimidine ah 2 daqiiqo.Kadibna mikroskoob florescence ah (BX51TR, Olympus, Japan) ayaa loo isticmaalay in sawiro laga qaado biofilm-ka wasakhaysan.Si loo qiyaaso biofilm-ka substrate-ka, unugyada ku lifaaqan ayaa laga soocay substrate-ka habka wareegga wareegga, kaas oo loo tixgeliyey inuu yahay habka ugu habboon ee looga saaro bakteeriyada ku xiran (n = 4).Adiga oo isticmaalaya quwadaha nadiifka ah, ka saar substrate-ka dhexdhexaadka koritaanka oo taabo saxanka ceelka si aad uga saarto dareeraha xad dhaafka ah.Unugyada dabacsan ee ku dheggan ayaa laga saaray iyadoo laba jeer lagu dhaqay PBS nadiif ah.Mid kasta oo ka mid ah substrate-ka ayaa markaa lagu wareejiyay tuubo shaybaadho nadiif ah oo ka kooban 9 ml oo ah 0.1% borotiinka ept saline (PSW) iyo 2 g oo ah 20 ilaa 25 ul galaas oo nadiif ah (0.4 ilaa 0.5 mm dhexroor).Ka dib waxaa la maroojiyey ilaa 3 daqiiqo si unugyadu uga soocdo muunada.Ka dib vortexing ka dib, joojinta si isdaba joog ah ayaa loo qasi jiray 10-laab iyadoo leh 0.1% PSW, ka dibna 0.1 ml oo qasitaan kasta ah ayaa lagu tallaalay BAP.Ka dib 24 saacadood oo ku-tiirsanaan ah 37 ° C, CFU waxaa lagu tiriyay gacanta.
Unugyada, mouse fibroblasts NIH/3T3 (CRL-1658; American ATCC) iyo mouse macrophages RAW 264.7 (TIB-71; American ATCC) ayaa la isticmaalay.U isticmaal Dulbecco's Eagle dhexdhexaad ah oo la beddelay (DMEM; LM001-05, Welgene, Korea) dhaqanka jiirka fibroblasts oo ku kabo 10% serum kubka (S103-01, Welgene) iyo 1% penicillin-streptomycin (PS; LS202-02, Welgene (Welgene) Isticmaal DMEM si aad u isticmaasho macrophages dhaqameed, oo lagu kabo 10% serum bovine (S001-01, Welgene) iyo 1% PS Ku rid substrate-ka saxan dhaqameed unug lix ah, Oo ku tallaal unugyada 105 unug / cm2. Unugyada waxaa lagu dhajiyay habeenkii 37 ° C iyo 5% CO2 ee midabaynta unugyada, unugyada waxaa lagu hagaajiyay 4% paraformaldehyde 20 daqiiqo waxaana lagu dhejiyay 0.5% Triton X 5 daqiiqo gudaha -100 at 37°C muddo 30 daqiiqo ah ka dib habka soo saarista, isticmaal substrate leh 4′,6-diamino-2-phenylindole (H -1200, Vector Laboratories, UK) dhexdhexaadinta VECTASHIELD (n = 4 per cell). , fluorescein, fluorescein isothiocyanate-albumin (A9771, Sigma-Aldrich, Germany) iyo plasma aadanaha The Alexa Fluor 488-conjugated fibrinogen (F13191, Invitrogen, USA) ayaa lagu milmay PBS (10 mM, pH 7.4).Heerarka albumin iyo fibrinogen waxay ahaayeen 1 iyo 150 μg/ml, siday u kala horreeyaan.Substrate-ka ka dib Kahor intaadan dhex gelin xalka borotiinka, ku raaci PBS si aad u fuuqceliyo dusha sare.Kadibna dhex geli dhammaan substrate-yada saxan lix ceel leh oo ay ku jiraan xalinta borotiinka oo ku dheji 37 ° C 30 iyo 90 daqiiqo.Ka dib, substrate-ka ayaa markaa laga saaray xalka borotiinka, si tartiib ah ayaa loogu dhaqay PBS 3 jeer, waxaana lagu hagaajiyay 4% paraformaldehyde (n = 4 ee borotiin kasta).Kaalshiyamka, sodium chloride (0.21 M) iyo potassium phosphate (3.77 mM)) ayaa lagu milmay biyo la fuuqsaday.pH ee xalka waxaa lagu hagaajiyay 2.0 iyadoo lagu daray xalalka hydrochloride (1M).Kadibna kaalshiyam chloride (5.62 mM) ayaa lagu milmay xalka.Marka lagu daro 1M tris (hydroxymethyl) -amino Methane waxay hagaajinaysaa pH ee xalka 7.4.Ku rid dhammaan substrate-ka saxan lix-si fiican ah oo ay ka buuxaan 1.5x calcium fosfate xalinta kana saar xalka 30 daqiiqo ka dib.Si loo midabeeyo, 2 g Alizarin Red S (CI 58005) Ku qas 100 ml oo biyo ah.Ka dib, isticmaal 10% ammonium hydroxide si aad pH-ga ugu hagaajiso 4. Ku dheji substrate-ka xal Alizarin Cas ilaa 5 daqiiqo, ka dibna ka rux dheeha dheeraadka ah oo tirtir.Habka ruxitaanka ka dib, ka saar substrate-ka.Maaddadu waa fuuqbaxa, ka dibna lagu rusheeyaa acetone 5 daqiiqo, ka dibna la geliyo acetone-xylene (1: 1) xal 5 daqiiqo, ugu dambeyntiina lagu dhaqo xylene (n = 4).Microscope Fluorescence (Axio Imager) oo leh ×10 iyo ×20 lenses ujeedo ayaa la isticmaalaa..A2m, Zeiss, Germany) sawirada dhammaan substrate-yadaImageJ/FIJI (https://imagej.nih.gov/ij/) ayaa loo isticmaalay in lagu qiyaaso xogta adhesion ee walxaha noolaha ee koox kasta oo afar goobood oo sawiro kala duwan ah.U beddel dhammaan sawirada sawirada laba-geesoodka ah oo leh meelo go'an oo la barbar dhigo substrate-ka.
Zeiss LSM 700 mikroskoob confocal ayaa loo isticmaalay si loola socdo xasiloonida lakabka saliidaha ee PBS ee qaabka milicsiga.Muunada dhalada ku salaysan ee SAM-ku-salaysan ee fluorine-ka ah ee leh lakabka duritaan ee la duray ayaa lagu dhex milmay xal PBS, waxaana lagu tijaabiyay iyadoo la adeegsanayo ruxruxiyaha orbital (SHO-1D; Daihan Scientific, South Korea) iyadoo lagu hoos jiro xaalado gariir khafiif ah (120 rpm).Dabadeed qaado muunadda oo la soco lumitaanka saliidaha adiga oo cabbiraya luminta iftiinka iftiinka.Si aad u hesho sawirada fluorescence ee qaabka milicsiga, muunada waxaa lagu soo bandhigay 633 nm laser ka dibna waa la ururiyaa, sababtoo ah iftiinka ayaa dib uga soo muuqan doona muunada.Tijaabooyinku waxa la cabbiray waqtiyo u dhexeeya 0, 30, 60, iyo 120 saacadood.
Si loo go'aamiyo saamaynta habka wax-ka-beddelka dusha sare ee guryaha nanomechanical ee lafaha lafaha, nanoindenter (TI 950 TriboIndenter, Hysitron, USA) oo ku qalabaysan caarada dheeman ee Berkovich oo saddex geesood ah ayaa loo isticmaalay in lagu cabbiro nanoindenedione.Culayska ugu sarreeya waa 10 mN, aagguna waa 100μmx 100μm.Dhammaan cabbiraadaha, wakhtiga rarista iyo dejintu waa 10 s, iyo wakhtiga haynta ee ka hooseysa culeyska ugu sarreeya waa 2 s.Cabbiraad ka soo qaad shan meelood oo kala duwan oo qaado celceliska.Si loo qiimeeyo waxqabadka xoogga farsamada ee culeyska saaran, imtixaan qallooca saddex-dhibcood ah ayaa la sameeyay iyadoo la adeegsanayo mashiinka tijaabada caalamiga ah (Instron 5966, Instron, USA).Substrate-ka waxaa lagu cadaadiyaa xawaare joogto ah oo ah 10 N/s oo leh culeys kordhay.Barnaamijka softiweerka Bluehill Universal (n = 3) ayaa loo isticmaalay in lagu xisaabiyo module-ka dabacsanaanta iyo walbahaarka cadaadiska ugu badan.
Si loo ekaysiiyo habka qalliinka iyo waxyeelada makaanikada ee laxiriirta ee keentay inta lagu gudajiro qaliinka, habka qalliinka waxaa lagu sameeyay in vitro.Femurs-ka waxa laga soo ururiyay bakaylaha cadaanka ah ee New Zealand ee la toogtay.Femur waa la nadiifiyay oo lagu hagaajiyay 4% paraformaldehyde muddo 1 toddobaad ah.Sida lagu qeexay habka tijaabada xayawaanka, femur go'an ayaa qaliin lagu sameeyay.Qalitaanka ka dib, maqaar-galaha lafaha waxaa lagu rusheeyey dhiigga (dhiigga faraska, KISAN, Kuuriya) 10 s si loo xaqiijiyo in dhiig-ku-dhejinta uu dhacay ka dib markii dhaawaca farsamada la isticmaalo (n = 3).
Wadarta 24 bakaylaha cad ee New Zealand (miisaanka 3.0 ilaa 3.5kg, celceliska da'da 6 bilood) ayaa si aan kala sooc lahayn loo qaybiyay afar kooxood: taban qaawan, togan qaawan, SHP iyo LOIS.Dhammaan nidaamyada ku lug leh xayawaanka waxaa loo sameeyay si waafaqsan heerarka anshaxa ee Guddiga Adeegga Xannaanada Xoolaha ee Hay'adda (IACUC la ansixiyay, KOREA-2017-0159).Maqaar-galaha lafaha wuxuu ka kooban yahay saxan quful oo leh shan godad (dhererka 41 mm, ballac 7 mm iyo dhumucdiisuna tahay 2 mm) iyo furayaasha qufulka (dhererka 12 mm, dhexroor 2.7 mm) ee hagaajinta jabka.Marka laga reebo taarikadaas iyo birta loo isticmaalo kooxda taban ee qaawan, dhammaan taarikada iyo boolaladaha waxaa lagu darey hakinta MRSA (106 CFU/ml) muddo 12 saacadood ah.Kooxda qaawan ee taban (n=6) waxa lagu daweeyay maqaar qaawan oo dusha sare ah iyada oo aan la kulmin joojinta bakteeriyada, sida xakamaynta xun ee caabuqa.Kooxda togan ee qaawan (n = 6) waxaa lagu daweeyay maqaar qaawan oo bakteeriyadu gasho si ay u xakameeyaan caabuqa.Kooxda SHP (n = 6) waxaa lagu daweeyay maqaar-galaha SHP ee bakteeriyada.Ugu dambeyntii, kooxda LOIS waxaa lagu daaweeyay bakteeriya soo bandhigtay LOIS implants (n = 6).Xoolaha oo dhan waxaa lagu hayaa qafis, waxaana la bixiyaa cunto iyo biyo badan.Kahor qalliinka, bakaylaha waxaa la soomay 12 saacadood.Xayawaanka waxaa lagu suuxiyay duritaanka muruqa ee xylazine (5mg/kg) iyo cirbadeynta paclitaxel (3mg/kg) si loogu shubo.Intaa ka dib, bixi 2% isoflurane iyo 50% ilaa 70% ogsijiin caafimaad (heerka socodka 2 L/min) iyada oo loo marayo habka neefsiga si loo ilaaliyo suuxinta.Waxaa lagu dhex beeraa hab toos ah oo loo maro femur lateral.Ka dib markii timaha la gooyey iyo jeermiska-jeermiska povidone-iodine ee maqaarka, jeexitaan dhererkiisu yahay 6 cm ayaa laga sameeyay bannaanka femur dhexe ee bidix.Marka la furo farqiga u dhexeeya muruqyada daboolaya femur, femur si buuxda ayaa loo soo bandhigay.Saxanka dhig dhinaca hore ee usha femoral oo ku hagaaji afar boolal.Ka dib hagaajinta, isticmaal daab miinshaar ah (1 mm qaro weyn) si aad si macmal ah ugu abuurto jabka aagga u dhexeeya daloolka labaad iyo daloolka afraad.Markii uu soo idlaaday howlgalka ayaa waxaa lagu dhaqay milix, waxaana lagu xiray tolmo.Bakayle kasta waxa lagu duray maqaarka hoostiisa iyadoo la raacayo enrofloxacin (5 mg/kg) oo lagu qasi jiray saddex-meelood meel cusbo ah.Raajooyinka qalliinka ka dib ee femur ayaa laga qaaday dhammaan xayawaanka (0, 7, 14, 21, 28, iyo 42 maalmood) si loo xaqiijiyo lafo-beelka lafta.Ka dib suuxinta qoto dheer, dhammaan xayawaanka waxaa dilay KCl (2 mmol/kg) oo xididada laga qaadaa 28 iyo 42 maalmood.Ka dib markii la fuliyay, femur waxaa lagu sawiray micro-CT si loo eego oo loo barbardhigo habka bogsashada lafaha iyo samaynta lafaha cusub ee u dhexeeya afarta kooxood.
Ka dib markii la fuliyay, unugyada jilicsan ee si toos ah ula xiriira lafaha lafaha ayaa la ururiyay.Nudaha waxaa lagu hagaajiyay 10% dhexdhexaad ah oo formalin ah habeenkii ka dibna fuuqbaxay EtOH.Nudaha fuuqbaxay waxaa lagu dhex daray baarashooyin waxaana lagu qaybiyay dhumuc dhan 40 μm iyadoo la isticmaalayo microtome (400CS; EXAKT, Germany).Si loo arko caabuqa, midabaynta H&E iyo midabaynta MT ayaa la sameeyay.Si loo hubiyo jawaabta martida loo yahay, nudaha qaybta ayaa lagu darey anti-TNF-α asaasiga ah ee bakaylaha (AB6671, Abcam, USA) iyo bakaylaha anti-IL-6 (AB6672; Abcam, USA), ka dibna lagu daaweeyay malayga.OxidaseCodso nidaamka midabaynta avidin-biotin complex (ABC) qaybaha sida waafaqsan tilmaamaha soo saaraha.Si ay ugu muuqato badeecad falcelin bunni ah, 3,3-diaminobenzidine ayaa loo adeegsaday dhammaan qaybaha.Sawir gacmeed dhijitaal ah (Pannoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Hungary) ayaa loo isticmaalay in lagu sawiro dhammaan jeexjeexyada, iyo ugu yaraan afar substrate ee koox kasta ayaa lagu falanqeeyay software ImageJ.
Sawirada raajada ayaa laga qaaday dhammaan xayawaanka qalliinka ka dib iyo toddobaad kasta si loola socdo bogsashada jabka (n=6 koox kasta).Ka dib fulinta, micro-CT-xalinta sare ayaa loo isticmaalay si loo xisaabiyo samaynta callus agagaarka femur ka dib bogsashada.Femur-ka la helay ayaa la nadiifiyay, lagu hagaajiyay 4% paraformaldehyde 3 maalmood, oo fuuqbaxay 75% ethanol.Lafaha fuuqbaxay ayaa markaa la sawiray iyadoo la isticmaalayo micro-CT (SkyScan 1173, Brooke Micro-CT, Kandy, Belgium) si loo soo saaro sawirada 3D voxel (2240 ​​× 2240 pixels) ee muunadda lafaha.Isticmaal 1.0 mm Al filter si aad u yarayso qaylada signalada oo aad u mariso xallinta sare dhammaan sawirada (E = 133 kVp, I = 60 μA, wakhtiga isdhexgalka = 500 ms).Software-ka Nrecon (nooca 1.6.9.8, Bruker microCT, Kontich, Belgium) ayaa loo isticmaalay in lagu soo saaro mugga 3D ee muunadda la sawiray ee saadaasha 2D ee la helay.Falanqaynta, sawirka dib loo dhisay ee 3D wuxuu u qaybsan yahay 10mm × 10mm × 10mm xabadaha iyadoo loo eegayo goobta jaban.Xisaabi callus ka baxsan lafta kortikal.DataViewer (nooca 1.5.1.2; Bruker microCT, Kontich, Belgium) software ayaa loo isticmaalay in si dhijitaal ah loogu jiheeyo mugga lafaha ee la sawiray, iyo CT-Analyzer (nooca 1.14.4.1; Bruker microCT, Kontich, Belgium) software ayaa loo isticmaalay falanqaynta.Xidhiidhada nuugista raajada ee lafaha qaan-gaadhka ah iyo callus waxaa lagu kala saaraa cufnaantooda, ka dibna mugga callus waa la qiyaasaa (n = 4).Si loo xaqiijiyo in la-qabsiga noolaha ee LOIS aanu dib u dhigin habka bogsashada lafaha, raajada dheeraadka ah iyo falanqaynta micro-CT ayaa lagu sameeyay laba bakayle: kooxaha qaawan iyo LOIS.Labada kooxoodba waxa la toogtay todobaadkii 6-aad.
Femurs-ka xoolaha la sadqeeyay ayaa la ururiyay oo lagu hagaajiyay 4% paraformaldehyde muddo 3 maalmood ah.Maqaar-galaha lafaha ayaa markaa si taxadar leh looga saaraa femur.Femur-ka ayaa la dhimay 21 maalmood iyadoo la isticmaalayo 0.5 M EDTA (EC-900, National Diagnostics Corporation).Dabadeed femur-ka la jajabiyey ayaa la dhex geliyay EtOH si uu fuuqbaxo.Femur fuuqbaxa ayaa laga saaray xylene waxaana lagu dhex daray paraffin.Kadib muunada waxaa lagu jarjaray mikrotome rotary oo toos ah (Leica RM2255, Leica Biosystems, Germany) oo dhumucdiisu tahay 3 μm.Wixii wasakhaynta TRAP (F6760, Sigma-Aldrich, Germany), shaybaarada qaybta ah ayaa laga saaray, fuuq-celinta oo lagu dhex galiyay reagent TRAP at 37°C muddo 1 saac ah.Sawirada waxaa lagu helay iyadoo la isticmaalayo sawir-qaade (Pannoramic 250 Flash III, 3DHISTECH, Hungary) waxaana lagu qiyaasaa iyadoo la cabbirayo daboolka aagga wasakhaysan.Tijaabo kasta, ugu yaraan afar qaybood oo koox kasta ah ayaa lagu falanqeeyay barnaamijka ImageJ.
Falanqaynta muhiimka ah ee tirakoobka waxaa lagu sameeyay iyadoo la adeegsanayo GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., USA).Tijaabada t-t-t-t-ka ee aan lammaane lahayn iyo falanqaynta kala-duwanaanta hal-jidka ah (ANOVA) ayaa loo isticmaalay in lagu tijaabiyo faraqa u dhexeeya kooxaha qiimaynta.Heerka muhiimada waxaa lagu muujiyey jaantuska sida soo socota: *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 iyo ****P<0.0001;NS, ma jiro farqi weyn.
Wixii agab dheeri ah ee maqaalkan, fadlan eeg http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/44/eabb0025/DC1
Kani waa maqaal gelitaan furan oo lagu qaybiyey shuruudaha Shatiga Hal-abuurka Guud ee Aan Ganacsiga ahayn, kaas oo u oggolaanaya isticmaalka, qaybinta iyo taranka meel kasta, haddii isticmaalku aanu ahayn faa'iido ganacsi iyo aasaasku waa in asalka uu yahay. shaqadu waa sax .Tixraac
Fiiro gaar ah: Waxaan kaliya ku weydiineynaa inaad bixiso ciwaanka iimaylka si qofka aad kula taliso bogga u ogaado inaad rabto inay arkaan iimaylka iyo in iimaylka uusan ahayn spam.Ma qabsan doono ciwaanno iimayl ah
Su'aashan waxaa loo isticmaalaa in lagu tijaabiyo inaad tahay booqde bini'aadan iyo in laga hortago soo gudbinta spamka ee tooska ah.
Choe Kyung Min, Oh Young Jang, Park Jun Joon, Lee Jin Hyuk, Kim Hyun Cheol, Lee Kyung Moon, Lee Chang Kyu, Lee Yeon Taek, Lee Sun-uck, Jeong Morui
Dahaarka ka baxsanaya bakteeriyada iyo difaaca jirka ee maqaar-galaha lafaha ayaa yarayn kara caabuqyada iyo jawaabaha difaaca ee ay keenaan caabuqyada.
Choe Kyung Min, Oh Young Jang, Park Jun Joon, Lee Jin Hyuk, Kim Hyun Cheol, Lee Kyung Moon, Lee Chang Kyu, Lee Yeon Taek, Lee Sun-uck, Jeong Morui
Dahaarka ka baxsanaya bakteeriyada iyo difaaca jirka ee maqaar-galaha lafaha ayaa yarayn kara caabuqyada iyo jawaabaha difaaca ee ay keenaan caabuqyada.
©2021 Ururka Maraykanka ee Horumarinta Sayniska.xuquuqda oo dhan way xifdisan yihiin.AAAS waa shuraakowga HINARI, AGORA, OARE, CHORUS, CLOCKSS, CrossRef iyo COUNTER.Horumarka Sayniska ISSN 2375-2548.